特殊生物顯微鏡的原理與使用(存儲(chǔ)版)
【正文】 聚光器，將環(huán)狀光闌裝在聚光器支架上，把綠色濾光片放在上面，它可吸收紅色和藍(lán)色光，使波長(zhǎng)范圍小的單色光線進(jìn)行照明，并有吸熱作用，能使相差觀察獲得良好的效果。因此可用以觀察活細(xì)胞或未染色標(biāo)本。向上緩慢調(diào)升聚光鏡，使鏡頭油與載玻片底面相接觸后。 結(jié)構(gòu)特點(diǎn) 使用中央遮光板或暗視野聚光器（常用的是拋物面聚光器），使光源的中央光束被阻擋。 暗場(chǎng)顯微鏡原理 在暗視野中所觀察到的是被檢物體的衍射光圖像，并非物體本身，所以只能看到物體的存在和運(yùn)動(dòng)，不能辨清物體的細(xì)微結(jié)構(gòu)。 (3)視場(chǎng)光圈如不在視野中央，可利用聚光鏡外側(cè)兩個(gè)調(diào)節(jié)螺絲進(jìn)行調(diào)整，再將其開(kāi)大到相應(yīng)位置。 ? 相位板安裝在物鏡的后焦面處，相板裝有吸收光線的吸收膜和推遲相位的相位膜。先使用低倍相差物鏡，按普通顯微鏡操作方法進(jìn)行對(duì)光和調(diào)焦。 偏光顯微鏡 ? 依據(jù)波動(dòng)光學(xué)原理觀察和精密測(cè)定標(biāo)本細(xì)節(jié) ,或透明物體改變光束的物理參數(shù) ,以此判別物質(zhì)結(jié)構(gòu)的一種顯微鏡 ? 分辨率可達(dá) ? 將普通光改變?yōu)槠窆膺M(jìn)行鏡檢 ,以鑒別某一物質(zhì)具有單折射性 (各向同性 )或雙折射性 (各向異性 ) 一、偏振光與自然光 1. 橫波的偏振性 光矢量的 振動(dòng)方向總與光的傳播方向垂直，在垂直于光傳播方向的平面內(nèi) , 可有不同的 振動(dòng)方向。 尋常光線 (o光 ):遵守折射定律。如石英、糖、酒石酸鉀鈉等。 ? 顯微鏡熒光利用光源激發(fā) ——光化熒光 ? 熒光的種類： 自發(fā)熒光（固有熒光） 二次熒光 ? 熒光的性質(zhì)： 吸收光，必需有激發(fā)光源 熒光波長(zhǎng)＞激發(fā)波長(zhǎng)（損失熱能） 熒光強(qiáng)度極小于激發(fā)光的強(qiáng)度 有不同程度的衰減 熒光強(qiáng)度取決于激發(fā)光強(qiáng)度、被檢物濃度、熒光效率 二、熒光顯微鏡的種類： 透射式 落射式 三、熒光顯微鏡主要部件 透射式 ? 汞燈光源 ? 激發(fā)濾色鏡 ? 吸收濾色鏡 ? 暗場(chǎng)聚光鏡 落射式 ? 汞燈光源 ? 激發(fā)濾色鏡 ? 分色鏡 ? 吸收濾色鏡 熒光顯微鏡內(nèi)部構(gòu)造 落射熒光顯微鏡光路圖 透射熒光顯微鏡光路圖 WU WIB DUAL BAND WIBA WIG WIB DAPI+FITC FITC+PI 雙重染色標(biāo)本的單色和雙色觀察 ? 熒光光源 一般采用超高壓汞燈 (50一 200W)， 它可發(fā)出各種波長(zhǎng)的光，但每種熒光物質(zhì)都有一個(gè)產(chǎn)生最強(qiáng)熒光的激發(fā)光波長(zhǎng)，所以需加用激發(fā)濾片（一般有紫外、紫色、藍(lán)色和綠色激發(fā)濾片），僅使一定
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