特殊生物顯微鏡的原理與使用-文庫吧在線文庫
【正文】 波長的激發(fā)光透過照射到標(biāo)本上，而將其他光都吸收掉。 落射式熒光顯微鏡需在光路的插槽中插入所要求的激發(fā)濾片／雙色束分離器／阻斷濾片的插塊。 利用聚焦的激光束在樣品表面掃描 ， 同時利用光電檢測器件接收樣品反射光 （ 或透射光 ） ，樣品結(jié)構(gòu)的變化使反射光 （ 或透射光 ）強(qiáng)度改變 ， 因而使光電檢測器的輸出電流改變 ， 經(jīng)信號處理 ， 同步顯示在計算機(jī)屏幕上 。組織中的自發(fā)性熒光物質(zhì)如神經(jīng)細(xì)胞和心肌細(xì)胞等內(nèi)的脂褐素呈棕黃色熒光，肝貯脂細(xì)胞和視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞內(nèi)的維生素 A呈綠色熒光，某些神經(jīng)內(nèi)分泌細(xì)胞和神經(jīng)纖維內(nèi)的單胺類物質(zhì)（兒茶酚胺、 5－羥色胺、組胺等）在甲醛作用下呈不同顏色的熒光，組織內(nèi)含有的奎寧、四環(huán)素等藥物也呈現(xiàn)一定的熒光。二是選擇并讓特異的熒光透過，表現(xiàn)出專一的熒光色彩。這樣在強(qiáng)烈的對襯背景下，即使熒光很微弱也易辨認(rèn)，敏感性高，主要用于細(xì)胞結(jié)構(gòu)和功能以及化學(xué)成分等的研究。 o光和 e光都是線偏振光 ,且振動方向相互垂直 二向色性：某些晶體（電氣石、硫酸金雞鈉堿晶體等）對光振動有強(qiáng)烈的選擇性吸收能力，這種性質(zhì)稱為二向色性。 檢偏：檢查入射光的偏振性的過程。 （ 4）觀察 換回目鏡，按常規(guī)要領(lǐng)進(jìn)行觀察。否則直射光或衍射光的光路紊亂，應(yīng)被吸收的光不能吸收，該推遲相位的光波不能推遲，就失去了相差顯微鏡的作用。 ? 相差顯微鏡能夠改變直射光或衍射光的相位，并且利用光的衍射和干涉現(xiàn)象，把相位差變成振幅差 (明暗差 )，同時它還吸收部分直射光線，以增大其明暗的反差。 暗場顯微鏡的要求 ? 要求載玻片和蓋玻片必須無疵痕和灰塵 ? 物鏡前透鏡必須清潔無塵 ? 載玻片和蓋玻片厚度必須絕對符合要求 (1)換上暗場聚光鏡（干燥系或油浸系）并在聚光鏡透鏡上表面滴上鏡頭油。 暗視野顯微鏡就是利用微粒發(fā)光原理設(shè)計的。但被檢物體為非均質(zhì)時，并大于 1／ 2波長，則各級衍射光線同時進(jìn)入物鏡，在某種程度上可觀察物體的構(gòu)造。 2 相差顯微鏡 原理 ? 光波有振幅（亮度）、波長（顏色）及相位 (指在某一時間上光的波動所能達(dá)到的位置 )的不同。它除能推遲直射光線或衍射光的相位以外，還有吸收光使亮度發(fā)生變化的作用。 旋轉(zhuǎn)環(huán)狀光闌，使光闌的直徑和孔寬與所使用的相差物鏡相適應(yīng)，如相差物鏡為 40X時應(yīng)用 40X標(biāo)示孔的光闌。 v 0 H E 只有橫波才有偏振現(xiàn)象 ? 光矢量只在某一固定的方向上振動。對于晶體一切方向都具有相同的折射率，且在入射面內(nèi)傳播。 偏振光經(jīng)過旋轉(zhuǎn)的檢偏器后光強(qiáng)發(fā)生變化 . 起偏器 檢偏器 自然光 線偏振光 . . . . 偏振光經(jīng)過旋轉(zhuǎn)的檢偏
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