【正文】 洗滌沉淀 ， 再吸去清液 ， 用沸水如此洗滌至沉淀 ， 用石蕊試紙試驗呈中性為止 。 如試樣的脂肪含量較高時 ， 可用抽提脂肪后的殘渣作試樣 ，或?qū)⒃嚇拥闹居靡颐殉樘岢鋈?。整個過濾過程與抽濾瓶連接 ， 減壓抽濾 。 2023/3/23 84 第六節(jié) 粗纖維素 ?古氏坩堝 （ Gooch crucible ） ：性質(zhì)：一種瓷質(zhì)的過濾坩堝 。 2023/3/23 82 第六節(jié) 粗纖維素 （ 二 ） 試劑 ? 95％ 乙醇；乙醚；石蕊試紙； ? 酸洗石棉：先用 ％ 堿液洗至中性 ， 再用乙醇和乙醚先后洗三次 ， 待乙醚揮發(fā)凈后備用； ? ％ （ ） 硫酸溶液：用移液管量取比重 ， 注入 500ml水中 ， 經(jīng)標定后 ， 調(diào)至準確濃度； ? ％ （ ） 氫氧化鈉溶液：取 化鈉溶解于 500ml水中 ， 經(jīng)標定后 ， 調(diào)至準確濃度 。 2023/3/23 81 第六節(jié) 粗纖維素 二 、 （ 一 ） 測定原理 ? 樣品先后經(jīng)沸騰的 ， 并在沸騰的條件下加熱 30min， 以將 淀粉 、 果膠物質(zhì) 、 蛋白質(zhì) 、脂肪 ， 部分半纖維素 和 木質(zhì)素 水解除去 。 2023/3/23 80 第六節(jié) 粗纖維素 一 、 含義 ?測定方法： 。 食品及飼料中纖維物質(zhì)的存在 ，影響機體對 含氮物質(zhì)及脂肪 的消化 ， 以致不能充分利用 蛋白質(zhì)和脂肪 ， 但對人體有一定的保健作用 。 步驟： 1. 除去脂肪和可溶性糖 2. 加酸水解 3. 沉淀蛋白質(zhì) 4. 測還原糖 2023/3/23 79 第六節(jié) 粗纖維素 一 、 含義 ?粗纖維素 是由 纖維素 、 半纖維素 、 木質(zhì)素 和 果膠質(zhì)等一系列不溶于稀酸 、 稀堿 、 乙醇 、 乙醚及水的有機物質(zhì)所組成 。 一般淀粉酶活力為 1： 25， 1：50及 1： 100。 2023/3/23 77 第五節(jié) 淀粉 ② 試樣含脂肪量很少時 ， 可不用乙醚洗滌 。 每 100g粉末加 20％ 乙醇200ml， 浸泡 24h后 , 用細布壓榨并過濾 , 加雙倍濾液量的乙醇進行沉淀 。 測定結(jié)果取小數(shù)點后第一位 。 M—— 試樣水分百分率 ， ％ ； —— 還原糖 （ 以葡萄糖計 ） 換算為淀粉的因數(shù) 。 V—— 轉(zhuǎn)化后稀釋為 100ml， 測定還原糖的體積 ， ml。 （ 消除淀粉酶溶液的影響 ） 2023/3/23 75 第五節(jié) 淀粉 淀粉干基含量按下列公式計算： 淀粉 (干基 %) = 式中： A—— 轉(zhuǎn)化后測得的還原糖 （ 以葡萄糖計 ） 重量 ， mg。 （ 淀粉水解 ） ?過濾 ， 棄去初濾液 ， 取 50ml注入 100ml容量瓶中 ， 加6N鹽酸 5ml， 在 68～ 70℃ 水浴中加熱 15min， 冷后加甲基紅指示液 2滴 ， 用 20％ 氫氧化鈉溶液中和 , 加水至刻度 , 混勻 , 用以測定還原糖 。 2023/3/23 74 第五節(jié) 淀粉 （ 四 ） 操作步驟 ?然后取樣 1滴加 1滴碘液 ,如顯藍色 , 再加熱糊化 ,并加淀粉酶溶液 （ 或麥芽汁 ） 20ml， 水解 至碘液不呈藍色為止 。 再以 3N鹽酸浸泡數(shù)小時 ， 用水洗至不呈酸性 ， 使之成為微細的軟纖維 ， 用水浸泡貯存于玻璃瓶內(nèi) ， 作填充古氏坩堝用 。 8. 20％ 氫氧化鈉溶液； 9. 甲基紅指示液： ％ 甲基紅乙醇溶液； 2023/3/23 72 第五節(jié) 淀粉 （ 三 ） 試劑 10. 費林氏溶液： 堿性酒石酸銅甲液：取硫酸銅結(jié)晶 ， 加適量水溶解 ， 加硫酸 ， 再加水至 500ml， 用精制石棉過濾； 堿性酒石酸銅乙液：取酒石酸鉀鈉 173g與氫氧化鈉50g， 加適量水溶解 ， 稀釋至 500ml， 用精制石棉過濾 ，貯存于具有橡皮塞的玻璃瓶內(nèi)； 11. 精制石棉 ：先用 3N鹽酸將石棉浸泡 2～ 3日后 ， 用水洗凈 。 6. 3N鹽酸 : 取鹽酸 25ml， 加水至 100ml。 待幼芽長約 1cm時 ， 取發(fā)芽粒 50g， 磨碎 ，加水 400ml， 在常溫下浸漬 3h， 過濾備用 （ 保存時加 氯仿或甲苯 數(shù)滴 ， 防止生霉 ） ； 2. 碘溶液：稱碘化鉀 , 溶于 20ml水中 ， 加碘， 溶解后再加水至 100ml； 3. ； 2023/3/23 71 第五節(jié) 淀粉 （ 三 ） 試劑 4. 1N氫氧化鈉溶液：取氫氧化鈉 4g加水溶解至100ml。 2023/3/23 69 第五節(jié) 淀粉 （ 二 ） 儀器和用具 ?古氏坩堝 （ 25ml） ；抽濾瓶 （ 500ml） ；真空泵或水泵；滴定管 （ 25ml） ；錐形瓶 （ 100ml、250ml、 500ml） ；移液管 （ 20ml） ；容量瓶（ 100ml、 250ml、 500ml） ；回流冷凝管；電爐； 燒瓶 （ 150ml） ；漏斗 （ 6cm） ；研缽；溫度計；顯微鏡等 。 ?酸水解法沒有專一性 。 2023/3/23 67 第五節(jié) 淀粉 ?淀粉含量的常用測定方法有 酶水解法 和 酸水解法兩種 。 ?測定意義：淀粉不僅是糧食及谷類食品的重要組分 ，還是醫(yī)藥 、 輕工業(yè)等行業(yè)的重要原料 。 ④ 也可使用由 ％ 甲基紅乙醇溶液 1份和 ％ 溴甲酚綠乙醇溶液 5份配制的混合指示劑 （ 臨用時混合 ） ， 終點為灰紅色 。 ② 消化液加水稀釋后 ， 應(yīng)及時進行蒸餾 ， 否則應(yīng)保存消化液 ， 臨用時加水稀釋 。求其平均數(shù) ， 即為測定結(jié)果 ， 測定結(jié)果取小數(shù)點后第一位 。 2023/3/23 64 第四節(jié) 粗蛋白質(zhì) （ 四 ） 結(jié)果計算 粗蛋白質(zhì)的干基含量按下列公式計算： 50 10000 粗蛋白質(zhì)（干基％）＝（ V 1 － V 0 ） N 14 P V W （ 100 － M ） 式中： V —— 蒸餾時取用稀釋的消化液體積， ml ； V 1 —— 實驗用去的鹽酸溶液體積， ml ； V 0 —— 空白試驗用去的鹽酸溶液體積， ml ； N —— 鹽酸溶液的當量濃度， N ； 14 —— 每毫克當量鹽酸相當于氮的毫克數(shù)； P —— 蛋白質(zhì)換算系數(shù)（小麥 ，其他谷 物及豆類 6 .2 5 ）； W —— 試樣重量， mg ； M —— 試樣水分百分率，％。 2023/3/23 63 第四節(jié) 粗蛋白質(zhì) 3. 滴定 ?用 3中的吸收液 ， 滴至溶液出現(xiàn)淺紫紅色為止 。 2023/3/23 62 第四節(jié) 粗蛋白質(zhì) 2. 蒸餾 ?打開簧夾 7， 關(guān)閉活塞 6， 加熱燒瓶 8， 待瓶 1內(nèi)溶液開始沸騰時開始計時 ， 經(jīng) 2min降低瓶 3， 使冷凝管下端露出液面 ， 再蒸餾 1min后 ， 用水沖洗管下端 。 量取 40％ 氫氧化鈉溶液 1ml， 提起活塞注入瓶 1內(nèi) ， 立即用水 2～ 5ml沖洗漏斗 5， 旋緊活塞 。 ?量取 30ml 1％ 硼酸溶液注入錐形瓶 3內(nèi) ， 加混合指示劑 2滴 ， 使冷凝管下端插入液面下 1cm處 。 2023/3/23 61 第四節(jié) 粗蛋白質(zhì) 2. 蒸餾 ?按照凱氏微量蒸餾裝置圖的安裝進行蒸餾和吸收 。 開始時用低溫加熱 ， 勿使瓶中泡沫超過瓶肚的 三分之二 ， 待泡沫減少和煙霧變白后再增加溫度保持微沸 。 在酸域呈紫紅色 ， 在 ，在堿域呈綠色 。5H2O） 10g， 硫酸鉀 （ ） 100g， 硒粉 ， 在研缽中研細使通過 40目篩 ， 混勻后備用； ％ 氫氧化鈉溶液； 2023/3/23 59 第四節(jié) 粗蛋白質(zhì) （ 三 ） 主要試劑 4. 2％ 硼酸溶液； 5. ； 6. 甲基紅乙醇溶液： 75ml 95％ 乙醇中 （ 先在研缽中加乙醇研磨 ） ； 7. 次甲基藍乙醇溶液： 80ml 95％ 乙醇中 。 57 2023/3/23 第四節(jié) 粗蛋白質(zhì) 1— 蒸餾瓶； 2— 冷凝管； 3— 承接瓶； 4— 回流管； 5— 漏斗； 6— 活塞； 7— 簧夾； 8— 燒瓶 凱氏微量蒸餾裝置圖 2023/3/23 58 第四節(jié) 粗蛋白質(zhì) （ 三 ） 主要試劑 －過氧化氫－水混合液 （ 2∶ 1∶ 3） ：在100ml水中緩慢加入濃硫酸 200ml， 冷卻后再加入 30％ 過氧化氫 300ml， 混勻備用 。硫酸銨在堿性加熱的條件下逸出氮 ， 用硼酸吸收后 ， 再用酸標準液滴定 ， 根據(jù)標準液的耗用量得出總氮量 ， 總氮量乘以蛋白質(zhì)系數(shù)即可計算粗蛋白含量 。 2023/3/23 54 第四節(jié) 粗蛋白質(zhì) 近紅外谷物品質(zhì)測試儀 美國 、 加拿大等國 ，近紅外谷物品質(zhì)測試儀作為標準法代替了凱氏法 。 此外 ， 還有染料結(jié)合法 、 雙縮脲法 、 熒光法等 。 是我國蛋白質(zhì)定量的 基準方法 。 2023/3/23 52 第四節(jié) 粗蛋白質(zhì) （ 一 ） 含義 3. 意義 ：測定蛋白質(zhì)含量 ， 對于植物蛋白質(zhì)營養(yǎng)資源的開發(fā)和利用 ， 對優(yōu)良品種的繁育 ， 對糧食 、油料的品質(zhì)評定等方面有著重要意義 。 2. 農(nóng)產(chǎn)品蛋白質(zhì)含量 ? 一般豆類及油料中的蛋白質(zhì)均比禾谷類糧食高 。 ? SZCB脂肪測定儀法優(yōu)點 ：該儀器集加溫 、 抽提與溶劑回收三大系統(tǒng)于一體 ， 結(jié)構(gòu)緊湊 ， 操作方便；采用了封閉的結(jié)構(gòu)體系 ， 有效地防止了溶劑外泄 ， 有利于化驗員的勞動保護；采用試樣浸泡和抽提連續(xù)進行 ， 有效的縮短了抽提時間 ， 大豆 、 米糠 、 油料餅 （ 粕 ） 等試樣抽提時間在 2h以內(nèi) ， 并且可同時測試 6個樣品 。 2023/3/23 50 第三節(jié) 粗脂肪 （ 四 ） 其他方法： ? 核磁共振測定法 原理：本法是將干燥的樣品 ， 在核磁共振波譜測定儀中測定核磁共振信號 ， 其信號大小與油料中含油量成正比 。 ② 除去乙醇 ：加入占乙醚量五分之一的 10％ 氫氧化鉀溶液 ，振蕩洗滌后靜置 ， 放出水溶液 ， 再重復(fù)洗滌 2～ 3次即可 。 其他方法同 （ 二 ） 。 2023/3/23 48 第三節(jié) 粗脂肪 3. 操作步驟 ?儀器處理同 （ 二 ） 。 2. 主要試劑和儀器 ：所用試劑同 （ 二 ） 。 增大了抽提瓶口徑 ， 既可將樣包直接放入抽提瓶中浸泡加熱 ，烘干時又可使抽提瓶中水分快速蒸發(fā) 。 2023/3/23 46 第三節(jié) 粗脂肪 ?注：如無現(xiàn)成的濾紙筒 ， 可取長 28cm、 寬 17cm的濾紙 ， 用直徑 2cm的試管 ， 沿濾紙長方向卷成筒形 ， 抽出試管至紙筒高的一半處 ， 壓平抽空部分 ， 折過來 ， 使之緊靠試管外層 ， 用脫脂線系住 ，下部的折角向上折 ， 壓成圓形底部 ， 抽出試管 ，即成直徑 、 高約 。測定結(jié)果取小數(shù)點后第一位 。 2023/3/23 43 第三節(jié) 粗脂肪 粗脂肪濕基含量 、 干基含量和標準水雜下含量分別按公式（ 1） 、 （ 2） 和 （ 3） 計算： W 1 粗脂肪（ 濕基％）＝ W 100 ……………………………（ 1 ） W 1 粗脂肪（干基％）＝ W （ 100 － M ） 10000 ………………（ 2 ） W 1 （ 100 － M 標 ） 粗脂肪（標準水雜下，％）＝ W （ 100 － M ） 100 ………… （ 3 ） 式中： W 1 —— 粗脂肪重量， g ； W —— 試樣重量， g ； M —— 試樣水分百分率，％； M 標 —— 試樣標準水分、標準雜質(zhì)之和，％。 2023/3/23 42 第三節(jié) 粗脂肪 3. 操作步驟 抽提與烘干：抽凈脂肪后 ， 用長柄鑷子取出濾紙筒 ， 再加熱使乙醚回流 2次 ， 然后收回乙醚 ，取下冷凝管和抽提筒 ， 加熱除盡抽提瓶中殘余的乙醚 ， 用脫脂棉蘸乙醚揩凈抽提瓶外部 ， 然后將抽提瓶在 105℃ 溫度下先烘 90min， 再烘 20min，烘至恒重為止 （ 前后二次重量差在 即視為恒重 ） 。 加熱的溫度以每分鐘回流的乙醚在 120～150滴 ， 每小時回流七次以上 。 2023/3/23 41 第三節(jié) 粗脂肪 3. 操作步驟 抽提與烘干 ：將抽提器安裝妥當 ， 然后將裝有試樣的濾紙筒置于抽提筒內(nèi) ， 同時注入乙醚至虹吸管高度以上 ， 待乙醚流凈后 ， 再加入乙醚至虹吸管高度的三分之二處 。 2023/3/23 40 第三節(jié) 粗脂肪 3. 操作步驟 試樣包扎 ：從備用的樣品中 ， 用烘盒稱取 2～5g試樣 ， 在 105℃ 溫度下烘 30min， 趁熱倒入研缽中 ， 加入約 2g脫脂細砂一同研磨 。 、 油菜籽 、 亞麻籽等分取除去雜質(zhì)的凈試樣 20g， 裝入廣口瓶內(nèi)備用 。 ：分析天平 ， 感量 ；電熱恒溫箱；電熱恒溫水浴鍋；粉碎機 、 研缽；備有變色硅膠的干