1-微生物保藏及基本操作技術(shù)-文庫吧資料
2025-03-02 09:05本頁面
【正文】 統(tǒng)預(yù)冷到 4℃ ，將制備好的冷凍管放入其中，以 1℃ /min降溫速率降至 35℃ ； — 使用程序降溫盒。 準(zhǔn)備冷凍管 準(zhǔn)備保護(hù)劑 （ 10%15%甘油） 準(zhǔn)備菌懸液（細(xì)胞、孢子或芽孢懸液） 制備冷凍管（取菌懸液和保護(hù)劑至冷凍管） 保藏（ 80℃ ， 2～ 5年） 醫(yī)療器械無菌檢驗員操作實(shí)務(wù)與潔凈室管理，北京， 2023 80℃ 冰箱凍結(jié)法 ? 使用方便； ? 保藏時間較長； ? 對設(shè)備要求高 (80℃ 冰箱 )； ? 運(yùn)輸不方便。 醫(yī)療器械無菌檢驗員操作實(shí)務(wù)與潔凈室管理，北京， 2023 真空冷凍干燥法 ? 保藏、運(yùn)輸方便； ? 保藏時間長 (5 ～ 10年 )； ? 對設(shè)備要求高 (真空冷凍干燥機(jī)、多歧管 )，對人員操作水平要求高； ? 冷凍干燥過程對菌體有損傷，需恢復(fù)培養(yǎng)。 醫(yī)療器械無菌檢驗員操作實(shí)務(wù)與潔凈室管理，北京， 2023 熔封 ? 將安瓿管的中上部用火焰燒軟 ， 拉成細(xì)頸； ? 將安瓿管裝到多歧管上 ， 用火焰在細(xì)頸處熔封； ? 拉管時注意火焰不要離菌體太近 。 醫(yī)療器械無菌檢驗員操作實(shí)務(wù)與潔凈室管理，北京， 2023 真空干燥 ? 在開動真空泵后應(yīng)使真空度在 15min內(nèi)達(dá)到 ， 隨后逐漸達(dá)到 ～ ， 在此條件下 ， 樣品將保持凍結(jié)狀態(tài) ， 其中水分則不斷升華 ， 干燥才能順利地進(jìn)行 。 醫(yī)療器械無菌檢驗員操作實(shí)務(wù)與潔凈室管理，北京， 2023 ? 凍干樣品制備 ? 制備斜面培養(yǎng)物； ? 將保護(hù)劑用無菌吸管注入到斜面培養(yǎng)物上 ， 用吸管刮取斜面上的菌體 ， 使菌體均勻地懸浮在保護(hù)劑內(nèi) 。 ? 噴碼于安瓿管外， 160℃ 固定 20min。 醫(yī)療器械無菌檢驗員操作實(shí)務(wù)與潔凈室管理，北京， 2023 安瓿管的準(zhǔn)備 ? 清洗 ? 選用中性玻璃材質(zhì)的安瓿管； ? 2%鹽酸浸泡 8～ 10h，自來水沖洗至中性，蒸餾水沖洗 2～ 3次； ? 置于烘箱中烘干 。 ? 菌種易退化、污染。 醫(yī)療器械無菌檢驗員操作實(shí)務(wù)與潔凈室管理，北京， 2023 液體石蠟法 ? 指將菌種接種在適宜的斜面培養(yǎng)基上，最適條件下培養(yǎng)好后注入滅菌的液體石蠟，使其覆蓋整個斜面，再直立放置于低溫（ 4～ 6℃ ）干燥處進(jìn)行保存的一種菌種保藏方法。 醫(yī)療器械無菌檢驗員操作實(shí)務(wù)與潔凈室管理，北京， 2023 常用菌種保藏方法 ? 定期移植法 ? 液體石蠟法 ? 真空冷凍干燥法 ? 80℃ 低溫凍結(jié)法 ? 液氮超低溫凍結(jié)法 醫(yī)療器械無菌檢驗員操作實(shí)務(wù)與潔凈室管理，北京， 2023 定期移植法 ? 亦稱傳代培養(yǎng)保藏法，指將菌種接種于適宜的斜面培養(yǎng)基上，最適條件下培養(yǎng)，完成培養(yǎng)于 4～6℃ 進(jìn)行保存并間隔一定時間（ 36個月）進(jìn)行移植培養(yǎng)的一種短期菌種保藏方法。 醫(yī)療器械無菌檢驗員操作實(shí)務(wù)與潔凈室管理，北京， 2023
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