基因診斷(1)-文庫(kù)吧資料
2025-01-11 17:44本頁(yè)面
【正文】 NS1 5’ NCR 高變異區(qū)（編碼衣殼和包膜蛋白） NCR: 非編碼區(qū) 5’ NCR為保守的區(qū)域，將引物設(shè)計(jì)在該區(qū)域，進(jìn)行 RTPCR, 可特異性的擴(kuò)增 HCV。 結(jié)核桿菌和瘧原蟲(chóng)的分型可以使用探針雜交和 PCR方法檢出。 3. ASO（ allelespecific oligonucleotide） 異常探針 T A G 正常人 患者 DNA DNA 正常人 患者 DNA DNA 雜交結(jié)果 點(diǎn)雜交 正常探針 G A G 正常人 患者 DNA DNA 雜交結(jié)果 正常人 患者 DNA DNA 點(diǎn)雜交 等位基因特異的寡核苷酸探針 (ASO)檢測(cè)點(diǎn)突變 基因診斷的臨床檢測(cè)應(yīng)用 1. 基因診斷在感染性疾病檢測(cè)中的應(yīng)用 乙型肝炎病毒（ HBV）、人乳頭瘤病毒（ HPV）： 其 DNA可以使用點(diǎn)雜交、 PCR方法直接檢出。探針通常為長(zhǎng) 20bp左右的核苷酸。此法多用于突變性質(zhì)不明的連鎖分析。 串聯(lián)重復(fù)的短片段的長(zhǎng)度多態(tài)性可以通過(guò) PCR擴(kuò)增后電泳來(lái)檢出，并用于致病基因的連鎖分析，這種診斷方法稱(chēng)為擴(kuò)增片段長(zhǎng)度多態(tài)性（ AFLP）連鎖分析法。它們分布十分廣泛，每個(gè)重復(fù)單位通常只有幾－－幾十個(gè)堿基對(duì)，但其重復(fù)次數(shù)在人群中是高度變異的，又叫數(shù)目變異的串聯(lián)重復(fù)（ variable number tandem repeats,VNTR）。 DNA片段電泳后雜交圖 RFLP的檢出等位基因 1因有額外切點(diǎn)而導(dǎo)致產(chǎn)生兩個(gè)長(zhǎng)短不同的 DNA片段（ 3kb及 5kb）且均能與探針雜交 。 RFLP可用 Southern印跡雜交法檢出。堿基的變異就可能導(dǎo)致酶切點(diǎn)的消失或新的切點(diǎn)出現(xiàn)，當(dāng)使用同一限制酶切割不同個(gè)體基因組 DNA時(shí)， DNA片段長(zhǎng)度出現(xiàn)差異，這種由于內(nèi)切酶切點(diǎn)變化所導(dǎo)致的 DNA片段長(zhǎng)度的差異，稱(chēng)為限制性片段長(zhǎng)度多態(tài)性（ restriction fragment length polymorphism, RFLP）。 基因診斷的內(nèi)容 常用基因診斷的技術(shù) 1. Hybridization 2. PCR 3. RFLP 4. AFLP 5. ASO 6. SSCP
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