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感染性疾病病原體快速診斷-文庫吧資料

2025-01-08 12:19本頁面
  

【正文】 “hidden epidemic” 2 billion people infected 48 Wenen LIU 結(jié)核感染 T細(xì)胞檢測(cè) 49 Wenen LIU ? γ 干擾素釋放實(shí)驗(yàn) ( IGRA, interferon gamma release assay) ? 酶聯(lián)免疫斑點(diǎn)技術(shù) ( ELISPOT, EnzymeLinked ImmunoSpot assay) ? 結(jié)核桿菌特異抗原 早期抗原靶 6( ESAT6) early secreted antigenic target 6 培養(yǎng)濾液蛋白 10( CFP 10) culture filtrate protein 10 ) 技 術(shù) 背 景 50 Wenen LIU ? 結(jié)核感染者體內(nèi)存在特異的效應(yīng) T淋巴細(xì)胞,效應(yīng) T淋巴細(xì)胞再次受到結(jié)核抗原刺激時(shí)會(huì)分泌多種細(xì)胞因子( IFNγ )。 45 Wenen LIU 原 理 ? 結(jié)核感染的免疫應(yīng)答反應(yīng)以細(xì)胞免疫為主,作為免疫應(yīng)答的一部分, T細(xì)胞受結(jié)核抗原刺激致敏,形成活化的效應(yīng) T細(xì)胞,包括CD4和 CD8。 40 Wenen LIU 檢測(cè)流程示意圖 41 Wenen LIU 鏡下比較 圖 2. 夾層杯法(新方法): 菌量多,背景清晰,易于觀察 圖 1. 直接涂片法(傳統(tǒng)方法):菌量少,背景不清晰 42 Wenen LIU 夾層杯診斷技術(shù)的優(yōu)點(diǎn) 陽性率高 背景清晰,易于觀察 易于標(biāo)準(zhǔn)化 檢測(cè)速度快 生物安全性好 夾層杯診斷 技術(shù)的優(yōu)點(diǎn) 43 Wenen LIU 結(jié)核夾層杯技術(shù) 標(biāo)本要求: ( 1) 痰液要求新鮮,留取清晨深咳出的第一口痰液,留痰時(shí),患者以清水漱口3次,然后用力咳出氣管深處的痰 ( 2)用氫氧化鈉處理完全。 ? 抗酸染色法是檢測(cè) TB的傳統(tǒng)方法,但存在假陽性 ? 因此,快速診斷對(duì) TB至關(guān)重要。估計(jì)世界人口中 1/3感染結(jié)核分枝桿菌。它可侵犯全身各器官,但以肺結(jié)核為最多見。 碳青霉烯酶基因: A類酶,以 KPC為代表;金屬酶,以 IMP、 VIM、NDM為代表; D類酶,以 OXA2 OXA2 OXA51和 OXA48為主。 ? 注意無菌操作 30 Wenen LIU 內(nèi)毒素活性定量檢測(cè)意義 ? G所致膿毒癥早期鑒別診斷 ? 指導(dǎo)抗生素正確使用 ? 判定抗感染治療效果 ? 幫助判斷患者的預(yù)后 31 Wenen LIU 內(nèi)毒素定量檢測(cè)的適應(yīng)癥 ? 各種急、慢性病理性發(fā)熱患者 ? 各種類型“中重度感染、肝病、休克、腸道疾病、臟器功能衰竭、大手術(shù)術(shù)后”患者 ? 慢性疾病長期臥床、免疫力低下患者 ? 急診及 ICU病房收治的生命體征不穩(wěn)定的患者 32 Wenen LIU 分子診斷技術(shù)檢測(cè)致病菌 PCR技術(shù)擴(kuò)增 16srRNA基因鑒定常見致病菌 革蘭陽性球菌 革蘭陰性桿菌 mecA基因 VanA/VanB基因 PBP2b基因 PCR擴(kuò)增耐藥 基因特異性基因 ESBLs基因 AmpC基因 碳青霉烯酶基因 mecA:耐甲氧西林葡萄球菌屬( MRS)特異性基因 Van A VanB :耐萬古霉素腸球菌( VRA) 特異性基因 PBP2b :青霉素不敏感肺炎鏈球菌( pNSSp) 特異性基因 ESBLs基因:主要包括 TEM、 SHV、 CTXM、 OXA AmpC基因包括質(zhì)粒介導(dǎo)型和染色體誘導(dǎo)型。ber, University Bonn, Lecture at ISICEM, Brussels 2023 通過 PCT不斷在體內(nèi)衰減,反映出抗生素治療策略的成功 隨著患者對(duì)抗生素治療的響應(yīng),引起了PCT血中濃度水平的典型變化過程 ABantibiotics 20 Wenen LIU 抗生素有效管理 PCT濃度( ng/ml) 臨床意義 < 無細(xì)菌感染 非細(xì)菌感染 可能是局部細(xì)菌感染,不建議使用抗生素, 624小時(shí)內(nèi)復(fù)查 局部細(xì)菌感染,建議使用抗生素 嚴(yán)重細(xì)菌感染、膿毒癥 重癥膿毒癥 > 重度膿毒癥、膿毒性休克或 MODS 21 Wenen LIU PCT的臨床應(yīng)用 ? 急診 ? 住院病房 ? 外科手術(shù) ? 血液科 ? 內(nèi)科 ICU ? 外科 ICU ? 兒科急診 ? 兒科病房 ? 兒科 ICU ? 新生兒科 嚴(yán)重細(xì)菌感染或膿毒癥的檢測(cè)(鑒別診斷) 疾病或治療反應(yīng)的監(jiān)測(cè) 局部與全身性感染 膿毒癥的診斷和監(jiān)測(cè) 新生兒膿毒癥的檢測(cè) 22 Wenen LIU ? 48hr的新生兒 生理性一過性峰值 ?創(chuàng)傷后炎癥綜合癥 : 多發(fā)性創(chuàng)傷 , 大面積燒傷 , 大手術(shù)后 (心臟 , 移植 , 腹部 ) ?使用致炎細(xì)胞因子治療后 (OKT3, 注射 TNFα, IL 2, 抗淋巴細(xì)胞球蛋白 ) ?某些腫瘤 (甲狀腺髓樣細(xì)胞癌 , 肺小細(xì)胞癌和支氣管癌 ) ?長時(shí)間循環(huán)衰竭 (心源性休克 , 出血性休克 , 熱休克 ) PCT水平增加但沒有系統(tǒng)細(xì)菌感染的幾種情況 23 Wenen LIU ?感染早期 ( 612 小時(shí)后重復(fù)檢測(cè) !) ?亞急性心內(nèi)膜炎 ?局部感染 細(xì)菌感染而 PCT不升高的情況 24 Wenen LIU 對(duì) PCT檢測(cè)的影響 ?受以下因素影響 * 甲狀腺功能 是功能性甲狀腺髓樣癌的腫瘤標(biāo)志物 * 腎功能 嚴(yán)重腎功能受損者中水平較高 ?不受以下因素影響 * 類固醇藥物 * 自身免疫性疾病 * 年齡、性別 * 免疫功能低下狀態(tài) :肝硬化、 HIV感染 25 Wenen LIU 細(xì)菌內(nèi)毒素 ?革蘭氏陰性菌細(xì)胞壁上的一種脂多糖( LPS)和蛋白的復(fù)合物,細(xì)菌死亡或自溶后釋放 ?進(jìn)入機(jī)體將會(huì)出現(xiàn)發(fā)熱、血壓降低、寒顫、引起 DIC、內(nèi)毒素?cái)⊙Y等一系列臨床反應(yīng)。 16 Wenen LIU 全自動(dòng)快速定量法 ? 儀器:法國梅里埃公司
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