蛋白質(zhì)一級(jí)結(jié)構(gòu)測(cè)定-文庫吧資料
2024-08-28 23:34本頁面
【正文】 +NB rC H3S+C H2C H2C HN H C N H C H CO ORC NC H3S C N C H2C HN H C N H C H CO ORC H2+H2O+C H2C HN H COC H2O H3N+C H COR高絲氨酸內(nèi)酯溴化氰水解法 (Cyanogen bromide) N末端的測(cè)定 二硝基氟苯法（ DNFB法）；二甲氨基萘磺酰氯法 (DNSCL 法）；異硫氰酸苯脂法（ PITC 法）； C末端的測(cè)定 羧肽酶法；硼氫化鋰法；肼解法 （ 2）多肽鏈的末端氨基酸測(cè)定 ?N末端測(cè)定方法比較 C末端更加成熟 、 可靠和準(zhǔn)確 ， 主要的方法有： 二硝基氟苯法 （ DNFB法 ） 肽鏈 N末端氨基與 2,4二硝基氟苯 （ DNFB） 反應(yīng) ， 生成二硝基苯的衍生物 （ DNP肽 ） ， 其經(jīng)酸水解后生成的 DNP氨基酸可用有機(jī)溶劑 （ 如乙酸乙酯 ） 抽提 ， 再與其他氨基酸分開 ， 鑒定得知 N末端的氨基酸 。 ③ 二硫健的斷裂及多肽鏈的拆分 ★ 巰基的保護(hù) O O C C H C H2 S HN H 3 +I C H 2 C N H 2OC H 2 O C C lOC H 2 C l O O C C H C H2 SN H 3 +O C C H 2OC H 2 O O C C H C H 2 SN H 3 +C H 2 C N H 2O O O C C H C H2 SN H 3 +用烷基化試劑保護(hù)生成的巰基，以防止它重新被氧化 ?用酶溴化氫選擇性降解多肽鏈產(chǎn)生的肽段用酸水解、堿水解（針對(duì)色氨酸分析）或酶水解后，用氨基酸自動(dòng)分析儀測(cè)定； ?測(cè)定并計(jì)算出蛋白質(zhì)的氨基酸種類和數(shù)量；用 Edman反應(yīng)分析各肽段氨基酸順序； ④ 多肽鏈的選擇
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