【正文】 可得到 下列信息 ： 吸收峰的組數(shù)，說(shuō)明分子中化學(xué)環(huán)境不同的質(zhì)子有幾組； 質(zhì)子吸收峰出現(xiàn)的頻率，即化學(xué)位移值，說(shuō)明分子中的基 團(tuán)情況； 峰的分裂個(gè)數(shù)及偶合常數(shù)，說(shuō)明基團(tuán)間的連接關(guān)系； 階梯式積分曲線的高度，說(shuō)明各基團(tuán)的質(zhì)子比。 電負(fù)性對(duì)化學(xué)位移的影響 CH3Si(CH3)3 ， CH 3H， CH3N ， CH3Br， 0 CH3C1， CH3OH ， CH3NO2 CH2Cl2 影響化學(xué)位移的因素 （ 1）誘導(dǎo)效應(yīng) 結(jié)構(gòu)鑒定 核磁共振波譜法 （ 2） 磁各向異性效應(yīng) 磁各向異性效應(yīng)是由于置于外加磁場(chǎng)中的分子所產(chǎn)生的感應(yīng)磁場(chǎng)，使分子所在空間出現(xiàn)屏蔽區(qū)和去屏蔽區(qū)，導(dǎo)致不同區(qū)域內(nèi)的質(zhì)子移向高場(chǎng)和低場(chǎng)。 如：氘代氯仿、氘代苯、重水、氘代丙酮、氘代 二甲亞砜等， （有時(shí)使用不含質(zhì)子的四氯化碳和二硫化碳作溶劑，但溶解性能不好。 結(jié)構(gòu)鑒定 核磁共振波譜法 樣品的制備： 要求樣品配制成溶液進(jìn)行測(cè)試。 核磁共振基本原理 ? 處在外磁場(chǎng)中的自旋原子核會(huì)進(jìn)行能級(jí)分裂，如果原子核吸收一定的能量，從低能級(jí)躍遷到高能級(jí)，這時(shí)產(chǎn)生的波譜稱(chēng)為核磁共振波譜。其檢測(cè)靈敏度較總離子流檢測(cè)高 23個(gè)數(shù)量級(jí)。在選定的質(zhì)量范圍內(nèi)，任何一個(gè)質(zhì)量數(shù)都有與總離子流色譜圖相似的質(zhì)量色譜圖。 GCMS的常用測(cè)定方法 結(jié)構(gòu)鑒定 氣相色譜法 結(jié)構(gòu)鑒定 氣相色譜法 反復(fù)掃描法（ repetitive scanning method， RSM） 按一定間隔時(shí)間反復(fù)掃描，自動(dòng)測(cè)量、運(yùn)算，制得各個(gè)組分的質(zhì)譜圖，可進(jìn)行定性。另一方面，要求質(zhì)譜儀能很快在不同的質(zhì)量數(shù)之間來(lái)回切換，以滿足選擇離子檢測(cè)的需要。 掃描速度 由于氣相色譜峰很窄，有的僅幾秒鐘時(shí)間，一個(gè)完整的色譜峰通常需要至少 6個(gè)以上數(shù)據(jù)點(diǎn)。 儀器接口 接口技術(shù)中要解決的問(wèn)題是氣相色譜儀的大氣壓的工作條件和質(zhì)譜儀的真空工作條件的聯(lián)接和匹配。 GCMS用于分析復(fù)雜化合物， GC相當(dāng)于分離和進(jìn)樣裝置，MS相當(dāng)于定性檢測(cè)器。 與固定相作用較強(qiáng)的組分，較慢流出色譜柱，從而得以分離。 質(zhì)譜斷裂規(guī)律；標(biāo)準(zhǔn)質(zhì)譜圖 結(jié)構(gòu)鑒定 質(zhì)譜法 質(zhì)譜法在高分子材料分析中的應(yīng)用 質(zhì)譜法主要是根據(jù)得到的質(zhì)譜圖來(lái)對(duì)樣品成分，結(jié)構(gòu)和相對(duì)分子量進(jìn)行測(cè)定。 ? 由以上研究結(jié)果，提出化合物的 結(jié)構(gòu)單元 或 可能 的結(jié)構(gòu) 。 M－ 42(CH2CO, CH2N2) M－ 43(CH3CO, C3H7)。 M－ 31(CH2OH, OCH3)。 M－ 29(CHO, C2H5)。 M－ 27(HCN, C2H3)。 M－ 19(F)。 M－ 17(OH, NH3)。 ?計(jì)算 不飽和度 結(jié)構(gòu)鑒定 質(zhì)譜法 ? 研究高質(zhì)量端離子峰 , 確定化合物中的 取代基 M－ 15(CH3)。28CO 2 ??低分辨率質(zhì)譜儀：2 ??高分辨率質(zhì)譜儀：? 同位素豐度法 Beynon表 結(jié)構(gòu)鑒定 質(zhì)譜法 3. 分子結(jié)構(gòu)的確定 1) 譜圖解釋的一般方法 ?由質(zhì)譜的高質(zhì)量端確定分子離子峰，求出 分子量 。 結(jié)構(gòu)鑒定 分子熒光光譜 結(jié)構(gòu)鑒定 分子熒光光譜 分子熒光光譜在高分子材料分析中的應(yīng)用 由于能產(chǎn)生熒光的物質(zhì)占被分析物的數(shù)量相當(dāng)有限，且就這少量的熒光物質(zhì)幾乎在同一波長(zhǎng)段產(chǎn)生光致發(fā)光，所以熒光法很少用來(lái)定性分析 結(jié)構(gòu)鑒定 分子熒光光譜 結(jié)構(gòu)鑒定 質(zhì)譜法 質(zhì)譜法將氣態(tài)離子混合物按質(zhì)荷比 m/z大小不同進(jìn)行分離分析的技術(shù)。 （ 3）剛性平面結(jié)構(gòu)：可降低分子振動(dòng)，減少與溶劑的相互作用，故具有很強(qiáng)的熒光。 熒光量子產(chǎn)率 （ ?） ： 吸收的光量子數(shù)發(fā)射的光量子數(shù)??如果一個(gè)分子將吸收的光子全部釋放，則其量子產(chǎn)率為 100%。 結(jié)構(gòu)鑒定 分子熒光光譜 200 260 320 380 440 500 560 620熒光激發(fā)光譜熒光發(fā)射光譜 磷光光譜室溫下菲的乙醇溶液熒（磷）光光譜結(jié)構(gòu)鑒定 分子熒光光譜 由于電子基態(tài)的振動(dòng)能級(jí)分布與激發(fā)態(tài)相似 ，故通常熒光發(fā)射光譜與它的激發(fā)光譜成鏡像對(duì)稱(chēng)關(guān)系。 結(jié)構(gòu)鑒定 分子熒光光譜 激發(fā)光譜曲線的最高處，處于激發(fā)態(tài)的分子最多，熒光強(qiáng)度最大，稱(chēng)為最大激發(fā)波長(zhǎng) ?ex （ 2）熒光的發(fā)射光譜（熒光光譜） 熒光光譜表示在所發(fā)射的熒光中各種波長(zhǎng)組分的相對(duì)強(qiáng)度。 繪制激發(fā)光譜：固定發(fā)射波長(zhǎng) (選最大發(fā)射波長(zhǎng) ),然后以不同波長(zhǎng)的入射光激發(fā)熒光物質(zhì) ， 以熒光強(qiáng)度 F對(duì) 激發(fā)波長(zhǎng) ?作圖 ， 即為激發(fā)光譜 。 光致發(fā)光 熒光 fluorescence 磷光 phosphorescence 熒光分析法是根據(jù)物質(zhì)的 熒光譜線的位置 及其 強(qiáng)度 進(jìn)行物質(zhì)鑒定和含量測(cè)定的儀器方法。 5．酸堿離解常數(shù)的測(cè)定 光度法是測(cè)定分析化學(xué)中應(yīng)用的指示劑或顯色劑離解常數(shù)的常用方法，該法特別適用于溶解度較小的弱酸或弱堿。種常用的測(cè)定方法有：?jiǎn)谓M分定量法、多組分定量法、雙波長(zhǎng)法、示差分光光度法和導(dǎo)數(shù)光譜法等。 3．定量分析 紫外－可見(jiàn)分光光度定量分析的依據(jù)是 LambertBeer定律，即在一定波長(zhǎng)處被測(cè)定物質(zhì)的吸光度與它的溶度呈線性關(guān)系。 結(jié)構(gòu)鑒定 紫外光譜 2．結(jié)構(gòu)分析 結(jié)構(gòu)分析可用來(lái)確定化合物的構(gòu)型和構(gòu)象。此外，可配合紅外光譜、核磁共振波譜法和質(zhì)譜法進(jìn)行定性鑒定和結(jié)構(gòu)分析，因此它仍不失為是一種有用的輔助方法。但是它適用于不飽和有機(jī)化合物。 1．定性分析 緊外－可見(jiàn)分光光度法對(duì)無(wú)機(jī)元素的定性分析應(yīng)用較少，無(wú)機(jī)元素的定性分析可用原子發(fā)射光譜法或化學(xué)分析的方法。 此外還有其它指標(biāo)：如儀器的波長(zhǎng)范圍（ 1901100nm）、基線漂移、穩(wěn)定性、吸光度范圍等 結(jié)構(gòu)鑒定 紫外光譜 紫外－可見(jiàn)分光光度計(jì)的應(yīng)用 紫外－可見(jiàn)分光光度計(jì)可用于物質(zhì)的定量分析、結(jié)構(gòu)分析和定量分析。 h. 能量（一般在 ） 是讀數(shù)方式的一種，一般儀器都有幾種測(cè)量光度的方式如：透過(guò)率，吸光度，反射率，能量。 g. 分辨率（一般在 ） 是指儀器分開(kāi)相鄰的兩條譜線的能力。 f. 雜散光（一般在 %%T之間） 檢測(cè)器在給定的標(biāo)稱(chēng)波長(zhǎng)處（ 220nm， NaI； 340nm,NaNO2）接收的光線中夾雜的不屬于入射光束的其它光線。標(biāo)定應(yīng)在紫外光區(qū)和可見(jiàn)光區(qū)兩個(gè)部分進(jìn)行。這個(gè)指標(biāo)越小越好。狹縫可在 － 10nm寬度內(nèi)調(diào)節(jié)。 b. 狹縫寬準(zhǔn)確度（一般在 ） 狹縫是指由一對(duì)隔板在光通路上形成的縫隙，用來(lái)調(diào)節(jié)入射單色光的純度和強(qiáng)度也直接影響分辯力。 吸收池單 色 器光源切光器單 色 器檢測(cè)器雙波長(zhǎng)分光光度計(jì)光路示意圈 結(jié)構(gòu)鑒定 紫外光譜 紫外－可見(jiàn)分光光度計(jì)的各項(xiàng)指標(biāo)含義 a. 波長(zhǎng)準(zhǔn)確度與準(zhǔn)確性（一般在 ） 單色光的最大強(qiáng)度波長(zhǎng)值于波長(zhǎng)指示值之差。通過(guò)光學(xué)系統(tǒng)轉(zhuǎn)換，使雙波長(zhǎng)分光光度計(jì)能很方便地轉(zhuǎn)化為單波長(zhǎng)工作方式。 雙波長(zhǎng)分光光度計(jì)的優(yōu)點(diǎn)：對(duì)于多組分混合物、混濁試樣（如生物組織液）的分析，以及存在背景于擾或共存組分吸收干擾的情況下，利用雙波長(zhǎng)分光光度法，往往能提高方法的靈敏度和選擇性。 單 色 器光源參比池樣品池切光器 M 1M 2M 3光電倍增管切光器 M 4結(jié)構(gòu)鑒定 紫外光譜 c．雙波長(zhǎng)分光光度計(jì) 其基本光路如下圖所示。由于兩束光同時(shí)分別通過(guò)參比池和樣品他，還能自動(dòng)消除光源強(qiáng)度變化所引起的誤差。光度計(jì)能自動(dòng)比較兩束光的強(qiáng)度，此比值即為試樣的透射比，經(jīng)對(duì)數(shù)變換將它轉(zhuǎn)換成吸光度并作為波長(zhǎng)的函數(shù)記錄下來(lái)。國(guó)產(chǎn) 722型， 751型、 724型、英國(guó) SP500型以及 Backman DU－ 8 型等均屬于此類(lèi)光度計(jì)。如下圖所示： 紫外－可見(jiàn)分光光度計(jì)的主要部件 結(jié)構(gòu)鑒定 紫外光譜 紫外 可見(jiàn)光分光光度計(jì)分類(lèi) 單光束分光光度計(jì) 雙光束分光光度計(jì) 雙波長(zhǎng)分光光度計(jì) 結(jié)構(gòu)鑒定 紫外光譜 a． 單光束分光光度計(jì) 其光路示意圖如前圖（紫外－可見(jiàn)分光光度計(jì)的基本結(jié)構(gòu)圖）所示，經(jīng)單色器分光后的一束平行光，輪流通過(guò)參比溶液和樣品溶掖，以進(jìn)行吸光度的測(cè)定。吸光光度法就是基于這種物質(zhì)對(duì)電磁輻射的選擇性吸收的特性而建立起來(lái)的，它屬于分子吸收光譜。因此，每一躍遷都對(duì)應(yīng)著吸收一定的能量輻射。這些電子由于各種原因（如受光、熱、電的激發(fā)）而從一個(gè)能級(jí)轉(zhuǎn)到另一個(gè)能級(jí)，稱(chēng)為躍遷。這種分子吸收光譜產(chǎn)生于價(jià)電子和分子軌道上的電子在電子能級(jí) 躍遷 （ 原子或分子中的電子，總是處在某一種運(yùn)動(dòng)狀態(tài)之中。 5 共振拉曼效應(yīng)可以用來(lái)有選擇性地增強(qiáng)大生物分子特個(gè)發(fā)色基團(tuán)的振動(dòng)，這些發(fā)色基團(tuán)的拉曼光強(qiáng)能被選擇性地增強(qiáng) 1000到 10000倍。這是拉曼光譜相對(duì)常規(guī)紅外光譜一個(gè)很大的優(yōu)勢(shì)。在化學(xué)結(jié)構(gòu)分析中，獨(dú)立的拉曼區(qū)間的強(qiáng)度可以和功能集團(tuán)的數(shù)量相關(guān)。 2 拉曼一次可以同時(shí)覆蓋 504000波數(shù)的區(qū)間，可對(duì)有機(jī)物及無(wú)機(jī)物進(jìn)行分析。 結(jié)構(gòu)鑒定 激光拉曼散射光譜 拉曼光譜實(shí)驗(yàn)裝置 結(jié)構(gòu)鑒定 激光拉曼散射光譜 拉曼光譜技術(shù)的優(yōu)越性 提供快速、簡(jiǎn)單、可重復(fù)、且更重要的是無(wú)損傷的定性定量分析，它無(wú)需樣品準(zhǔn)備，樣品可直接通過(guò)光纖探頭或者通過(guò)玻璃、石英、和光纖測(cè)量。 c. 一般情況下，斯托克斯線比反斯托克斯線的強(qiáng)度大。兩種方法可以相互補(bǔ)充，這樣對(duì)分子的問(wèn)題可以更周密的研究。拉曼光譜分析法是基于印度科學(xué)家（ Raman）所發(fā)現(xiàn)的拉曼散射效應(yīng)，對(duì)與入射光頻率不同的散射光譜進(jìn)行分析以得到分子振動(dòng)、轉(zhuǎn)動(dòng)方面信息，并應(yīng)用于分子結(jié)構(gòu)研究的一種分析方法。 振動(dòng)耦合效應(yīng) : 當(dāng) 2個(gè)相鄰的基團(tuán)振動(dòng)頻率相等或接近時(shí) , 2個(gè)基團(tuán)發(fā)生共振 ,結(jié)果使一個(gè)頻率升高 , 一個(gè)頻率降低。 張力效應(yīng) : 當(dāng)環(huán)狀化合物的環(huán)中有張力時(shí) , 環(huán)內(nèi)伸縮振動(dòng)降低 ,環(huán)外增強(qiáng)。 影響吸收譜帶的其他因素還有：共軛效應(yīng)、張力效應(yīng)、誘導(dǎo)效應(yīng)和振動(dòng)耦合效應(yīng)。 結(jié)構(gòu)鑒定 傅里葉紅外光譜 影響吸收譜帶的因素還有分子外和分子內(nèi)的因素：如溶劑不同 , 振動(dòng)頻率不同 , 溶劑的極性不同 , 介電常數(shù)不同 , 引起溶質(zhì)分子振動(dòng)頻率不同 , 因?yàn)槿軇┑臉O性會(huì)引起溶劑和溶質(zhì)的締合 , 從而改變吸收帶的頻率和強(qiáng)度。對(duì)于白色樣品或吸光系數(shù)小的樣品 , 稀釋劑溴化鉀與樣品的比例是 100： 1。 結(jié)構(gòu)鑒定 傅里葉紅外光譜 (3)樣品量的控制對(duì)譜圖的影響： 在紅外光譜實(shí)驗(yàn)中 , 固體粉末樣品不能直接壓片 , 必須用稀釋劑稀釋、研磨后才能壓片。需要基線校正時(shí) , 首先判斷引起基線變化的原因 , 能否進(jìn)行校正。平滑是減少來(lái)自各方面因素所產(chǎn)生的噪聲信號(hào) , 但實(shí)際是降低了分辨率 , 會(huì) 影響峰位和峰強(qiáng) , 在定量分析時(shí)需特別注意。 數(shù)據(jù)處理對(duì)紅外譜圖質(zhì)量的影： (1)平滑處理： 紅外光譜實(shí)驗(yàn)中譜圖常常不光滑 ,影響譜圖質(zhì)量。 樣品對(duì)紅外光的吸收與樣品的吸光系數(shù)有關(guān) ,如果樣品對(duì)紅光外有很強(qiáng)的吸收 , 就需要用較高的分辨率以獲得較豐富的光譜信息 。分辨率提高可改善峰形 , 但達(dá)到一定數(shù)值后 , 再提高分辨率峰形變化不大 , 反而噪聲增加。所以在實(shí)驗(yàn)中測(cè)量背景的掃描速度與測(cè)量樣品的掃描速度要一致。 采用某一動(dòng)鏡移動(dòng)速度下的背景 , 測(cè)定不同掃描速度下樣品的吸收譜圖 , 隨掃描速度的加快 , 譜圖基線向上位移。當(dāng)測(cè)量信號(hào)小時(shí) ( 包括使用某些附件時(shí) ) 應(yīng)降低動(dòng)鏡移動(dòng)速度 , 而在需要快速測(cè)量時(shí) , 提高速度。 掃描速度對(duì)紅外譜圖的影響： 掃描速度減慢 , 檢測(cè)器接收能量增加 。信噪比與掃描次數(shù)的平方成正比。 3. 譜帶的相對(duì)強(qiáng)度；譜帶的強(qiáng)弱對(duì)比不單是定量分析的基礎(chǔ)，而且可以暗示某一特殊基團(tuán)或元素的存在。也是說(shuō)明是否含有某一基團(tuán)的標(biāo)志。對(duì)于高檔儀器，一般要求信噪比達(dá)到 105。儀器的噪聲主要取決于光源的穩(wěn)定性、放大器等電子系統(tǒng)的噪聲、檢測(cè)器產(chǎn)生的噪聲及環(huán)境噪聲，如電子系統(tǒng)設(shè)計(jì)不良、元件質(zhì)量低劣、儀器接地不良、工作環(huán)境潮濕、外界電磁干擾多會(huì)使儀器噪聲增大。 結(jié)構(gòu)鑒定 傅里葉紅外光譜 F．信噪比 信噪比就是樣品吸光度與儀器吸光度噪聲的比值。主要是由檢測(cè)器、放大器、信號(hào)處理電路的非線性引起。 波長(zhǎng)精確度是體現(xiàn)儀