【正文】 蝦體受傷，一旦發(fā)病，106～1106連續(xù)灑2～3 d，或配合土霉素，在每千克飼料加2000 mg，連續(xù)服用3～4 d，可以控制病情。隨之病情惡化，引起全身肌肉發(fā)白，行動(dòng)緩慢，常匍伏在水草上或蝦塘邊，有時(shí)在水面旋轉(zhuǎn)翻滾，一般一周內(nèi)陸續(xù)死亡。二、爛眼病病原：又叫瞎眼病，經(jīng)檢驗(yàn)本病由非01群霍亂弧菌[Vibrio cholerar（non—01）]侵入蝦體而引起。②用二溴海因消毒殺菌，106～106。夏秋高溫季節(jié)，池底呈酸性的池塘，需定期適量潑灑生石灰。重者倒伏在池邊，發(fā)病后2～4小時(shí)開始死亡在池邊。有的病蝦體表甲殼有黑色潰瘍斑點(diǎn)；鰓有時(shí)呈現(xiàn)黑斑，有的變?yōu)榧t色、灰色或土黃色；鰓組織變厚，脆弱破損或空泡變性。病原主要是副溶血弧菌（Vibrio parahaemolyticus）、鰻弧菌（V．a(chǎn)nguilarum）和溶藻弧菌（V．a(chǎn)lginolyticus）癥狀與病理變化：本病是由弧菌侵入蝦體血液而引起的全身性疾病。有些細(xì)菌是條件致病菌，即平時(shí)生活在海水中、底泥中或健康的蝦體上，并不導(dǎo)致對(duì)蝦發(fā)病，但在蝦體受傷或在環(huán)境條件對(duì)蝦不利時(shí)，就能侵入蝦體并引起疾病。第六節(jié) 對(duì)蝦的細(xì)菌性疾病細(xì)菌性疾病在對(duì)蝦養(yǎng)殖中最為常見、而且是危害較大的一類疾病。地膜可以完全隔絕池底對(duì)蝦池的不良影響，如果能配合水體處理或適當(dāng)換水，效果更為理想。因此地膜養(yǎng)蝦模式暴發(fā)WSS的機(jī)會(huì)就少一些。WSSV宿主范圍廣，包括養(yǎng)殖對(duì)蝦、野生海水蝦、蟹、橈足類、蝦蛄等甲殼動(dòng)物，蟹類是WSSV宿主之一，可以攜帶WSSV過冬，傳染給第二年的養(yǎng)殖蝦，引發(fā)WSSV的暴發(fā)流行。同時(shí)，經(jīng)過消毒處理后，殺死所有WSSV的宿主生物，在經(jīng)過7 d的靜止，宿主攜帶的WSSV已經(jīng)不具有感染性。10 適當(dāng)采用水體消毒劑雖然水體消毒劑不能防止WSSV的傳播，但是有些消毒劑(如氯制劑)可殺死游離病毒、降低細(xì)菌和調(diào)節(jié)水質(zhì)的作用，有時(shí)也能減少氨氮，從而相對(duì)減少WSSV的暴發(fā)流行。9 在大規(guī)模對(duì)蝦養(yǎng)殖過程中，實(shí)行統(tǒng)一管理，減少WSSV的傳播研究結(jié)果表明，攜帶WSSV死亡對(duì)蝦在海水中WSSV失去感染活性的時(shí)間約為3 d。一次換水量過大，較大地影響水體理化因子，容易引發(fā)WSS的暴發(fā)流行。8 采用少量多次換水方式根據(jù)調(diào)查結(jié)果，一次換水量超過40%，導(dǎo)致WSSV暴發(fā)流行的可能性很大。至養(yǎng)成上市時(shí)對(duì)蝦養(yǎng)殖水鹽度以2～3為好，一方面切斷WSSV從海水傳染的水平傳播途徑，另一方面低鹽度養(yǎng)殖對(duì)蝦WSSV不易暴發(fā)流行。從抗WSSV來看，凡納濱對(duì)蝦養(yǎng)殖最適宜鹽度為1020‰，斑節(jié)對(duì)蝦養(yǎng)殖最適宜鹽度為28‰（未發(fā)表）。通過上述措施的處理，減少WSSV的暴發(fā)流行。同時(shí)，通過增加氧氣、改善水質(zhì)，減少氨氮和亞硝酸氮。養(yǎng)殖對(duì)蝦在低鹽、低氨氮、低亞硝酸氮的條件下，對(duì)蝦個(gè)體內(nèi)潛伏病毒數(shù)量會(huì)減少，而不易暴發(fā)病毒病。gg也是在養(yǎng)殖過程中目前較難控制的因素。日常監(jiān)測指標(biāo)應(yīng)包括鹽度、pH、溫度、SNH3N、NO2N等。4加強(qiáng)水質(zhì)的監(jiān)控從WSSV潛伏感染到急性感染，一方面與對(duì)蝦個(gè)體大小有關(guān)，而另一個(gè)重要方面是受水體理化因子和大的氣候影響，這方面的研究可以通過MBV與理化因子的關(guān)系得到佐證。與此同時(shí)，要切斷對(duì)蝦養(yǎng)殖過程中的WSSV的水平傳播途徑，在蝦塘進(jìn)水口安裝過濾網(wǎng)，由蝦塘內(nèi)至外的濾網(wǎng)分別為60、20目絹網(wǎng)，這樣既可以不影響進(jìn)排水，又可以防止較大型生物進(jìn)入養(yǎng)殖池中，從而減少了WSSV的傳播。因而，在清塘?xí)r一定要將上述幾種生物消除掉。3 消除WSSV的水平傳播的傳染源和傳播途徑WSSV的宿主種類多，已發(fā)現(xiàn)和確定的有近40種，每一個(gè)種類在WSSV的水平傳播的傳染源。世界上多采用PCR檢測法，一般為套式PCR法，也有用核酸探針的檢測方法和單克隆抗體的檢測方法。消除WSSV垂直傳播傳染源的另一種方法是建立抗WSSV的品種，由于WSSV弱毒株的產(chǎn)生和WSSV總體上致病力有所下降，從而為建立抗WSSV的對(duì)蝦品種成為可能（何建國等，2001）。除此之外，建立無WSSV對(duì)蝦品種，這在我國大陸已能進(jìn)行全人工繁殖的對(duì)蝦品種中是可行的，如中國明對(duì)蝦、日本囊對(duì)蝦、凡納濱對(duì)蝦等，而對(duì)于南方主要養(yǎng)殖品種之一的斑節(jié)對(duì)蝦目前尚無法實(shí)現(xiàn)。1 消除生產(chǎn)中垂直傳播的傳染源WSSV垂直傳播的傳染源是攜帶WSSV的親蝦。隨著對(duì)WSSV流行病的認(rèn)識(shí)的加深和新技術(shù)的發(fā)展，對(duì)WSSV的控制措施的操作性也逐漸加強(qiáng)。WSSV毒力較強(qiáng)，起始癥狀出現(xiàn)3～10天內(nèi)累積死亡率達(dá)100%。急性感染引起蝦攝食量驟減，頭胸甲與腹節(jié)甲殼易于被揭開而不粘著真皮，～2 mm的白斑，可能是表皮非正常Ca2+鹽的沉積。十二、白斑綜合癥病毒(簡稱WSSV)白斑綜合癥病毒至少有4個(gè)種株，它們是：①皮下及造血組織壞死桿狀病毒，在中國對(duì)蝦中發(fā)現(xiàn)，以稱中國病毒，引起對(duì)蝦暴發(fā)性流行??；②日本對(duì)蝦桿狀核病毒；③系統(tǒng)性外胚層和中胚層桿狀病毒，在斑節(jié)對(duì)蝦中發(fā)現(xiàn)，導(dǎo)致紅體病或白斑??；④白斑桿狀病毒。而在恢復(fù)(慢性發(fā)病)期，病蝦舉止與攝食和正常蝦一樣。可將其區(qū)分為急性發(fā)病期和恢復(fù)(或慢性發(fā)病)期。刀額新對(duì)蝦和墨吉明對(duì)蝦對(duì)YHV在池中有抗性。YHV危害極大，在泰國和臺(tái)灣地區(qū)的養(yǎng)殖斑節(jié)對(duì)蝦中引起嚴(yán)重蝦疫，印度尼西亞、馬來西亞、中國大陸、密西西比斑節(jié)對(duì)蝦也遭受嚴(yán)重打擊。十、黃頭病毒黃頭病毒簡稱YHV，斑節(jié)對(duì)蝦YHV癥狀特異，幼蝦（生長50～70天）幾天內(nèi)攝食率驟增，1天內(nèi)完全停止攝食，第3天大量死亡，全池覆沒。患急性IHHNV的幼蝦厭食，表皮上皮出現(xiàn)白色或淡黃色斑點(diǎn)，瀕死的斑節(jié)對(duì)蝦明顯變藍(lán)，腹部肌肉混濁，行為上它們會(huì)在池中慢慢升起，靜止一會(huì)兒翻滾，接著腹面朝上沉入池底，幾小時(shí)內(nèi)重復(fù)此過程知道筋疲力盡或被其它健康的蝦吃掉。五、傳染性皮下及造血組織壞死病毒傳染性皮下及造血組織壞死病毒（簡稱IHHNV）主要感染外胚層組織如鰓、表皮、前后腸上皮細(xì)胞、神經(jīng)索和神經(jīng)節(jié)，以及中胚層器官如造血組織、觸角腺、性腺、淋巴器官、結(jié)締組織和橫紋肌寫的宿主細(xì)胞核。相對(duì)于成蝦來說，對(duì)幼蝦的影響更大。其外部癥狀不特異，嚴(yán)重感染時(shí)，肝胰腺變白混濁，生長慢，厭食，體表和腮的附著物多，腹部肌肉混濁，易被弧菌或索蘭氏鐮刀菌等條件至病菌繼發(fā)感染。四、肝胰腺細(xì)小病毒肝胰腺細(xì)小病毒（簡稱HPV）是1983年我國在中國對(duì)蝦中發(fā)現(xiàn)的第1種病毒。BMNV對(duì)幼體危害大，也有發(fā)病急、死亡率高的特點(diǎn)，從無節(jié)幼體Ⅱ期和糠蝦期開始，仔蝦第10期最嚴(yán)重，累積死亡率達(dá)98﹪，第20期的仔蝦死亡率迅速下降。三、中腸腺壞死桿狀病毒中腸腺壞死桿狀病毒（簡稱BMNV）。MBV感染會(huì)引起攝食量減少、生長慢及體表和鰓的附著物增多，嚴(yán)重感染時(shí)，腺管大面積破壞或并發(fā)細(xì)菌感染，干擾和破壞宿主的消化與吸收功能，造成宿主大量死亡。MBV主要感染肝胰腺和前中腸的上皮細(xì)胞核。放養(yǎng)密度過高時(shí)，無論急性還是慢性病，都將造成對(duì)蝦大量死亡。BP對(duì)幼體的危害大，有發(fā)病急、死亡率高的特點(diǎn)，從無節(jié)幼體和糠蝦幼體開始，糠蝦期最為嚴(yán)重，累積死亡率達(dá)90%以上。BP呈桿狀，由囊膜和核衣殼組成，在宿主細(xì)胞核中形成可有多達(dá)100個(gè)大小不一的包含體。第五節(jié) 對(duì)蝦的病毒性疾病的防治引起對(duì)蝦大規(guī)模死亡的病害主要是病毒病，下面介紹幾種主要的病毒病但目前還沒有特效的治療方法，主要以防為主，預(yù)防方法參照本章第二節(jié)的步驟進(jìn)行。采用分子生物學(xué)技術(shù)檢測對(duì)蝦病毒，雖然儀器費(fèi)用和操作技術(shù)要求高，但是靈敏度高和特異性高。核酸擴(kuò)增后再進(jìn)行探針雜交實(shí)驗(yàn)，將是直接檢測對(duì)蝦病毒最敏感的方法。Wongteerasupay等（1996）用點(diǎn)雜交方法證明pmNOBII不與BP探針、IHHNVDNA探針和MBV探針雜交。九）點(diǎn)雜交（Dotblot hybridization）點(diǎn)雜交是將PCR產(chǎn)物固定到尼龍膜上或硝酸纖維素濾膜上，用標(biāo)記的與產(chǎn)物內(nèi)部部分或全長核苷酸系列互補(bǔ)的探針進(jìn)行點(diǎn)雜交，將未雜交的探針洗掉，通過雜交斑點(diǎn)的放射自顯影，估計(jì)與樣品核酸雜交的量。結(jié)果證明脊尾白蝦（Exopalaemon carinicauda）在養(yǎng)殖對(duì)蝦暴發(fā)性流行病學(xué)上具有重要意義。Arimoto等（1995）將中腸腺壞死桿狀病毒（Baculoviral midgut gland necrosis type viruses，BMHV）基因組DNA的部分BamhI酶切片段克隆。其中一個(gè)克隆，BQ31，用來構(gòu)建不同大小的DiGIIdUTP標(biāo)記的探針。嚴(yán)重感染的肝胰腺，細(xì)胞碎片與探針緊密結(jié)合，還可以在上皮細(xì)胞表面形成微小突起。Mari等（1995）將HPV的DNA基因部分克隆，構(gòu)建2個(gè)不同的DigIIdUTP標(biāo)記的探針，進(jìn)行肝胰腺石蠟切片原位雜交，能與感染組織反應(yīng)。Bruce等（1993）用原位雜交的技術(shù)檢測對(duì)蝦的桿狀病毒。郭福生等（1996）根據(jù)昆蟲桿狀病毒多角體基因保守片段設(shè)計(jì)引物，用PCR對(duì)數(shù)百分養(yǎng)殖中國對(duì)蝦蝦卵、幼蝦、成蝦、5種海捕蝦與養(yǎng)殖有關(guān)的媒介餌料——橈足類、鉤蝦、藍(lán)蛤、小雜蟹、底泥等進(jìn)行了桿狀病毒檢測。楊豐等（1995）用PCR方法進(jìn)行所分離的斑節(jié)對(duì)蝦桿狀病毒（MBV）包含體的鑒定，結(jié)果很理想。Kimura等（1996）用兩對(duì)PCR引物（P1/P2和P3/P4）檢測了日本對(duì)蝦的桿狀病毒（RVPJ）。這是首次成功地利用PCR技術(shù)進(jìn)行對(duì)蝦病毒的DNA擴(kuò)增。Brock（1992）和Lightner等（1992）用PCR來檢測對(duì)蝦的有關(guān)病毒。它是一種體外核酸擴(kuò)增系統(tǒng)，在模板DNA，引物（模板片段兩端的已知系列）和四種脫氧核苷酸等存在的情況下，依靠TaqDNA聚合酶的催化，由高溫變性，低溫退火及適溫延伸三個(gè)步驟組成一個(gè)周期，循環(huán)進(jìn)行使模板DNA得以擴(kuò)增。分子生物學(xué)技術(shù)具有高度的特異性和高度的靈敏性等特點(diǎn)，為對(duì)蝦病毒病的診斷和病毒的檢測提供了新的手段。分子生物學(xué)技術(shù)極大地推動(dòng)了生物學(xué)科的發(fā)展。 六）CID50病毒滴定法（50% Tissue Culture Infectous Dose Assay）Lu等（1995）應(yīng)用T CID50來測定YBV的感染滴度，被感染組織為用96孔組織培養(yǎng)板培養(yǎng)的蝦淋巴器官細(xì)胞，測定YBV感染的蝦的鰓勻漿液，（）CID50/ml。由于目前還沒有控制對(duì)蝦病毒病的有效藥物，可利用組織培養(yǎng)篩選抗病毒藥物。這是對(duì)蝦組織培養(yǎng)研究工作的一個(gè)重大突破。Chen等（1986）首次報(bào)道了斑節(jié)對(duì)蝦卵巢、心臟、心肌、肌肉、神經(jīng)、腸道、肝胰腺和鰓等組織的體外培養(yǎng)，發(fā)現(xiàn)僅前兩種組織可生長繁殖，并將卵巢組織細(xì)胞傳至第三代。但這些實(shí)驗(yàn)僅限于原代組織細(xì)胞的培養(yǎng)。Peponnet和Quiot（1971）首次報(bào)道了螯蝦、龍蝦和蟹的類淋巴組織的離體培養(yǎng)。五）對(duì)蝦組織細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)（Tissue culture assay）雖然自Grace（1982）從鱗翅目昆蟲Antherae eucalypti建立首株細(xì)胞后，昆蟲的組織培養(yǎng)研究進(jìn)一步活躍起來。薛清剛等（1995）用該方法檢測了中國對(duì)蝦的肝胰臟細(xì)小病毒HPV）。反向間接血凝實(shí)驗(yàn)（Reverse indirect hemagglutination，RIHA）是將特異性抗體與抗原連接到適當(dāng)處理過的哺乳動(dòng)物紅細(xì)胞表面。相對(duì)地說ELISA檢測的靈活性高，可達(dá)納可水平。病毒包含體在熒光顯微鏡下綠色熒光或橙紅色。借助于熒光顯微鏡能夠觀察是否存在相應(yīng)的抗原并確定相應(yīng)的位置。涂小林等（1995）用ELISA方法在中國對(duì)蝦的肝胰腺和鰓組織檢測了一種桿狀病毒。黃捷等（1995）用單克隆抗體酶聯(lián)免役技術(shù)檢測對(duì)蝦皮下造血組織壞死桿狀病毒（Hypodermal and hematopoietic necrosis baculovirus,HHNBV）的病原體。Lewis等(1986)報(bào)道了用間接夾心ELISA法檢測對(duì)蝦桿狀病毒。借標(biāo)記物的熒光或酶有色反應(yīng)、放射性或高電子密度，在光鏡或電鏡下進(jìn)行定性、定位或定研究。由于無脊椎動(dòng)物缺乏免疫球蛋白介導(dǎo)的免疫應(yīng)答，要對(duì)感染進(jìn)行免疫診斷，只能根據(jù)抗體對(duì)病原體的特異反應(yīng)。而對(duì)于種和型鑒別必須借助于特異性更強(qiáng)的方法。電子顯微鏡雖然可以觀察到病毒粒子，但是樣品制備困難，費(fèi)事較久，而且對(duì)于形態(tài)特征相似的病毒難以鑒別。Wongteerasupara等(1995) 在患病的斑節(jié)對(duì)蝦體內(nèi)發(fā)現(xiàn)SEMBV 病毒（a nonoccluded ,systemic baculovirus）,位于細(xì)胞核內(nèi)，無囊膜。病毒顆粒呈20面立體對(duì)稱，～，屬細(xì)小病毒科。對(duì)蝦肝胰腺細(xì)小病毒是在中國對(duì)蝦中發(fā)現(xiàn)的第一種病毒（Lightner et al.，1985）。張進(jìn)興等（1997）在中國對(duì)蝦的卵巢組織和受精卵細(xì)胞中，用電子顯微鏡觀察到有球狀病毒粒子。這9是已報(bào)道的任何一種對(duì)蝦桿狀病毒所沒有的。病毒直徑96～112nm，是已知感染對(duì)蝦最大的一種病毒。Lo 等（1997）在斑節(jié)對(duì)蝦的精巢中觀察有WSSV。Boonyaratpalin 等（1993）在泰國養(yǎng)殖的斑節(jié)對(duì)蝦中首次發(fā)現(xiàn)黃頭病毒（Yellow head virus，YHV），病毒粒子大小為150～20045～40nm，核衣殼為90～16016～22nm。7nm，最寬處直徑為136177。核酸蕊子直徑約85nm，為DNA型。在鰓上皮細(xì)胞和甲殼表皮細(xì)胞感染三種類型桿狀病毒。s812液聚合條件為37℃，60℃過夜12小時(shí)以上。Epon39。固定后的樣品經(jīng)磷酸緩沖液沖洗3次，每次30分鐘以上。何建國等（1996）%戊二醇固定液（，）固定具有白斑和紅體（不帶白斑）的斑節(jié)對(duì)蝦，組織略硬化后，解剖肝胰腺、甲殼下表皮及鰓。三）電子顯微鏡（Elertron microscopy） 雖然光學(xué)顯微鏡仍然在組織病理學(xué)檢測中起著重要作用，但是光鏡的分辨率低，要研究內(nèi)部的精細(xì)結(jié)構(gòu)和病毒粒子的大小、結(jié)構(gòu)和復(fù)制過程，需要分辨率更高的設(shè)備。s Gran染色可檢測到草蝦的MBV形成的核內(nèi)無定形包含體。在肝胰腺血竇觀察到血淋巴細(xì)胞核的皮下及造血組織壞死桿狀病毒（Hypodermal and Hematoopoietic Necrosis Baculorirus，HHNBV）病變。s酸性蘇木精染色。宋曉玲等（1996）對(duì)死亡親蝦（Penaeus chinensis）用Davidson39。Spann等（1995）用Feulgen染色，在來自澳大利亞的斑節(jié)對(duì)蝦的淋巴樣器官細(xì)胞中發(fā)現(xiàn)Lymphoid or