【正文】 （2）放養(yǎng)密度切勿過量。但是已發(fā)現(xiàn)有少數(shù)對蝦發(fā)生黑鰓病時，就應(yīng)大量換入清潔新鮮的海水，同時在飼料中添加維生素C，并多喂鮮活飼料，對以防止病情的進一步發(fā)展。特別是長期投喂缺乏維生素C的人工飼料的蝦池，易生黑鰓病。 3 換水量不足或長期不換水，是蝦池中積累有害物質(zhì)。 癥狀及病理變化：對蝦中毒后的主要癥狀是肝胰臟、顎器官以及造血組織的壞死和炎癥。各種對蝦都可患病。 流行情況：痙攣病發(fā)生的地區(qū)和受害的蝦類非常廣泛。生長緩慢，體長明顯小于健康蝦，腹肌不透明，鰓及體表往往有共棲生物附著，例如固著類纖毛蟲和絲狀細菌等。雌雄異體，雌體略呈橢圓形或圓形；雄體長柱狀，較雄體小得對，附著與雌體腹部，共同寄生與蝦的鰓腔中。發(fā)病期一般從12月上旬開始，一直延續(xù)至3月份親蝦產(chǎn)卵前。四、擬阿腦蟲病病原體：蟹棲擬阿腦蟲，蟲體呈葵花子形，前端尖，后端鈍圓?；疾〉某晌r或幼體，游動緩慢，攝食能力降低，生長發(fā)育停止，不能蛻皮，就更促進了固著類纖毛蟲的附著和增殖，結(jié)果會引起宿主的大批死亡。在青島市發(fā)生的微孢子蟲病，這種癥狀非常明顯。其主要癥狀是被寄生處的組織有黑色素沉淀而呈黑色。 防治方法： 1 預(yù)防措施（1）養(yǎng)成池放苗前要徹底清塘，除去池底過多淤泥。越冬親蝦的絲狀細菌病治療方法不能喲馬那瓜促進蛻皮的辦法，可用25 g/m3的濃度的福爾馬林藥浴24小時后換水。另外，在體表和鰓絲上附著絲狀細菌數(shù)量很多的蝦往往蛻皮困難，引起死亡。鏡檢鰓絲水腫，有時頂端愈合，重者壞死變黑；心臟組織中有黑點。③用占飼料1～2%量的大蒜搗爛，打成漿，加水拌飼料投喂，連續(xù)3～5天。同時依賴于土質(zhì)的細菌性疾病也不會在地膜養(yǎng)蝦模式中發(fā)生，養(yǎng)殖池不存在老化問題，因而細菌病相對減少，從而提高了對蝦養(yǎng)殖的成功率。6 采用淡水添加式的養(yǎng)殖模式所謂淡水添加式的養(yǎng)殖模式，實際上是在對蝦養(yǎng)殖初始進海水，養(yǎng)殖過程中利用淡水添加，直至養(yǎng)成上市。因而水質(zhì)的監(jiān)控在養(yǎng)殖過程中至關(guān)重要?？傮w上來說WSSV的控制采取以“預(yù)防為主，治療為輔”的方針。瀕死蝦通體蒼白，頭胸部黃色腫大，鰓由白到淡黃到棕色，肝胰腺變?yōu)榈S色，所以有“黃頭病”之稱。另外，MBV感染還是造成斑節(jié)對蝦“公孫蝦”現(xiàn)象的原因之一。Lo等（1996）用巢式PCR檢測蝦、蟹和其他節(jié)肢動物是否含WSSV時，在onestep PCR后，再用點雜交方法驗證PCR產(chǎn)物。八）原位雜交（In situ hybridization）原位雜交是利用放射性或非放射性標記的已知序列DNA和RNA探針，在細胞或染色體上與其互補的核酸序列配對雜交，再經(jīng)放射自顯影或免疫熒光、化學(xué)發(fā)光，在雜交原位上顯示雜交體的技術(shù)。這是首次報道的測定蝦病毒濃度的檢測手段。通過抗體與抗原之間的特異性結(jié)合反應(yīng)介導(dǎo)血細胞的凝結(jié)，從而達到檢測相應(yīng)抗原目的的一種簡便免疫學(xué)診斷技術(shù)。為了顯示和觀察這種抗原抗體反應(yīng)，需要預(yù)先將某種標記物結(jié)合到抗體上。中央是高電子密度的核心，外囊衣殼和囊膜，兩膜之間有寬闊的間隙。經(jīng)丙銅酸系列脫水。孫修勤和楠田理一（1996）用HE和Feulgen染色，在中國對蝦的肝胰腺細胞中發(fā)現(xiàn)了HPV包含體，其大小為22～24nm。Lightner(1983)和Redman曾經(jīng)報道檢查草蝦是否感染桿狀病毒的簡易方法，即直接用肝胰腺涂片，%的孔雀綠染色，若見明亮藍綠色的圓球形包含體即為陽性。一）現(xiàn)場快速診斷方法（Rapid detection）對蝦病毒病具有暴發(fā)性，所以，在生產(chǎn)上需要用簡單快速的方法來診斷對蝦是否帶有病毒。三、全池潑灑 此法是疾病防治中最常用的一種方法。尚未生病的對蝦很可能已成為帶菌者或帶蟲者，因此，凡已發(fā)現(xiàn)疾病的池塘，其中的所有動物都不要與其他水體中的動物接觸，該池中的水也不要排入其它池塘。一般網(wǎng)具可用20 g/m3的濃度硫酸銅水溶液或50 g/m3的濃度高錳酸鉀水溶液或100 g/ h；木制或塑料工具，可用5%漂白粉水溶液消毒，然后用清水洗凈后再使用。二）改善生態(tài)環(huán)境1 每年清除池底過多的淤泥和污染物質(zhì)，或排干池水后池底進行翻曬，淤泥不僅是病原體的滋生和貯存場所，而且淤泥在分解時消耗水中大量溶氧，同時產(chǎn)生有毒或有害物質(zhì)，如硫化氫、氨等。投喂飼料的數(shù)量或飼料中所含的營養(yǎng)成分不能滿足養(yǎng)殖對蝦維持生活的最低需要時，養(yǎng)殖對蝦往往會生長緩慢甚至停止生長，身體瘦弱，抗病力降低，嚴重時就會出現(xiàn)明顯的癥狀甚至死亡。對蝦暴發(fā)性流行病使1993～1994年對蝦絕產(chǎn)面積達50%以上，造成我國養(yǎng)蝦業(yè)的巨大損失。 以上這些病因?qū)︷B(yǎng)殖的對蝦的致病作用，有時是單一種病因的作用，也可以是幾種病因混合的作用，并且這些病因往往會有相互促進的作用。二、控制和消滅病原體、切斷傳播途徑一）清整池塘清池包括清除池底淤泥和池塘消毒兩個內(nèi)容，暫養(yǎng)池、養(yǎng)成池或越冬池在放養(yǎng)前都應(yīng)清池。2顆粒藥飼在水中的穩(wěn)定性好，一般應(yīng)在水中30 min以內(nèi)不散開，而對蝦吃入后又能很快消化吸收。4標粗池發(fā)現(xiàn)有疾病的對蝦在治愈前原則上不進行分苗。四、口服藥餌 此法是將藥物按一定比例均勻地混到餌料中制成藥餌后進行投喂，藥餌的形狀多為顆粒狀。但那時對蝦的肝胰腺已呈藍綠色，明顯萎縮潰爛，且蝦體異常瘦小，皮色發(fā)暗等，這些特征極易識別。Y啶橙對不同組合的蛋白質(zhì)有不同程度的結(jié)合性，細胞質(zhì)為紅色，脂滴為黑色，可避免孔雀染色的不準確性。s酸性蘇木精染色。在鰓上皮細胞和甲殼表皮細胞感染三種類型桿狀病毒。對蝦肝胰腺細小病毒是在中國對蝦中發(fā)現(xiàn)的第一種病毒（Lightner et al.，1985）。黃捷等（1995）用單克隆抗體酶聯(lián)免役技術(shù)檢測對蝦皮下造血組織壞死桿狀病毒（Hypodermal and hematopoietic necrosis baculovirus,HHNBV）的病原體。Peponnet和Quiot（1971）首次報道了螯蝦、龍蝦和蟹的類淋巴組織的離體培養(yǎng)。它是一種體外核酸擴增系統(tǒng)，在模板DNA，引物（模板片段兩端的已知系列）和四種脫氧核苷酸等存在的情況下，依靠TaqDNA聚合酶的催化，由高溫變性，低溫退火及適溫延伸三個步驟組成一個周期，循環(huán)進行使模板DNA得以擴增。嚴重感染的肝胰腺，細胞碎片與探針緊密結(jié)合，還可以在上皮細胞表面形成微小突起。第五節(jié) 對蝦的病毒性疾病的防治引起對蝦大規(guī)模死亡的病害主要是病毒病，下面介紹幾種主要的病毒病但目前還沒有特效的治療方法，主要以防為主，預(yù)防方法參照本章第二節(jié)的步驟進行。四、肝胰腺細小病毒肝胰腺細小病毒（簡稱HPV）是1983年我國在中國對蝦中發(fā)現(xiàn)的第1種病毒?？蓪⑵鋮^(qū)分為急性發(fā)病期和恢復(fù)(或慢性發(fā)病)期。消除WSSV垂直傳播傳染源的另一種方法是建立抗WSSV的品種，由于WSSV弱毒株的產(chǎn)生和WSSV總體上致病力有所下降，從而為建立抗WSSV的對蝦品種成為可能（何建國等，2001）。g一次換水量過大，較大地影響水體理化因子，容易引發(fā)WSS的暴發(fā)流行。有些細菌是條件致病菌，即平時生活在海水中、底泥中或健康的蝦體上，并不導(dǎo)致對蝦發(fā)病，但在蝦體受傷或在環(huán)境條件對蝦不利時，就能侵入蝦體并引起疾病。防治措施：主要保持水質(zhì)良好，盡量避免蝦體受傷，一旦發(fā)病，106～1106連續(xù)灑2～3 d，或配合土霉素，在每千克飼料加2000 mg，連續(xù)服用3～4 d，可以控制病情。這3種病原菌的室內(nèi)藥敏試驗結(jié)果發(fā)現(xiàn)：氟哌酸和復(fù)方新諾明等藥物都有較強的抑菌作用。絲狀細菌往往與鐘蟲、聚縮蟲等固著類纖毛蟲和殼吸管蟲、蓮蓬蟲等吸管蟲類同時存在，這就更加重了它的危害性。 癥狀和病理變化：最主要的癥狀是在對蝦腹部每一節(jié)兩側(cè)甲殼的側(cè)葉上出現(xiàn)一個白色斑點， cm左右，形狀有規(guī)則。 癥狀：病蝦體表的甲殼上有稍帶粉紅色的白斑。 防治方法： 1 對蝦在放養(yǎng)前池塘應(yīng)徹底消毒。 防治方法：此病尚無治療方法，主要加強預(yù)防，養(yǎng)蝦池在放養(yǎng)前應(yīng)徹底清淤、消毒，發(fā)現(xiàn)受感染的蝦或已病死的蝦時，立即撈出并銷毀，防止被健康的蝦吞食，或死蝦腐敗后微孢子沖的孢子散落在水中，擴大傳播。 2 養(yǎng)成期可用茶粕全池潑灑，使池水成10~15 g/m3的濃度。全身具11或12條纖毛線，略呈螺旋形排列，具均勻一致的纖毛。 （2）親蝦在捕捉，選擇和運輸時要細心操作，嚴防親蝦受傷。 防治方法：未研究 三、藍藻中毒?。ㄑ毎c炎，HE） 病因：Lighter（1982年）發(fā)現(xiàn)對蝦攝食了底棲藍藻后可中毒，已證明可引起中毒的藍藻主要為顫藻科（Oscillatoriaceae）的鈣化裂須藻（Schizothrix calcicola）。山東省的對蝦中腸變紅也可能是此病。 （2）發(fā)病季節(jié)要勤灌水，多換水，提高水位，可改善水質(zhì)，降低水溫?；【『湍承┎《荆ɡ鏘HHN）也能使局部肌肉變白，不透明。 防治方法：配合飼料及其原料的包裝、保存和運輸一定要防潮。軟殼斑節(jié)對蝦的肝胰臟中Ca和P含量明顯偏高，但甲殼中P含量則較硬殼蝦顯著低。發(fā)病季節(jié)一般為79月份。氣體的溶解度一般與水溫成反比，與氣壓成正比，因此在水溫較低，氣壓較高時，一般溶解氧充足。 （7）在7月底至10月上旬每天黎明前后到蝦池巡視，發(fā)現(xiàn)浮頭現(xiàn)象立即搶救。 癥狀和病理變化：對蝦浮頭和魚類一樣，浮在水面，但不像魚類浮頭那樣明顯地張口吞氣。水源中如果有工業(yè)廢水污染時，采取封閉措施。 3 %的Vc。 防治方法： （1）%~%的維生素C，可防止此病的發(fā)生和發(fā)展，對輕病可以治愈，病重者不能恢復(fù)。 （4）發(fā)現(xiàn)癥狀后應(yīng)盡快找出并消除致病因素，改善環(huán)境條件，可以使癥狀較輕和患病時間較短的蝦恢復(fù)正常。 癥狀及病理變化：主要癥狀是對蝦腹部肌肉變白色，不透明，與周圍正常組織有明顯的界限，特別是靠近尾部腹節(jié)中的肌肉最常發(fā)生。也與飼料的成分有關(guān)系。 病狀及病理變化：主要癥狀為血細胞腸炎（HE）。 2 治療方法 在疾病的初期，即蟲體僅存在于傷口淺處時，尚可治愈；當(dāng)寄生蟲已在血淋巴中大量繁殖時，則無有效治療方法。有的病蝦則具有褐斑病和紅腿病的癥狀。病蝦提表和鰓上呈一層絨毛樁狀物，影響對蝦呼吸和蛻皮，在池水溶氧不足時，可引起死亡。在宿主蛻皮時就隨之蛻掉，但數(shù)量很多時，危害就非常嚴重。在感染初期，尚未出現(xiàn)明顯癥狀時，用制霉菌素，每立方米水體2000萬單位，可以抑制真菌的生長發(fā)育，降低死亡率。 2 發(fā)現(xiàn)病蝦后應(yīng)立即撈出，隔離飼養(yǎng)，防止傳染其他親蝦。因為先發(fā)生白斑，以后變?yōu)楹诎?，故名白黑斑病，發(fā)生白斑或黑斑處甲殼的幾丁質(zhì)部分并未受到損傷，剖開病灶在顯微鏡下可發(fā)現(xiàn)在甲殼以下的組織中有一團棕色或黑色壞死的血細胞。2 治療方法 （1）全池潑灑茶子餅，使池水成12~15 g/m3的濃度，促使對蝦蛻皮。附著在鰓上，對蝦的危害性最大，往往附生的數(shù)量很多，成叢的菌絲布滿鰓絲表面。但養(yǎng)成期的對蝦也偶發(fā)此病，但一般發(fā)病率低，危害不大。重者倒伏在池邊，發(fā)病后2～4小時開始死亡在池邊。同時，經(jīng)過消毒處理后，殺死所有WSSV的宿主生物，在經(jīng)過7 d的靜止，宿主攜帶的WSSV已經(jīng)不具有感染性。同時，通過增加氧氣、改善水質(zhì)，減少氨氮和亞硝酸氮。因而，在清塘?xí)r一定要將上述幾種生物消除掉。急性感染引起蝦攝食量驟減，頭胸甲與腹節(jié)甲殼易于被揭開而不粘著真皮，～2 mm的白斑，可能是表皮非正常Ca2+鹽的沉積。五、傳染性皮下及造血組織壞死病毒傳染性皮下及造血組織壞死病毒（簡稱IHHNV）主要感染外胚層組織如鰓、表皮、前后腸上皮細胞、神經(jīng)索和神經(jīng)節(jié)，以及中胚層器官如造血組織、觸角腺、性腺、淋巴器官、結(jié)締組織和橫紋肌寫的宿主細胞核。放養(yǎng)密度過高時，無論急性還是慢性病，都將造成對蝦大量死亡。結(jié)果證明脊尾白蝦（Exopalaemon carinicauda）在養(yǎng)殖對蝦暴發(fā)性流行病學(xué)上具有重要意義。Kimura等（1996）用兩對PCR引物（P1/P2和P3/P4）檢測了日本對蝦的桿狀病毒（RVPJ）。這是對蝦組織培養(yǎng)研究工作的一個重大突破。病毒包含體在熒光顯微鏡下綠色熒光或橙紅色。電子顯微鏡雖然可以觀察到病毒粒子，但是樣品制備困難，費事較久，而且對于形態(tài)特征相似的病毒難以鑒別。Boonyaratpalin 等（1993）在泰國養(yǎng)殖的斑節(jié)對蝦中首次發(fā)現(xiàn)黃頭病毒（Yellow head virus，YHV），病毒粒子大小為150～20045～40nm，核衣殼為90～16016～22nm。三）電子顯微鏡（Elertron microscopy） 雖然光學(xué)顯微鏡仍然在組織病理學(xué)檢測中起著重要作用，但是光鏡的分辨率低，要研究內(nèi)部的精細結(jié)構(gòu)和病毒粒子的大小、結(jié)構(gòu)和復(fù)制過程，需要分辨率更高的設(shè)備。二）組織病理檢測（Light microscopy）光學(xué)顯微鏡技術(shù)曾經(jīng)在細胞學(xué)研究中發(fā)揮了重要作用。Sindermann et al.(1988)和廖一久（1989）在斑節(jié)對蝦（Penaeus monodon）桿狀病毒（Penaeus monodontype baculovirus）病的現(xiàn)場診斷中，用1%%孔雀綠涂片作為初步的結(jié)果。第四節(jié) 對蝦疾病的檢測技術(shù)一、對蝦疾病的初步診斷一）診斷器材和常用工具對蝦養(yǎng)殖生產(chǎn)中進行診斷的必要器材包括：解剖刀，解剖剪、鑷子、放大鏡、水質(zhì)分析測試盒等，有條件的養(yǎng)殖場應(yīng)配置顯微鏡和解剖鏡及配套的玻璃器皿，對于檢測分析單位應(yīng)具備細菌分離、培養(yǎng)和鑒定的儀器，同時應(yīng)具備完善的水質(zhì)分析儀器，病毒鑒定的儀器等。目前在南方高位精養(yǎng)蝦池在進水渠道里采用藥物掛袋法處理水質(zhì)，減少病害的暴發(fā)。每次投喂前要檢查前次投喂的吃食情況，以便調(diào)節(jié)投餌量。這些有機質(zhì)腐爛分解后，不僅消耗溶氧，產(chǎn)生氨、亞硝酸和硫化氫等有害物質(zhì)，而且成為許多病原體的滋生基地，因此應(yīng)當(dāng)在養(yǎng)殖空閑季節(jié)，即冬季或春季將池水排空，將淤泥盡可能挖掉。內(nèi)服藥一般只能由對蝦主動吃入，但當(dāng)病情嚴重時，對蝦已喪失食欲，即使特效藥也不能達到治療效果，尚能攝食的病蝦，也因攝食量降低而不能吃到足夠的藥餌而影響療效；體外用藥一般采用全池潑灑和藥浴的方法，僅適用于小水體，而對大水體便難以達到相應(yīng)的效果。1 生物因素 生物因素是引起對蝦疾病最重要因素之一，造成對蝦病害的病原生物包括傳染性生物：病毒、細菌和真菌等微生物；侵襲性生物：寄生蟲等；