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正文內(nèi)容

現(xiàn)代醫(yī)學(xué)基礎(chǔ)知識培訓(xùn)doc-文庫吧資料

2025-07-24 11:53本頁面
  

【正文】 質(zhì)粒或類似遺傳物質(zhì)轉(zhuǎn)移到受體菌。G+菌的感受態(tài)是由感受態(tài)因子(CF)的胞外信號誘導(dǎo)的。轉(zhuǎn)化:受體菌直接撮取供體菌提供的游離DNA片段整合重組使受體菌的性狀發(fā)生變異。一般在106109。遺傳型變異機制有突變,基因轉(zhuǎn)移,重組。轉(zhuǎn)位因子為存在于細菌染色體或質(zhì)粒上的一特異的核苷酸序列可在DNA中移動,主要有三類:插入順序(最小的轉(zhuǎn)位因子),轉(zhuǎn)座子,轉(zhuǎn)座噬菌體。質(zhì)粒:不依賴染色體而復(fù)制,不相容性,轉(zhuǎn)移性,指令性。細菌遺傳物質(zhì)主要在于染色體質(zhì)粒和轉(zhuǎn)位因子中。玻璃濾菌器分G1—G6,G5,G6兩型能阻止細菌通過。無芽胞菌一般的致死為1800—6500微瓦/CM,殺死芽胞要十倍。水中加入2%碳酸鈉能將沸點提到105度又能防止金屬生銹。飲用水中每毫升總數(shù)不過100個,1000毫升水中大腸桿菌群不過3個。G菌的菌體脂多糖能引起發(fā)熱故稱熱原質(zhì)。嗜冷菌最適溫為10—20,嗜溫菌為20—40,嗜熱菌為50—60。細菌營養(yǎng)轉(zhuǎn)運的方式有:離子,透性酶,磷酸酶。RNA主要存在于細胞質(zhì)中占細菌干重的10%,DNA存在于染色體和質(zhì)粒中。鞭毛是由細胞質(zhì)伸出的蛋白性絲狀物。外膜層由脂多糖,脂質(zhì)雙層,脂蛋白組成。肽聚糖的結(jié)構(gòu)由聚糖骨架,四肽側(cè)鏈和五肽交聯(lián)橋(G無交聯(lián)橋)。一般菌落有:油煎蛋樣(L),顆粒型(G),絲狀菌落(F),鑒定要點:染色易變多形性,生長在增菌液中微渾,顆粒樣沉淀或沿試管壁生長,返祖現(xiàn)象。雜交分:斑點,菌落原位,Southern(DNA)印跡,Northern(RNA,DNA)印跡。桿菌肽用于A(敏感)與非A群鏈球菌的鑒定。超凈工作臺應(yīng)選擇垂直氣流通風(fēng)方式。致病性島:由基因編碼決定的一團與致病性相關(guān)的基因組。微生物學(xué):生物學(xué)按界門綱目科屬種分類,種是最小單位。HLAA,B,C,DR,DQ位點的抗原可用血清學(xué)方法進行檢測,所以稱為SD抗原,采用補體依賴的細胞毒(CDC)試驗,HLA—D,DP位點的抗原須用細胞分型進行鑒定,稱為LD抗原,采用混合淋巴細胞培養(yǎng)(MLC)。胰胚胎抗原(POA),糖類抗原有:CA125(上皮性卵巢癌(基因有KRAS)和子宮內(nèi)膜癌)CA153(乳腺癌,基因有P53,CERB2))CA199(胰腺,結(jié)直腸癌)CA50(胰腺結(jié)直腸癌)AFU(A—L巖藻糖苷酶)是原發(fā)性肝癌的新指標(biāo)。血清CEA結(jié)合甲狀腺降鈣素測定有助于甲狀腺髓樣癌的診斷和估計。CEA大于60微克/升時可見于結(jié)腸,胃,肺癌。艾滋病T淋巴細胞亞群檢查可發(fā)現(xiàn)T細胞絕對數(shù)下降,CD4+淋巴細胞也下降,CD4/CD8小于1。性聯(lián)慢性肉芽腫(CGD)是性聯(lián)遺傳,女帶男患病,特點是吞噬細胞不能產(chǎn)生超氧化物酶殺菌,白細胞低于1500時應(yīng)考慮,可作四唑氮藍(NTB)還原試驗,REBUCK皮膚窗檢測。原發(fā)性聯(lián)合免疫缺陷病,以重癥聯(lián)合免疫缺陷(SCID)的預(yù)后最差,屬性聯(lián)或常染色體隱性遺傳,T細胞表面存在特異性CD抗原,通過特異性單克隆抗體檢測是診斷細胞免疫最有價值的試驗。原發(fā)性B細胞缺陷病:全IG缺失(BROTON病,女帶,男患病,最先考慮測IG濃度,CD分子,SMIG),部分缺失,IG正常但無抗原反應(yīng)??诟砂Y和干燥性角膜炎是干燥綜合癥(SS)的主要臨床表現(xiàn)??挂阴D憠A受體抗體的檢測對重癥肌無力(MG)具有診斷意義??筍m抗體是SLE的特異性標(biāo)志之一。不溶性DNP(抗核蛋白抗體)通常完全被DNA和組蛋白吸收,是形成狼瘡細胞的因子。膜性增生性腎小球腎炎(MPGN)是原發(fā)性腎小球病中唯一具有獨特的血清補體異常的疾病測C3NeF。新月體性腎小球腎炎的免疫病理類型有:免疫復(fù)合物,抗腎小球基底膜(GBM)抗體,抗中性白細胞質(zhì)抗體。嗜酸粒細胞活化產(chǎn)物的測定:產(chǎn)物有:陽離子蛋白(ECP),主要堿基蛋白(MBP),X,EPD,EDN等,其中ECP毒性最強因而認為是嗜酸的特異性標(biāo)志。B細胞增殖能力試驗。SMfg是鑒定B細胞可靠的指標(biāo)。植物血凝素(PHA)刀豆素(CONA)刺激T細胞增殖。淋巴細胞活力測定常用臺盼藍染色法,死為藍色。純淋巴細胞群的采集有:黏附貼壁法,吸附柱過濾法,磁鐵吸引法。雙抗體夾心法的質(zhì)控點最好是相應(yīng)抗原。發(fā)光免疫技術(shù):生物發(fā)光有熒火蟲熒光素,化學(xué)發(fā)光底物有:氨基苯二酰肼類主要為魯米諾及異魯米諾衍生物,啞啶酯類,電化學(xué)發(fā)光底物為三聯(lián)吡釕另一類為三丙胺。4為宜。熒光抗體鑒定包括效價及熒光素與蛋白的結(jié)合率,大于1:16為理想,一般固定標(biāo)本的熒光抗體以F/P=1。常用的熒光素有:異硫氰酸(FITC)四乙基羅丹明(RB200)四甲基異硫氰酸羅丹明(TRITC)。RIA(放免)核素標(biāo)記抗原,競爭抑制,23個數(shù)量級,標(biāo)記物限量。常用的標(biāo)記酶有辣根過氧化物酶(底物為鄰苯二胺,四甲基聯(lián)苯胺)堿性磷酸酶(底物為磷酸酯)。免疫固定電流常用于M蛋白的鑒定。細胞融合的選擇培養(yǎng)基有三成份:次黃嘌呤(H)氨甲蝶呤(A)胸腺嘧啶核苷(T)稱為HAT培養(yǎng)基。特異性鑒定有:效價,特異性,純度,親和力。常用佐劑有:氫氧化鋁,明礬(弗氏)是目前動物免疫中最常用的,抗血清保存:4度,低溫,冰凍干燥。由一級結(jié)構(gòu)決定。免疫炎癥類型:IGE介導(dǎo),免疫復(fù)合物,細胞,皮膚嗜堿細胞型。炎癥細胞有:中性,肥大,嗜酸,嗜堿,血小板,內(nèi)皮。細胞免疫的效應(yīng)方式有:細胞毒,遲發(fā)超敏。HLA是體內(nèi)最復(fù)雜的多態(tài)性基因系統(tǒng)。I和II類MHC分子是引起同種異體移植排斥反應(yīng)的主要抗原。人類MHC稱為HLA復(fù)合體,位于第六對染色體的短臂上。腫瘤壞死因子:TNEa:由細菌脂多糖活化的單核細胞產(chǎn)生引起出血壞死也稱惡病質(zhì)素,TNFb:由抗原或絲裂原刺激的淋巴細胞產(chǎn)生有腫瘤殺傷和免疫調(diào)節(jié)功能又稱淋巴毒素。明確的白介素有15個,IL2主要由T細胞(CD+4)受抗原或絲裂原刺激后產(chǎn)生,15KD,113糖蛋白。SIG的功能是作為B細胞表面的抗原受體可與相應(yīng)抗原特異性結(jié)合并將抗原內(nèi)攝處理。CD2表達于全部T細胞和NK細胞。產(chǎn)生補體主要是肝臟主要是巨噬細胞。補體清除免疫復(fù)合物的方式:吞噬調(diào)理,免疫粘附,免疫復(fù)合物抑制。C3含量最多,C2含量最少。補體大多是糖蛋白多屬B球蛋白,C1q,C8是r蛋白。C9,C1由C1q,C1r,C1s,三種組成。人類重鏈基因位于14號染色體上,K基因位于第二號染色體上。,2巰基乙醇能破壞IgM但不破壞IgG,可以區(qū)分它們。天然IgG分子無活性。免疫球蛋白的血清型有:同種型(正常個體都有)同種異型(只存在同種的某些個體中)獨特型(某一個體獨有的??贵w分子上VH和VL是抗原結(jié)合部位,CL,CH1是遺傳標(biāo)記所在,CH2有補體結(jié)合點,CH5能固定組織細胞,CH3和CH4還參加I型變態(tài)反應(yīng)。超抗原被T細胞識別時雖然要與MCHII類分子結(jié)合,但不受II類分子的限制,可以直接活化T細胞而且效率高??乖谋砦恢辽儆卸N方式:順序或線性表位,三維結(jié)構(gòu)的構(gòu)象表位。免疫學(xué):免疫防御(對外)免疫自穩(wěn)(防自身免疫病)免疫監(jiān)視(防腫瘤)。酶偶聯(lián)法已是是廣泛最頻繁的酶測定法,主要用30和37,它有明顯的延滯期,最好條件是酶反應(yīng)為限速度,動力學(xué)上為零級反應(yīng)而指示酶是一級反應(yīng)。聚焦層析常用凝膠是Monop多元緩沖交換劑是PBE。離子交換層析主要用于分離氨基酸多肽蛋白質(zhì)也可是核酸等。2等密度區(qū)帶離心法:當(dāng)管底介質(zhì)的密度大于粒子的密度時,粒子上浮,用于分離大小相似而密度差異大。離心力(FC)=M(質(zhì)量)ω(角度)2X(離軸心距離),相對離心力(RCF)=*105*N(轉(zhuǎn)數(shù))*X。瓊脂糖電泳適用于分離同工酶及其亞型,大分子核酸。內(nèi)標(biāo)法只適用于雙通道型原子吸收分光光度計。可以引起性功能紊亂的性激素合成酶有:C—17,20裂鏈酶,17—B羥類固醇脫氫酶,5A—還原酶。測定早晨的睪酮(男青春期10—20,成年期:300—1000)水平可以對男性睪酮水平下降作出最好評價。所有性激素都是類固醇。SMC及SM結(jié)合蛋白測定因其不跟GH的分泌而波動,故單次即可了解GH功能狀況。垂體激素均為多肽或糖蛋白,TSH,LH,F(xiàn)SH均由A,B兩個多肽亞基組成。血游離皮質(zhì)醇和尿游離皮質(zhì)醇呈正相關(guān),是檢查腎上腺皮質(zhì)功能紊亂的首選項目。尿17—酮類固醇(17—KS):男34—69,女17—52,采用Zimmerman法測。原發(fā)性腎上腺皮質(zhì)功能減退(Addison病):醛固醇(人體主要的儲鹽激素)缺乏,糖異生減弱,腎排水減弱,出現(xiàn)皮膚色素沉著。皮質(zhì)醇增多最多見是垂體促腎上腺皮質(zhì)激素(ACTH,呈脈沖式分泌,上午8時至10時最高,夜為上午的二分之一)分泌亢進引起的庫欣病。胰升糖素激發(fā)試驗禁用于糖尿病人。TSH不受TBG濃度影響,是反應(yīng)下丘腦—垂體—甲狀腺軸功能的敏感試驗,尤其是對亞臨床型甲亢和亞臨床型甲減的診斷。目前認為聯(lián)合進行FT3,F(xiàn)T4,和超TSH測定是甲狀腺功能評估的首選方案和第一指標(biāo)。Graves?。杭谞钕傩约卓海琓T3是它早期療效觀察及停藥后復(fù)發(fā)的敏感指標(biāo),TRH試驗中TSH不升高,TSAB陽性達80%100%。主要受:下丘腦垂體—內(nèi)分泌腺—激素系統(tǒng)調(diào)節(jié)。現(xiàn)用的尿胰蛋白酶原—2的試紙定性方法是基于免疫層析的原理。淀粉酶清除率與肌酐清除率比值在2—5%(Cam/Ccr),降低見于巨淀粉酶血癥者。發(fā)病后2—12H升高,12—72H達峰,3—4天后正常。胰淀粉酶屬A—淀粉酶,與胰腺提純物區(qū)帶相同為P—同工酶,與唾液腺提純物相同為S—同工酶。尿酶:分溶酶體酶和刷狀緣酶二類,常測NAG和AAP。尿轉(zhuǎn)鐵蛋白(UTf)是679個氨基酸構(gòu)成的糖蛋白,是反映腎小球濾膜損傷的靈敏指標(biāo)。早期腎損傷的檢測項目可大致分:腎小球標(biāo)記,腎小管標(biāo)記,腎組織蛋白/相關(guān)抗原。遠端腎單位功能試驗有:濃縮—稀釋試驗,尿滲量測定,滲透溶質(zhì)清除率,自由水清除率等。腎小球清除率:GFR=V/P*U,內(nèi)生肌酐清除率:Ccr=U*P/V(ml/min),小于30為重度,20為腎衰,10為終末腎衰,80—50為腎功能不全代償期,50—20為失代償期。慢性腎衰多不可逆,分腎貯備能力喪失期,氮質(zhì)血癥期,腎功能衰竭期,尿毒癥期。其中最主要的是抗利尿激素和醛固酮。腎神經(jīng)調(diào)節(jié)主要是對腎入球小動脈作用致腎小球濾過率下降。近曲小管是重吸收的重要部位。集合管不包含在腎單位中。血中HbO2量與Hb總量之比為血氧飽和度。HCO3與H2CO3的比值維持酸堿平衡。離子選擇電極法(ISE)敏感膜將離子活度換成電信號。內(nèi)標(biāo)法是標(biāo)本及標(biāo)準(zhǔn)液采用加進相同濃度的內(nèi)部元素進行測定。不論血鉀水平如何,鉀的濃度與細胞外液中HCO3直接有關(guān)而與PH的變化關(guān)系不大。鈉濃度是血漿滲透濃度的決定因素。調(diào)節(jié)鉀:醛固酮(潴鈉排鉀),糖皮質(zhì)。升高多見于:腎功不全的氮質(zhì)血癥或尿毒癥引起的磷酸鹽硫酸鹽儲留,乳酸堆積,酮體堆積。GGT含量以腎臟最高其次是前列腺,胰,肝,腦。405NM處吸光度增高(可測ALP,GGT等)。NADH被氧化為NAD,可在340nM處連續(xù)監(jiān)測吸光度下降速度。LD含量:LD2(H3M)LD1(H4主要在心,RBC)LD3(H2M2,肺脾)LD4(H3M)LD5(M4橫紋肌,肝)。CK含量和肌肉運動相關(guān),其量與肌肉總量有關(guān)。CK—MM的亞型有:MM1,MM2,MM3。在實驗規(guī)定的條件下(溫度,最適PH,最適底物物濃度時),在一分鐘內(nèi)催化1UMOL底物發(fā)生反應(yīng)的所需的酶量作為1個酶活力國際單位。KM值只與酶性質(zhì)有關(guān),與濃度無關(guān),最小KM值的底物叫最適底物或天然底物。用免疫法測酶的優(yōu)點是靈敏度和特異性高。酶釋放的速度與其分子量成反比(可分析各種酶在病理時進入血液的先后)。疾病急性相時,前白蛋白,白蛋白,轉(zhuǎn)鐵蛋白相應(yīng)低下。蛋白電泳后正極起:白蛋白,A1,A2,B,R球蛋白。CPR:12/。銅蘭蛋白:16/,單鏈,有氧化酶活性,協(xié)助診斷“肝豆?fàn)詈俗冃浴?。血紅素結(jié)合蛋白:(A和B)A2B2四聚體。白蛋白:,酸堿緩沖能力,載體,維持血漿膠體滲透壓。高TG血癥中,小而密的LDL(B型)增高,則APOB(是動脈粥樣硬化標(biāo)志物)多CHOL少,出現(xiàn)LDL—C不高而血清APOB高的“高APOB脂蛋白血癥”。膽固醇是膽汁酸唯一前體和所有類固醇激素包括性激素和腎上腺素的前體。HDL的代謝是膽固醇逆轉(zhuǎn)運途徑。肝素引起LPL酶釋放入血稱為肝素后現(xiàn)象,APOCII是激活劑,APOCIII是抑制劑。脂蛋白受體是位于細胞膜上能與脂蛋白結(jié)合的蛋白質(zhì)。HDL(apoa1和apoa4)中脂質(zhì)和蛋白質(zhì)各占一半。超速離心法:乳糜微粒(APOB48),VLDL,IDL,LDL,LP(A),HDL(密度從小到大,分子從大到?。?。血脂由中性脂肪和類脂。胰島B細胞瘤臨床特點:空腹或餐后4—5發(fā)作,腦缺糖比交感神經(jīng)興奮明顯,有嗜睡或
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