【正文】 以上蒸餾水溶解，177。 % 葡萄糖肉湯培養(yǎng)基 蛋白胨 10g 氯化鈉 5g 葡萄糖 5g 肉浸液 1000ml取蛋白胨與氯化鈉加入肉浸液內(nèi)，微溫溶解后，調(diào) pH 至弱堿性，煮沸、加入葡萄糖溶解后，搖勻，濾清，調(diào) pH ～，分裝，于 115℃ 壓力蒸汽滅菌 30min。 營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基蛋白胨 10g 牛肉膏 5g 氯化鈉 5g 蒸餾水 1000ml將各成分溶解于蒸餾水中，調(diào) pH 至 ～，分裝，于 121℃ 壓力蒸汽滅菌 20min備用。B．4 溴甲酚紫蛋白胨培養(yǎng)液 蛋白胨 10g 葡萄糖 5g 可溶性淀粉 1g 溴甲酚紫乙醇溶液 10mL 蒸餾水 1000mL將蛋白胨、葡萄糖溶解于蒸餾水中，～，加入1%溴甲酚紫酒精溶液，搖勻后，分裝，每管5mL，于115℃壓力蒸汽滅菌30min。B．2 無菌檢驗用洗脫液 吐溫―80 1g 蛋白胨 10g 氯化鈉 蒸餾水 1000mL，～，與121℃壓力蒸汽滅菌20min備用。附 錄 B（資料性附錄）消毒試驗用試劑和培養(yǎng)基配方B．1 磷酸鹽緩沖液（PBS。A．9 致病菌的檢測 當(dāng)懷疑被某致病菌污染時，或懷疑醫(yī)院感染與某致病菌有關(guān)時，致病菌的檢測依據(jù)污染情況進(jìn)行相應(yīng)指標(biāo)菌的檢測。A．8．3 檢測方法 將采樣管在混勻器上振蕩20s或用力振打80次，取采樣液檢測致病菌。A8 清潔用品的消毒效果監(jiān)測A．8．1 采樣時間 消毒后、使用前進(jìn)行采樣。消毒液染菌量計算見式（）： 消毒液染菌量（CFU/mL）=平均每皿菌落數(shù)10稀釋倍數(shù)………（）A．7．2．2 結(jié)果判斷使用中滅菌用消毒液；無菌生長；使用中皮膚黏膜消毒液染菌量：≤10CFU/mL，其他使用中消毒液染菌量≤100CFU/mL。A．7． ，將冷至40℃～45℃的熔化營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基每皿傾注15mL～20 mL,36℃177。A．7．2 使用中消毒液染菌量測定A．7．2．1 .1 ，加入9mL中和劑中混勻。A．６．5 注意事項 采樣前，關(guān)閉門、窗，在無人走動的情況下，靜止10min后采樣。A．６．４．３兒科病房、母嬰同室、婦產(chǎn)科檢查室、人流室、治療室、注射室、換藥室、輸血科、消毒供應(yīng)中心、血液透析中心（室）、急診室、化驗室、各類普通病室、感染疾病科門診及其病房空氣中的細(xì)菌菌落總數(shù)≤4cfu/(5min 結(jié)果計算 沉降法按平均每皿的菌落數(shù)報告：cfu/（皿．暴露時間） 浮游菌發(fā)計算公式見式（）空氣中菌落總數(shù)（cfu/m3）= 采樣器各平皿菌落數(shù)之和（cfu) 采樣速度（L/min）X采樣時間（min） 1000 ……（）A．６．４　結(jié)果判定A．６．４．１潔凈手術(shù)部（室）和其他潔凈場所，空氣中的細(xì)菌菌落總數(shù)要求應(yīng)遵循ＧＢ５０３3３．A．６．４．２非潔凈手術(shù)部（室）、非潔凈骨髓移植病房、產(chǎn)房、導(dǎo)管室、新生兒室、***病房、燒傷病房重癥監(jiān)護(hù)病房、血液病病區(qū)空氣中的細(xì)菌菌落總數(shù)≤４cfu／（１５ｍｉｎ 將送檢平皿置36℃177。 未采用潔凈技術(shù)凈化空氣的房間采用沉降法：室內(nèi)面積≤30 m2，設(shè)內(nèi)、中、外對角線三點，內(nèi)、外點應(yīng)距墻壁1m處；室內(nèi)面積＞30 m2，設(shè)四角及中央五點，四角的布點位置應(yīng)距墻壁1m處。～，按采樣器使用說明書操作，每次采樣時間不應(yīng)超過30min。 監(jiān)測方法（室）及其他潔凈用房可選擇沉降法或浮游菌法，參照GB50333要求進(jìn)行監(jiān)測。 結(jié)果判定 潔凈手術(shù)部、其他潔凈場所，非潔凈手術(shù)部（室）、非潔凈骨髓移植病房、產(chǎn)房、導(dǎo)管室、新生兒室、***病房、燒傷病房、重癥監(jiān)護(hù)病房、血液病病區(qū)等；物體表面細(xì)菌菌落總數(shù)≤5cfu/ cm2。 結(jié)果計算 規(guī)則物體表面物體表面菌落總數(shù)計算方法見式（）。 檢測方法充分震蕩采樣管后，將冷至40℃～45℃的熔化營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基每皿傾注15ml～20ml，36℃177。門把手等小型物體則采用，棉拭子直接涂抹物體表面采樣。 采樣方法用5cmx5cm滅菌規(guī)格板放在被檢物體表面，（PBS）或生理鹽水采樣液的棉拭子1支，在規(guī)格板內(nèi)橫豎往返各涂抹5次，并隨之轉(zhuǎn)動棉拭子，連續(xù)采樣4個規(guī)格板面積，被采表面＜100cm2，取全部表面，被采表面≥100cm2，取100cm2。 注意事項采樣皮膚表面不足5cmx5cm，可用相應(yīng)面積的規(guī)格板采樣。1℃溫箱培養(yǎng)48h，計數(shù)菌落數(shù)。 采樣方法用5cmx5cm的滅菌規(guī)格板，放在被檢皮膚處，用浸有含相應(yīng)中和劑的無菌洗脫液的棉拭子1支，在規(guī)格板內(nèi)橫豎往返均勻涂擦各5次，并隨之轉(zhuǎn)動棉拭子，剪去手接觸部位后，將棉拭子投入10ML含相應(yīng)中和劑的無菌洗脫液的試管內(nèi)，及時送檢，不規(guī)則的皮膚可用棉拭子直接涂擦采樣。 紫外線消毒效果監(jiān)測時，采樣液（平板中）不加中和劑。空氣消毒的有效監(jiān)測 。 注意事項測定時電壓220V177。 紫外線強(qiáng)度照射指示卡監(jiān)測法開啟紫外線燈5min后，蔣指示卡置于置于紫外線燈下垂直距離1m處，有圖案一面朝上，照射1min，紫外線照射后，觀察指示卡色塊的顏色，將其與標(biāo)準(zhǔn)色塊比較，讀出照射強(qiáng)度。陽性對照組培養(yǎng)陽性，試驗組培養(yǎng)陽性，則滅菌不合格；同時應(yīng)進(jìn)一步鑒定試驗組培養(yǎng)陽性的細(xì)菌是否為指示菌或污染菌所致；e）注意事項：監(jiān)測所用菌片應(yīng)取得衛(wèi)生部消毒產(chǎn)品衛(wèi)生許可批件，并在有效期內(nèi)使用。1℃培養(yǎng)7d（自含式生物指示物應(yīng)遵循產(chǎn)品說明），觀察培養(yǎng)基顏色變化，同時設(shè)陽性對照；d）結(jié)果判定：陽性對照組培養(yǎng)陽性，試驗組培養(yǎng)陰性。：a）標(biāo)準(zhǔn)指示菌株：枯草桿菌黑色變種芽孢，菌片含菌及抗力符合國家有關(guān)標(biāo)準(zhǔn)；b）常規(guī)生物測試包的制作方法：取一個20ml的無菌注射器，去掉針頭，拔出針?biāo)?，將?biāo)準(zhǔn)生物指示菌放入針筒內(nèi)，帶孔的塑料帽應(yīng)朝向針頭處，再將注射器的針?biāo)ú寤蒯樛玻ㄗ⒁獠灰黾吧镏甘疚铮?，之后用一條全棉小毛巾兩層包裹，置于塑料包裝袋中，封裝；c）監(jiān)測方法：將常規(guī)生物測試包放在滅菌器最難滅菌的部位（整個裝載滅菌包的中心部位）。1℃培養(yǎng)48h，觀察初步結(jié)果，無菌生長管繼續(xù)培養(yǎng)至第7d；e）結(jié)果判定：陽性對照組培養(yǎng)陽性，陰性對照組培養(yǎng)陰性，若每個指示菌片接種的肉湯均澄清，判為滅菌合格，若陽性對照組培養(yǎng)陽性，陰性對照組培養(yǎng)陰性，而指示菌片之一接種的肉湯管混濁，判為不合格，對難以判定的肉湯管，,用滅菌L棒或接種環(huán)涂勻,置于36℃177。 干熱滅菌的效果監(jiān)測 干熱滅菌效果的物理監(jiān)測法、化學(xué)監(jiān)測法和生物測監(jiān)測法。b）BD測試方法 測試前先預(yù)熱滅菌器，將BD測試包水平放于滅菌柜內(nèi)滅菌車的前底層，靠近柜門與排氣口底前方；柜內(nèi)除測試包外無任何物品；在134℃溫度下，取出測試包，觀察BD測試紙顏色變化。2cm、高25cm～28cm大小的布包；將專用BD測試紙，放入上述布包的中間；制成的BD測試包的重量要求為4kg177。 BD測試方法如下：a）BD測試包的制作方法 BD測試包由100%脫脂棉布或100%全棉手術(shù)巾折疊成長30177。自含式生物批示物不需要做陰性對照；f）小型壓力蒸汽滅菌器因一般無標(biāo)準(zhǔn)生物監(jiān)測包，應(yīng)選擇滅菌器常用的、有代表性的滅菌包制作生物測試包或生物PCD，置于滅菌器最難滅菌的部位，且滅菌器應(yīng)處于滿載狀態(tài)。1℃培養(yǎng)7d（自含式生物批示物按產(chǎn)品說明），觀察培養(yǎng)結(jié)果；e）結(jié)果判定 陽性對照組培養(yǎng)陽性，陰性對照駔培養(yǎng)陰性，試驗組培養(yǎng)陰性，判定為滅菌合格。 標(biāo)準(zhǔn)生物測試包的制作方法如下a）標(biāo)準(zhǔn)指示菌株：嗜熱脂肪桿菌芽孢，菌片含菌及抗力符合國家有關(guān)標(biāo)準(zhǔn)；b）標(biāo)準(zhǔn)測試包的制作：由16條41cm66cm的全棉手術(shù)巾制成。 .2 . 清洗消毒器新安裝、更新、大修、更換清洗劑、消毒方法、改變裝載方法等時，應(yīng)遵循生產(chǎn)廠家的使用說明或指導(dǎo)手冊進(jìn)行檢測，清洗消毒效果檢測合格后，清洗消毒器方可使用。 .2 . 監(jiān)測方法應(yīng)遵循生產(chǎn)廠家的使用說明或指導(dǎo)手冊；監(jiān)測結(jié)果不符合要求，清洗器應(yīng)停止使用。 .2 清洗消毒器及其效果監(jiān)測 日常監(jiān)測應(yīng)每批次監(jiān)測清洗消毒器的物理參數(shù)及運轉(zhuǎn)情況，并記錄。 .1 .2 定期抽查每月應(yīng)隨機(jī)至少抽查3個待滅菌的包內(nèi)全部物品的清洗效果，檢查的方法與內(nèi)容同日常監(jiān)測，并記錄監(jiān)測結(jié)果。 注意事項布巾、地巾應(yīng)分區(qū)使用附 錄 A（規(guī)范性附錄）清潔、消毒與滅菌的效果監(jiān)測 .1 診療器械、器具和物品清洗的效果監(jiān)測 .1 .1 日常監(jiān)測在檢查包裝時進(jìn)行，應(yīng)目測和（或）借助帶光源的放大鏡檢查。 地巾 清洗干凈，在500mg/L有效氯消毒劑中浸泡30min，沖凈消毒液，干燥備用。地面和物體表面應(yīng)保持清潔，當(dāng)遇到明顯污染時，應(yīng)及時進(jìn)行消毒處理，所用消毒劑應(yīng)符合國家相關(guān)要求。當(dāng)受到明顯污染時，先用吸濕材料去除可見的污染物，然后再清潔和消毒。當(dāng)?shù)孛媸艿交颊哐?、體液等明顯污染時，先用吸濕材料去除可見的污染物，再清潔和消毒。　，則不可用于懷孕婦女的會陰部及陰道手術(shù)部位的消毒。／L的消毒液沖洗，作用到規(guī)定時間?！荩玻纾疞氯己定水溶液沖洗或漱洗，至沖洗液或漱洗液變清為止?！荩玻纾疞氯己定－乙醇（70%，體積分?jǐn)?shù)）溶液局部擦拭２～３遍，作用時間遵循產(chǎn)品的使用說明?！〔捎玫夥翰潦米饔茫常恚椋睢担恚椋睿蛴靡掖?、異丙醇與氯己定配制成的消毒液等擦拭消毒，作用３ｍｉｎ～５ｍｉｎ。應(yīng)在手術(shù)野及其外擴(kuò)展≥１５ｃｍ部位由內(nèi)向外擦拭?！荩玻纾疞氯己定－乙醇（70%，體積分?jǐn)?shù)）溶液局部擦拭２～３遍，作用時間遵循產(chǎn)品的使用說明。，作用≥２ｍｉｎ。肌肉、皮下及靜脈注射、針灸部位、各種診療性穿刺等消毒方法主要是涂擦，以注射或穿刺部位為中心，由內(nèi)向外緩慢旋轉(zhuǎn)，逐步涂擦，共2次，消毒皮膚面積應(yīng)≥5cm、PICC、植入式血管通路的消毒范圍直徑應(yīng)﹥１５ｃｍ，至少應(yīng)大于敷料面積（１０ｃｍ１２ｃｍ）。，作用時間3min~5min?！?g/L氯己定乙醇（70%，體積分?jǐn)?shù)）溶液局部擦拭2~3遍，作用時間遵循產(chǎn)品的使用說明。12皮膚與黏膜消毒 ，作用時間遵循產(chǎn)品的使用說明。突發(fā)不明原因的傳染病病原體污染的診療器械、器具與物品的處理應(yīng)符合國家屆時發(fā)布的規(guī)定要求。、布墊等敷料、一次性醫(yī)療用品、切除的組織如壞死肢體等雙層封裝，按醫(yī)療廢物處理。 注意事項、器具和物品。終末消毒可采用3%過氧化氫或過氧乙酸熏蒸，3%過氧化氫按照20ml/m3氣溶膠噴霧，過氧乙酸按照1g/m3加熱熏蒸，溫度70%~90%，密閉24h；5%，溫度為20%~40%。 環(huán)境表面消毒 手術(shù)部（室）、換藥室、病房環(huán)境表面有明顯污染時，隨時消毒，%過氧乙酸或1000mg/L含氯消毒劑擦拭。消毒可采用含氯消毒劑1000mg/L~2000 mg/L浸泡消毒30min~45min，有明顯污染物時應(yīng)采用含氯消毒劑5000mg/L~10 000 mg/L浸泡消毒≥60min,然后按規(guī)定清洗，滅菌。%過氧化氫溶液沖洗，傷口周圍皮膚可選擇碘伏原液擦拭消毒。、消毒劑應(yīng)每次更換。，使用后應(yīng)立即處理，防止干燥；不應(yīng)使用快速滅菌程序；沒有按正確方法消毒滅菌處理的物品應(yīng)召回重新按規(guī)定處理。 注意事項，應(yīng)告知醫(yī)院感染管理及診療涉及的相應(yīng)臨床科室。 被感染朊病毒患者或疑似朊病毒患者低度危險組織污染的低度危險物品、一般物體表面和環(huán)境表面可只采取相應(yīng)常規(guī)消毒方法處理。為防止環(huán)境和一般物體表面污染，宜采用一次性塑料薄膜覆蓋操作臺，操作完成后按特殊醫(yī)療廢物焚燒處理。 被感染朊病毒患者或疑似感染朊病毒患者高度危險組織污染的低度危險物品和一般物體