【正文】 ，常在溶劑中加入少量的無機酸或有機酸降低提取液的pH值。在實踐研究和應用過程中常將這些輔助方法組合使用，獲得更加好的效果。 花色苷的提取、純化和分析方法 花色苷的提取方法日本較早開始甘薯花色苷的提取，國內從90年代中期，浙江大學等單位已經開始研究。其中，F(xiàn)e3+對色素有不良的影響，色素溶液會變黃或變?yōu)楹稚玔21]，Zn2+和A13+有明顯的增色作用[22]，其他離子對花色苷色素基本無影響。因此，為了保持花色苷的黃烊鹽陽離子結構，使其色調不發(fā)生變化，在生產和應用過程中應保持低溫。在新鮮和加工的蔬菜、水果的自然pH下，各種花色苷形式將以平衡混合物的形式存。在pH值67，醌堿會脫去質子形成共振穩(wěn)定的醌型陰離子。圖 14 花色苷在不同pH值范圍內結構和顏色的變化 structures and color of anthocyanin in different pH value當溶液的pH3時，花色苷主要以烊鹽形式存在，當pH值提高，花色苷烊鹽受到水分子的親核攻擊，在2位水合化和花色苷上的酸性OH的質子轉移發(fā)生，這兩種反應之間存在著動力學和熱力學競爭。花色苷的穩(wěn)定性受多種因素的影響：①pH值與花色苷的穩(wěn)定性[19]花色苷一般在酸性介質中比堿性介質中穩(wěn)定。(3) 花色苷的穩(wěn)定性花青素很不穩(wěn)定，自然條件下游離的花青素極少見，在水中的溶解度低，易被堿金屬破壞，光穩(wěn)定性差，花青素糖苷化后，穩(wěn)定性和溶解性增加，酰化花色苷比未?；幕ㄉ辗€(wěn)定。刪 花色苷的性質(1) 花色苷的溶解性花色苷類色素易溶解于水、甲醇、乙醇等強極性溶劑，難溶于乙醚、丙酮、石油醚、乙酸乙酯等非極性溶劑，屬于非脂溶性色素[16]。刪Terallara等(2000)[15]成功地從“Ayamurasaki”塊根中培育出花色苷含量較高的植物組織，并鑒定出其中2種花色苷的化學結構，分別為：3O槐糖苷5O葡糖苷矢車菊素和3O{2O[6O(E)p香豆酰βD吡喃葡糖基]βD吡喃葡糖苷}5OβD吡喃葡糖苷矢車菊素（圖13，結構9和10）。Terahara等(1997)[12]進一步證實了該品種中共含有8種酰化的花色苷，其中的6種為雙?；Y構，有4種為新發(fā)現(xiàn)的即：3O{6O(E)咖啡酰2O[6O(E)咖啡酰βD吡喃葡糖基]βD吡喃葡糖苷}[5O(βD吡喃葡糖苷)]矢車菊素和芍藥素以及3O{6O(E)咖啡酰2O[6O(E)對羥基苯甲酰βD吡喃葡糖基]βD吡喃葡糖苷}[5O(βD吡喃葡糖苷)]矢車菊素和芍藥素（圖13，結構5，6，7及8）。Odake等(1992)[10]采用HPLC技術分離并鑒定了此類紫甘薯色素中2種主要花色苷的化學結構，分別為：3O{6O(E)咖啡酰2O[6O(E)阿魏酰βD吡喃葡糖基]βD吡喃葡糖苷}[5O(βD吡喃葡糖苷)]矢車菊素和芍藥素（圖13，結構1和2）。此圖不嚴謹，因為有的紫甘薯花色苷組分是沒有5位的糖苷鍵的，以游離羥基形式存在，這種表示方法會讓人以為所有的紫甘薯花色苷均有5位糖苷鍵。紫甘薯是甘薯的特殊品種，其肉質紫紅，外觀誘人，它的莖葉和塊根中除含有各種營養(yǎng)成份外，還含有胡蘿卜素和花青素兩大類色素，具有著色和保健多重作用。常見的花色苷?；鶈挝蝗鐖D12所示。糖基上的羥基可與一個或幾個分子的羥基肉桂酸衍生物，如：對香豆酸、阿魏酸、咖啡酸、芥子酸、五倍子酸或對羥基苯甲酸等芳香酸和丙二酸、香草酸、蘋果酸、琥珀酸、醡漿草酸？或醋酸等脂肪酸通過酯鍵形成酰基化的花色苷，被稱為酰化花色苷。表11食品中常見的花青素的結構Table11 the structure of anthocyanidin mon in food名稱英文名R1R2矢車菊素cyanindin, CyOHH天竺葵色素pelargonidin, PgHH飛燕草色素delphinidin, DpOHOH芍藥色素peonidin, PnOCH3H牽牛色素petunidin, PtOCH3OH錦葵色素malvidin, MvOCH3OCH3花青素極不穩(wěn)定，自然狀態(tài)下游離的花色素極少見，常與一個或多個糖分子通過糖苷鍵結合而成花色苷。它們的結構中3，5，7碳位上有OH，區(qū)別在于B環(huán)各碳位上的OH或OCH3的數(shù)量的不同?；ㄇ嗨刂g的差異在于母核上的羥基和甲氧基的數(shù)量和位置不同，自然界已知的花青素有20多種，主要存在植物中的有6類，即矢車菊素(cyanindin, Cy) 、天竺葵色素(pelargonidin, Pg) 、飛燕草色素(delphinidin, Dp) 、芍藥色素(peonidin, Pn) 、牽牛色素(petunidin, Pt) 和錦葵色素(malvidin, Mv) [7]，它們有點口語化了?；ㄇ嗨氐慕Y構母核為2苯基苯并吡喃陽離子，基本碳骨架為C6C3C6(如圖11) [1]。此段不要放在此處，可以放在“研究目的及意義”中。在20世紀末，國際糧農組織和國際衛(wèi)生組織聯(lián)合禁止合成染料作食用色素后，花色苷的應用范圍不斷擴大，成為國內外公認的替代人工合成食用色素的理想資源。花色苷作為一種天然食用色素，相對于目前食品工業(yè)上所用的合成色素，安全、無毒、資源豐富，而且具有一定營養(yǎng)和藥理作用，在食品、化妝、醫(yī)藥等方面有著巨大的應用潛力。后同（anthocyanidin）（一類羥基和甲基化的2苯基苯并吡喃陽離子）與一個或多個糖分子通過糖苷鍵結合而成的化合物[2]。）的清除實驗 102（4）紫甘薯花色苷對羥基自由基（HO）的清除實驗 95 結果與討論 95 紫甘薯花色苷熱穩(wěn)定性研究 95（1）紫甘薯花色苷熱降解動力學方程 95（2）表觀活化能E0的求解 97（3）半衰期t1/2求解 97 紫甘薯花色苷抗氧化性研究 98（1）紫甘薯花色苷抑制脂質過氧化能力的檢測——脂質體氧化法 98（2）紫甘薯花色苷對DPPH）的清除實驗 94（1）鄰苯三酚(pyrogallic acid)溶液配制 94（1）對超氧陰離子自由基（O2ˉ]標準曲線的制作 93（2）[DPPH Antioxidant activity目 錄摘要 3ABSTRACT 6第一章 文獻綜述 12 花色苷的概述 12 花色苷的一般結構 12 紫甘薯中花色苷的一般結構 14 花色苷的性質 15 花色苷的提取、純化和分析方法 17 花色苷的提取方法 17 花色苷的純化方法 20 花色苷的分析方法 22 花色苷的生理功能 23 抗氧化及清除自由基活性 23 抗突變活性 23 抗癌癥作用 24 抗心血管疾病 24 減輕肝功能障礙 26 本課題的研究內容及意義 26第二章 紫甘薯花色苷組成的HPLCDADESI/MS初步分析 28 實驗材料 28 實驗樣品處理 28 主要實驗試劑 28 主要實驗儀器 29 實驗方法 29 色譜條件 29 質譜條件 29 結果與討論 29 紫甘薯Z103花色苷的粗提液的組分分析 29 不同品種紫甘薯花色苷的粗提液的組分分析 52 本章小結 55第三章 紫甘薯花色苷的提取工藝研究 56 實驗材料 56 實驗原料 56 主要實驗試劑 56 主要實驗儀器 57 實驗方法 57 原料的處理 57 紫甘薯花色苷最大吸收波長的測定 57 紫甘薯花色苷含量的測定 58 提取率的測定 58 浸提條件對提取率的影響 58（1）pH值的影響 58（2）乙醇濃度的影響 58（3）溫度的影響 58（4）料液比的影響 59 超聲輔助溶劑提取紫甘薯花色苷 59（1）超聲輔助提取和常規(guī)溶劑提取法的比較 59（2）超聲功率對提取的影響 59 淀粉含量的測定 59 提取液中花色苷組分的LCMS分析 59 結果與討論 59 紫甘薯花色苷最大吸收波長 59 浸提條件對提取率的影響 60（1）pH值的影響 60（2）乙醇濃度的影響 61（3）溫度的影響 61（4）料液比的影響 62 超聲輔助溶劑提取紫甘薯花色苷 62（1）超聲輔助提取和常規(guī)溶劑提取法的比較 62（2）超聲功率對提取率的影響 63 紫甘薯中淀粉含量的測定 63 提取液中花色苷組分的LCMS分析 64 本章小結 66第四章 紫甘薯花色苷的純化方法研究 67 實驗材料 68 主要實驗儀器 68 主要實驗試劑 68 實驗方法 69 紫甘薯花色苷提取物的制備 69 大孔樹脂的預處理 69 大孔吸附樹脂對紫甘薯花色苷的靜態(tài)吸附特性 701. 樹脂靜態(tài)吸附量及解吸率的測定 702. 樹脂靜態(tài)吸附動力學特性的研究 70（1）吸附動力學曲線的測定 70（2）解吸附動力學曲線的測定 70（3）pH值對吸附的影響 713. 樹脂靜態(tài)吸附熱力學特性的研究 71 大孔吸附樹脂對紫甘薯花色苷的動態(tài)吸附特性 71（1）樹脂的裝柱與預處理 71（2）上樣流速對吸附能力的影響 71（3）上樣濃度對吸附能力的影響 72（4）乙醇梯度洗脫 72（5）洗脫劑濃度對解吸附能力的影響 72（6）洗脫流速對解吸附能力的影響 72（7）動態(tài)吸附曲線的測定 72（8）動態(tài)解吸附曲線的測定 73 73 紫甘薯Z103花色苷不同梯度乙醇洗脫液的組分分析 73 結果與討論 73 不同樹脂對紫甘薯花色苷的靜態(tài)吸附和解吸附性能比較 73 樹脂靜態(tài)吸附動力學曲線及吸附動速率常數(shù) 75 樹脂靜態(tài)解吸附動力學曲線 77 pH值對吸附的影響 77 HPD300樹脂靜態(tài)吸附熱力學特性的研究 78 HPD300大孔吸附樹脂對紫甘薯花色苷的動態(tài)吸附特性的研究 80（1）上樣流速對吸附能力的影響 80（2）上樣濃度對吸附能力的影響 80（3）洗脫劑的選擇 81（4）乙醇的梯度洗脫 82（5）洗脫劑濃度對解吸附的影響 82（6）洗脫流速對解吸附的影響 83（7）動態(tài)吸附曲線的測定 83（8）動態(tài)解吸附曲線的測定 84 純化前后花色苷的含量及色價對比 85 不同梯度紫甘薯Z103花色苷洗脫液的組分分析 85 本章小結 88第五章 紫甘薯花色苷的熱穩(wěn)定性和抗氧化性研究 90 實驗材料 91 實驗樣品處理 91 主要實驗試劑 91 主要實驗儀器 92 實驗方法 92 紫甘薯花色苷熱穩(wěn)定性研究 92 紫甘薯花色苷抗氧化性研究 921. 紫甘薯花色苷抑制脂質過氧化能力的檢測――脂質體氧化法 92（1）脂肪氧化體系(Lipospme)的制備 93（2）丙二醛（malonaldehyde, MDA）的測定－TBA法 932. 紫甘薯花色苷對DPPH Extraction。 were PSP RC TP) VE, with IC50 being μg/mL, mg/mL, mg/mL, mg/mL respectively.KEYWORDS: Purple sweet potato anthocyanins。, at the same concentration mg/mL, the scavenging ability, were PSP (inhibition rate %) TP (%) RC (%) VE (%), with IC50 being mg/mL, mg/mL, mg/mL, mg/mL respectively. The capacity of eliminating HO, pyrogallol autooxidation and Fenton reactions, were used for paring the antioxidant activity of different antioxidants in vitro. At the concentration mg/mL, the antioxidant activity of anthocyanins from purple sweet potato with % inhibition rate was similar to the pigments from red cabbage with % inhibition rate, higher than tea polyphenols (%) and vitamin E (%). The DPPH關鍵詞：紫甘薯花色苷；組分分析；提取；純化；抗氧化性 ABSTRACTSalttolerant purple sweet potato is a Convolvulaceae annual herb, which is planted in the coastal beach. The anthocyanins from purple sweet potato are a class of highquality acylated natural colorants with highcolored capability, watersolubility and better stability. It also has the vital signifieance to treatments and the prevention disease, such as tumor, senile, cardiovascular of humanit