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瘧原蟲的鏡檢技術(shù)山東省寄生蟲病防治研究所-文庫吧資料

2025-06-01 13:32本頁面
  

【正文】 可分有性體和無性體),如果原蟲密度較低,可增加白細(xì)胞計(jì)數(shù)( 500~ 1 000 個(gè))。 不易鑒別的混合感染 1)間日瘧各期原蟲和粗環(huán)的惡性瘧環(huán)狀體。 容易鑒別的混合感染 1)同一血膜中發(fā)現(xiàn)間日瘧各期原蟲和惡性瘧雌雄配子體。 當(dāng)血膜中發(fā)現(xiàn)間日瘧原蟲時(shí),此時(shí)應(yīng)注意觀察全血膜有無惡性瘧的配子體,如無可判為間日瘧,如有可判為混合感染。 厚血膜: 用血量較多,瘧原蟲胞漿和胞核有一定程度的固縮,較難識別;但須查范圍小,節(jié)省時(shí)間,陽性檢出率較高。 厚血膜瘧原蟲 形態(tài) 惡性瘧裂殖體 厚薄血膜的優(yōu)缺點(diǎn)及其適用范圍 薄血膜: 用血量少 , 瘧原蟲的形態(tài)完整 ,便于瘧原蟲蟲種的鑒定 。 厚血膜惡性瘧小滋養(yǎng)體 惡性瘧環(huán)狀體在發(fā)育不同階段,其個(gè)體大小有很大變化。 將(未)成熟大配子體 與 成熟大滋養(yǎng)體 (核分裂前,剛要進(jìn)入裂殖體前期 )的形態(tài)鑒別 蟲體大小 :幾乎充滿被寄生的紅細(xì)胞 核 :一個(gè),較大且致密,周圍有一圈空白的不染色帶 胞漿 :邊緣清楚,不含空泡 瘧色素 :顆粒較多較粗,均勻散在 蟲體大小 :不超過被寄生紅細(xì)胞的3/4 核 :一個(gè),延長呈帶狀,周圍無明顯的不染色帶 漿 :邊緣不整齊,多有空泡 瘧色素 :顆粒較少較細(xì),分布不均勻 厚血膜中瘧原蟲的形態(tài) 厚血膜由于用血量較多,涂制的血膜小,紅細(xì)胞重疊且干燥慢,致使蟲體皺縮,空泡消失,胞漿變形,其形態(tài)改變的程度與瘧原蟲運(yùn)動(dòng)的強(qiáng)弱、空泡有無和大小有關(guān)。 惡性瘧原蟲雌配子體 新月型,兩端較尖;核小,致密,深紅色,位于中央;胞漿深藍(lán)色;瘧色素塊圍于核周 薄血膜中?。ㄐ郏┡渥芋w形態(tài)特征 間日瘧原蟲雄配子體 一般不大于或稍大于正常紅細(xì)胞,圓形;核大,疏松,淺紅色,多位于中央;胞漿淺藍(lán)色或淡紅色;瘧色素散在。 謝謝諸位領(lǐng)導(dǎo)和同志們!不當(dāng)之處請多加批評指正! 下面由年輕有為的王用彬大夫?yàn)榇蠹以敿?xì)講解厚薄血膜上間日瘧、惡性瘧各期瘧原蟲的形態(tài)結(jié)構(gòu)特點(diǎn),請大家多加鼓勵(lì)!謝謝! 咱們學(xué)習(xí)瘧原蟲的鏡檢技術(shù),關(guān)鍵是認(rèn)清鏡下的原蟲;下面結(jié)合模擬圖片及鏡下照片,簡要復(fù)習(xí)一下間日瘧原蟲、惡性瘧原蟲在厚、薄血膜上各期原蟲的形態(tài)結(jié)構(gòu),說明一下瘧原蟲的計(jì)數(shù)方法,然后重點(diǎn)對鏡下瘧原蟲的許多照片進(jìn)行辨認(rèn),最后實(shí)地鏡下觀察瘧原蟲。 卵形瘧 ● 又稱蛋形瘧原蟲, 在我國已基本消滅。 三日瘧 ● 三日瘧在我國已基本消滅。 間日瘧 ● 間日瘧原蟲分布于我國大部分地區(qū), 主要是中部地區(qū)。我省主要是間日瘧,現(xiàn)常有輸入性惡性瘧。 瘧疾全球流行,惡性瘧約占全世界瘧疾發(fā)病總數(shù)的 50%,間日瘧約占全世界瘧疾發(fā)病總數(shù)的 43%。在蚊體內(nèi)進(jìn)行有性生殖。 一部分再侵入紅細(xì)胞,開始新的一輪發(fā)育。 ● 鏡檢時(shí)間最少不低于 20分鐘。 如何確定瘧原蟲血片為陰性 ● 檢查全部厚血膜未查見瘧原蟲。 ● 配置母液時(shí)過濾可除去雜質(zhì)顆粒,有助于提高鏡檢質(zhì)量。 影響染色效果的因素 :( 1) 染劑 、 溶劑的質(zhì)量 ( 2) 染液的新舊 ( 3) 染液稀釋后使用時(shí)間 ( 4) 染液的稀釋濃度 ( 5) 染色時(shí)間 ( 6) 染色用水 ( 7) 沖洗方法 血片制作與染色注意事項(xiàng) ● 使用前載玻片一定要清潔,不然會影響血片制作和鏡檢結(jié)果。 ( 6)染色用水 染液的稀釋用水和染色后沖洗用水應(yīng)選擇,通常使用的新鮮的蒸餾水或過濾的冷開水。 染色時(shí)間長染色效果好,反之較差。 影響染色效果的因素 ( 4)染液的稀釋濃度 染液的濃度高其著色就快而深,從而瘧原蟲寄生紅細(xì)胞的薛氏點(diǎn)粗大顯著,但顏色常偏堿;染液濃度過低則染色時(shí)間久,顏色偏酸,薛氏點(diǎn)不明顯或消失。 ( 3) 染液稀釋后使用時(shí)間 必須現(xiàn)用現(xiàn)稀釋染液 ,當(dāng)時(shí)使用 , 一般在 。 通常在染液配制 12周后才使用 , 盛裝染液的瓶子應(yīng)加塞蓋密 。 ( 2) 染液的新舊 染液存放時(shí)間越久 , 染色力越強(qiáng) 。 如果血片偏藍(lán),說明染液偏鹼性。 吉氏染液濃度 門診染色 質(zhì)量好的染色 :核呈紅色 ,胞漿呈藍(lán)色。 操作 2 (慢染 )配制 3%染液: 在染色量筒內(nèi)量 2ml蒸餾水或 新鮮涼開 水, 再滴加 吉氏原液 4滴,混勻,滴入待染標(biāo)本上, 染色 30~40min。 較理想的染色結(jié)果是 紅細(xì)胞為淡紅或淡紫紅色 , 瘧原蟲的胞質(zhì)呈藍(lán)色 , 核為紫紅色 , 瘧色素為棕褐色 。 注意: 吸取母液時(shí),不要晃動(dòng)瓶子 ,以免沉淀物泛起影響染色效果 . 成批血片染色 : 將已用甲醇固定薄血膜的血片插入染色缸,倒入 3%吉氏染液稀釋液( 3毫升吉氏原液加緩沖液或凈水 97毫升,混勻)浸沒血片,同時(shí)對厚薄血膜染色 30min(根據(jù)當(dāng)?shù)貙?shí)際情況,酌情增減染色時(shí)間和濃度),然后用清水輕輕將染液漂洗干凈,將血片標(biāo)本(血膜面朝下)插于晾干板上晾干,包裝,鏡檢。 , 充分研磨;整個(gè)染色液配制時(shí)間不能少于 5個(gè)小時(shí) 。 材料: 姬氏粉 甘油 25ml 甲醇 25ml 注意: 。 在研缽中加少量甲醇 , 洗去甘油濃液混入瓶內(nèi) , 至 25ml甲醇 洗凈缽中甘油染液為止 , 塞緊瓶塞 , 充分搖勻 , 置于 55—60℃ 水浴中或溫箱內(nèi) 24h或室溫內(nèi) 3—5天 , 多加搖動(dòng) , 即成原液 。 染液偏酸 時(shí),所帶的正電荷增加,易于伊紅結(jié)合,使紅細(xì)胞和瘧原蟲的核染成鮮紅色 ,而 淋巴細(xì)胞和原蟲的胞漿著色較差 ;反之,當(dāng) 染液偏堿 時(shí), 紅細(xì)胞和嗜伊紅白細(xì)胞的顆粒等被染成紫藍(lán)色 ,不易觀察。 酸性染料伊紅 的有色基團(tuán)帶陰離子 , 可 與細(xì)胞中帶正電荷的 NH2+部分結(jié)合 , 使之呈 紅色 ;但 美藍(lán)與伊紅都不能使瘧原蟲和白細(xì)胞的核著色 , 可美藍(lán)氧化后產(chǎn)生的天青有媒染作用 , 于是 , 在媒染物與染料的共同作用下 , 瘧原蟲 和白細(xì)胞 核 被染成 紫紅色 。 堿性染料美藍(lán) 的有色基團(tuán)帶陽離子 , 可與細(xì)胞中帶負(fù)電荷的 COO部分結(jié)合 , 使之成為 藍(lán)色 。 瘧原蟲和白細(xì)胞的胞漿被染成藍(lán)色 , 紅細(xì)胞 、 瘧原蟲和白細(xì)胞核被染成紫紅色
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