【正文】 從而使依賴其生物合成的核酸、糖蛋白、脂糖等物質(zhì)的合成受抑制，限制了細(xì)胞器及酶的生成和補(bǔ)充，細(xì)胞器、生物膜受損、鈣離子內(nèi)流，從而造成肝細(xì)胞損傷。 小鼠 接受 CCl4后肝臟病理學(xué)改變與血清 ALT等生化指標(biāo)改變的相關(guān)性不如 大鼠好 。 模型評(píng)價(jià)與注意事項(xiàng) CCl4急性肝損傷 模型 2022/6/23 任立群 121 四氯化碳的配制 CCl4常配成乳劑使用，如需配成 10%乳劑， 可取 5ml植物油和 5g阿拉伯膠，放在乳缽中研 勻，再加純 CCl410ml研勻，然后加蒸餾水 10～ 15ml調(diào)成乳狀，最后加蒸餾水使體積至 100ml， 用前搖勻。 2． CCl4劑量不宜過大，以免造成動(dòng)物中毒死亡。 結(jié) 果 CCl4急性肝損傷 模型 2022/6/23 任立群 115 1. 根據(jù)所用 CCl4劑量和時(shí)間的不同，肝臟的損傷程度不同 ； 2. 一般在給予 CCl4后 16~24 h血清丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（ ALT）和天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（ AST）活性升高，并能反映肝損傷的程度 ； 3. 形態(tài)學(xué)上表現(xiàn)為 肝小葉中央?yún)^(qū)壞死和脂肪變性。 ? 這些自由基能與細(xì)胞內(nèi)和細(xì)胞膜上大分子發(fā)生共價(jià)結(jié)合，引起富含不飽和脂肪酸的生物膜發(fā)生脂質(zhì)過氧化，導(dǎo)致膜結(jié)構(gòu)和功能完整性的破壞，肝細(xì)胞損傷壞死； ? 三氯甲基自由基還能抑制細(xì)胞膜和微粒體膜上鈣泵的活性，使 Ca2+內(nèi)流增加，從而引起細(xì)胞中毒死亡； ? 三氯甲基自由基能與蛋白質(zhì)形成共價(jià)鍵，損害線粒體使NADH及 ATP在肝內(nèi)生成減少，脂肪酸氧化受抑制，影響肝臟能量生成障礙，并使三酰甘油和脂肪酸在肝細(xì)胞內(nèi)蓄積。 ? 為減少沙土鼠胃內(nèi)雜菌形成優(yōu)勢(shì)菌，有人主張用清潔級(jí)或 SPF沙土鼠。本模型先用一定量乙醇造成胃黏膜損傷，更有利于 Hp定植和胃病變形成。 ? 為便于資料間的比較，最好使用目前國(guó)際公認(rèn)的 Hp NCTC 11637菌株。由于多次灌胃給予， 應(yīng)避免其他細(xì)菌感染或抑制 Hp定植。高倍鏡下，在胃竇部、幽門部及胃體部黏膜表層上皮細(xì)胞核胃腺窩中，可見大量 Hp。 ? 組織病理學(xué)檢查 感染后第 4周胃竇和幽門的黏膜層及固有層出現(xiàn)少量炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)，黏膜下層血管擴(kuò)張、充血，腺體萎縮，伴有上皮細(xì)胞變性、壞死 。 ? 胃黏膜肉眼觀察 感染后第 8周未見胃黏膜糜爛、出血和潰瘍等病變。之后繼續(xù)禁食禁水 ，第 2天灌胃給予 HP菌液 上、下午各 1次，隔日上午再灌胃給予菌液 1次。 ? SD大鼠 ：先用 熱烙法 復(fù)制胃潰瘍，在此基礎(chǔ)上灌胃給予Hp菌液。 ? 常用 動(dòng)物有小鼠、大鼠、沙土鼠等。 幽門螺桿菌胃潰瘍 造模機(jī)制 2022/6/23 任立群 104 ? 單純 給動(dòng)物灌服一定量的 Hp菌液，只能在感染動(dòng)物的胃黏膜造成炎癥反應(yīng)，很少引起胃黏膜破損、潰瘍。 檢測(cè)指標(biāo) 醋酸誘發(fā)慢性胃潰瘍 2022/6/23 任立群 102 二、幽門螺桿菌感染性胃潰瘍模型 2022/6/23 任立群 103 ? Hp含有大量尿素酶，能迅速分解食物中尿素 并 產(chǎn) 生氨，氨中和胃酸使局部 pH值增高，使細(xì)菌不被 胃酸殺滅。 ? 與屏障功能有關(guān)的指標(biāo)：胃黏膜屏障功能測(cè)定、胃粘液測(cè)定等。 ? 潰瘍?cè)畹拇笮∨c注射醋酸的量有關(guān)，醋酸的量要準(zhǔn)確，否則形成的潰瘍差異較大。 醋酸誘發(fā)慢性胃潰瘍 2022/6/23 任立群 98 注意事項(xiàng) ? 操作過程應(yīng)嚴(yán)格消毒，籠具也應(yīng)消毒，以免術(shù)后感染，影響藥物的觀察治療。 結(jié) 果 醋酸誘發(fā)慢性胃潰瘍 2022/6/23 任立群 97 模型評(píng)價(jià) ? 醋酸誘發(fā)的胃潰瘍是一種慢性潰瘍模型，其特點(diǎn)是潰瘍的形狀、部位、肉眼及組織病理學(xué)形態(tài)、愈合過程均類似人類慢性胃潰瘍。 一般術(shù)后第 5日，潰瘍形成最為嚴(yán)重，以后緩 慢愈合，但病變有反復(fù)。 2022/6/23 任立群 96 術(shù)后 3~5天，可形成界限清楚的潰瘍。 也可在腺胃部前壁的竇體交界處將內(nèi)徑 5mm、長(zhǎng) 30mm的玻璃管垂直放置于漿膜面上，向管腔內(nèi)加入冰醋酸，使其接觸漿膜面 。 （ 4）觀察并測(cè)量潰瘍面積。每天 1次，連續(xù)給予 10d。用生 理鹽水清洗胃壁創(chuàng)面，胃復(fù)位，關(guān)腹。 醋酸浸漬法 2022/6/23 任立群 93 禁食不禁水 24h，醚麻，開腹暴露胃。 模型評(píng)價(jià)與注意事項(xiàng) 吲哚美辛致急性胃潰瘍 2022/6/23 任立群 90 第 四 節(jié) 慢性胃潰瘍動(dòng)物模型 2022/6/23 任立群 91 一、醋酸誘發(fā)慢性胃潰瘍模型 2022/6/23 任立群 92 成年大鼠，體重 180~200g，性別不限。 ? 觀察藥物的抗?jié)冃Ч话銘?yīng)預(yù)先給藥，給藥后30~60 min再給吲哚美辛。 結(jié) 果 吲哚美辛致急性胃潰瘍 2022/6/23 任立群 89 ? 本模型胃潰瘍發(fā)生率高，重復(fù)性好，缺點(diǎn)是潰瘍比較表淺。此溶液為等張溶液， pH值 ~。 ? 陽(yáng)性對(duì)照藥可選雷尼替丁，灌胃給予。 造模機(jī)制 吲哚美辛致急性胃潰瘍 吲哚美辛 環(huán)氧合酶 前列腺素 E 2022/6/23 任立群 87 體重 160~180 g大鼠，雌雄各半。環(huán)氧合酶受抑制，可使胃黏膜生理性前列腺素 E合成減少。大劑量吲哚美辛顯著抑制環(huán)氧合酶活性，致使胃黏膜防御因素減弱而形成潰瘍。 、禁食時(shí)間、利血平劑量、室溫等因素有關(guān)，應(yīng)盡量控制條件。 利血平法致急性胃潰瘍 結(jié) 果 2022/6/23 任立群 84 １ .利血平的劑量不宜過大，否則動(dòng)物容易死亡。 胃的固定和腺胃部潰瘍計(jì)數(shù)方法同水浸應(yīng)激法。 利血平法致急性胃潰瘍 造模機(jī)制 利血平是外周交感神經(jīng)阻滯藥 2022/6/23 任立群 82 體重 160~180g的 Wistar大鼠，雄雌各半。 ? 也可用鹽酸 乙醇 (50%乙醇 ／ L鹽酸 )給大鼠灌胃 (1ml/100mg)造成潰瘍，稱為 酸乙醇性潰瘍 。 粘膜損傷長(zhǎng)度 1mm 1～ 2mm 2～ 3mm 3～ 4mm 評(píng) 分 1 2 3 4 乙醇法致急性胃潰瘍 結(jié) 果 2022/6/23 任立群 79 ? 乙醇性胃潰瘍的程度與乙醇的濃度成正比，一般乙醇濃度 40％以上可引起胃黏膜明顯損傷， 80％以上時(shí)出現(xiàn)明顯破潰、壞死。 乙醇法致急性胃潰瘍 結(jié) 果 2022/6/23 任立群 78 可以胃黏膜損傷長(zhǎng)度的總和作為潰瘍指數(shù)。 乙醇法致急性胃潰瘍 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 操作步驟 2022/6/23 任立群 77 15min后即可造成明顯的胃黏膜損傷， 且時(shí)間越長(zhǎng)損傷越嚴(yán)重。最后 1次給予受試 藥后，灌服無水乙醇 1ml/只。 乙醇法致急性胃潰瘍 造模機(jī)制 2022/6/23 任立群 76 成年大鼠，性別不拘。 :灌胃給予 西咪替丁（甲氰咪胍） 雷尼替丁 2022/6/23 任立群 72 大鼠胃的解剖及幽門結(jié)扎法所致胃潰瘍圖 2022/6/23 任立群 73 2022/6/23 任立群 74 三、乙醇誘發(fā)胃損傷模型 2022/6/23 任立群 75 、氨基己糖含量， 降低胃黏膜血流量，減小胃黏膜跨膜電位 差，破壞主細(xì)胞減少粘液分泌，以及引起 胃黏膜微循環(huán)障礙等，從而破壞了胃黏膜 屏障的完整性導(dǎo)致潰瘍。 幽門結(jié)扎法胃潰瘍模型 模型評(píng)價(jià)與注意事項(xiàng) ，動(dòng)物應(yīng)預(yù)先給 藥或同時(shí)給藥，若粗制劑可采用灌胃給藥，應(yīng)確 認(rèn)胃內(nèi)已排空后方能結(jié)扎幽門。 。 幽門結(jié)扎法胃潰瘍模型 模型評(píng)價(jià)與注意事項(xiàng) 48~72h。 但病變較表淺，屬于胃黏膜急性出血性糜爛，與人類胃潰瘍的典型病變差距較大。 幽門結(jié)扎法胃潰瘍模型 2022/6/23 任立群 66 病變程度的評(píng)價(jià) 2— 潰瘍指數(shù) 可計(jì)數(shù) 前胃 部潰瘍面積，以其總和作為潰瘍指數(shù)。 6. 用肉眼或放大鏡觀察胃黏膜面，記錄每只動(dòng)物產(chǎn)生的潰瘍數(shù)、潰瘍程度、潰瘍面積（或潰瘍指數(shù)）及病變的情況。 幽門結(jié)扎法胃潰瘍模型 操作方法 2022/6/23 任立群 64 4. 幽門結(jié)扎后，停止供水供食，術(shù)后 18h處死大鼠，取胃固定、剖檢。同時(shí)經(jīng)十二指腸給予受試藥。在左側(cè)肋緣部位用手指輕輕上推暴露胃。實(shí)驗(yàn)前大鼠禁食 (24h)不禁水。 成年大鼠，雄雌均可。 ? 雷尼替丁 g/kg 體重 ? 西咪替丁（甲氰咪胍） g/kg體重 2022/6/23 任立群 59 消化性潰瘍病因及發(fā)病機(jī)制 — ROBBINS 《 BASIC PATHOLOGY》 There are two key facts about pathogenesis in peptic ulcer. One is mucosal exposure to gastric acid and pepsin. Second, there is a very strong causal association with Helicobacter pylori infection. 2022/6/23 任立群 60 消化性潰瘍病因及發(fā)病機(jī)制 胃酸對(duì)胃黏膜起腐蝕作用 胃蛋白酶在酸性環(huán)境中活性增強(qiáng)，對(duì)胃黏膜產(chǎn)生消化作用 （ HP） HP可通過釋放尿素酶分解尿素產(chǎn)生氨、分泌空泡形成細(xì)胞毒素、磷脂酶等，損傷上皮細(xì)胞產(chǎn)生炎癥，長(zhǎng)期作用可導(dǎo)致消化性潰瘍的形成。 。 3. 動(dòng)物禁食期間，如自食糞便會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。盡管胃病變與人類消化性潰瘍不同，但 由于方法簡(jiǎn)單，結(jié)果可靠，迄今仍是研究抗?jié)兯? 物的常用模型。 應(yīng)激性胃潰瘍模型 結(jié) 果 2022/6/23 任立群 55 以長(zhǎng)度、寬度、點(diǎn)數(shù) “ 記分 ” 以淤血和長(zhǎng)度記分 潰瘍程度的評(píng)定 ： 應(yīng)激性胃潰瘍模型 2022/6/23 任立群 56 模型組潰瘍指數(shù)－給藥組潰瘍指數(shù) 潰瘍抑制百分率＝ 100% 模型組潰瘍指數(shù) ２ .根據(jù)潰瘍指數(shù)推算： 發(fā)生潰瘍的動(dòng)物數(shù) 潰瘍發(fā)生百分率＝ 100% 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物數(shù) 應(yīng)激性胃潰瘍模型 潰瘍程度的評(píng)定 2022/6/23 任立群 57 1. 水浸應(yīng)激性胃潰瘍發(fā)生率可達(dá) 100%，重復(fù)性 較好。 應(yīng)激性胃潰瘍模型 操作方法 2022/6/23 任立群 54 水浸 3h，胃黏膜即發(fā)生損傷； 7~8h胃黏膜可出現(xiàn)多發(fā)性、出血性糜爛小點(diǎn)； 20h胃黏膜病變相當(dāng)嚴(yán)重，但潰瘍改變不超過粘膜肌層，且以 腺胃 （含胃體和胃竇）為重。 ? 給藥方法 動(dòng)物預(yù)先灌胃給予受試藥 4d，末次給藥后 1h進(jìn)行水浸應(yīng)激試驗(yàn)。 ? 胃的固定及處理。 ? 待其清醒后垂直浸于 18~20℃ 的恒溫水浴槽中，水面浸至劍突水平。 ? 胃的固定及處理。 ? 待其清醒后垂直浸于 18~20℃ 的恒溫水浴槽中，水面浸至劍突水平。 大鼠固定鋼板或束縛籠；恒溫水浴裝置 。 乙醇 組胺 促胃液素 腎上腺類固醇 水楊酸鹽 血清素 利血平 保泰松 …… 2022/6/23 任立群 42 ① 應(yīng)激法 ② 幽門結(jié)扎法 ③ 藥物法 ④ 醋酸法 常用的方法 急性胃潰瘍動(dòng)物 模型 治療性給藥 —— 醋酸法復(fù)制的模型 預(yù)防性給藥 —— 其他模型 乙醇 組胺 促胃液素 腎上腺類固醇 水楊酸鹽 血清素 利血平 保泰松 …… 2022/6/23 任立群 43 ① 應(yīng)激法 ② 幽門結(jié)扎法 ③ 藥物法 ④ 醋酸法 常用的方法 急性胃潰瘍動(dòng)物 模型 陽(yáng)性對(duì)照藥： H2受體拮抗藥 —— 西咪替丁，雷尼替丁，法莫替丁等 加強(qiáng)胃黏膜防御功能 —— 甘珀酸，果膠鉍，硫糖鋁 乙醇 組胺 促胃液素 腎上腺類固醇 水楊酸鹽 血清素 利血平 保泰松 …… 2022/6/23 任立群 44 研究抗胃潰