【正文】 細胞變性壞死和炎細胞浸潤 ， 炎細胞浸潤 、 壞死細胞數(shù)和程度超過豬血清模型 。 慢性活動性肝炎患者循環(huán)免疫復(fù)合物多為陽性 ，豬血清模型可用于慢性肝炎所致肝纖維化的研究 ， 對于研究免疫復(fù)合物的形成 ， 沉積和清除及對于防治免疫損傷性肝纖維化有效藥物的篩選 ， 具有意義 。 2022/6/23 54 評價 : 大鼠第 3周出現(xiàn)肝細胞變性 、 壞死 ， 第 4周增生的膠原纖維形成纖維束 ， 從中央靜脈到門管區(qū)之間相互伸延 ， 發(fā)生纖維化 。 動物選用雄性 Wistar大鼠，體重 130g左右。 2022/6/23 53 ? 造模方法： ： 免疫性肝纖維化產(chǎn)生的機理是 Ⅲ 型變態(tài)反應(yīng)引起，白蛋白和血清的大分子物質(zhì)，作為異種抗原進入大鼠體內(nèi)后，刺激其產(chǎn)生相應(yīng)的抗體，當抗原再次進人機體后抗原抗體結(jié)合，形成抗原 —抗體免疫復(fù)合物 (IC)， 抗原的反復(fù)、長期刺激，過量的免疫復(fù)合物來不及被清除，沉積于肝臟的血管壁內(nèi)外，引起血管炎，造成肝損傷 。 2. 已有 化學(xué)性損傷 、 免疫性 、 生物學(xué) 、 酒精性 和 營養(yǎng)性 肝纖維化模型。 其中以甘油三酯升高最強 ，其次是磷脂 、 游離膽固醇 ， 對膽固醇酯沒有影響 。 評價 : 給藥 9h后可使血清膽固醇升高 3～ 4倍； 20h后雄性大鼠血清膽固醇仍為正常的 34倍 ， 而雌性大鼠卻為 6倍左右 。 如同時在飼料中加入 20％ 的膽固醇 ， 則出現(xiàn)顯著的動脈粥樣硬化病變 。 評價： 成年兔及幼兔均可出現(xiàn)動脈粥樣硬化的典型病變 。 評價 : 持續(xù)兩周 ， 均可引起主動脈病變 ， 呈現(xiàn)血管壁中層弱性纖維拉長 、 劈裂或斷裂 ， 病變中出現(xiàn)壞死及鈣化 。 一種方法是先滴 15min， 休息 5min后再滴15min。 評價 : 動脈內(nèi)膜損傷率為 88％ ， 冠狀動脈亦有粥樣硬化的病變 ， 若同時給予高膽固醇飼料 ， 病變更加明顯 。 2022/6/23 47 非喂養(yǎng)法誘發(fā)高血脂及動脈粥樣硬化癥模型 造模方法 : ： 將大鼠主動脈勻漿給兔注射 ， 可引起血膽固醇 、 β —脂蛋白及甘油三酯升高 。 評價： 雞為雜食動物，僅在普通飼料中加入膽固醇，就可形成動脈粥樣硬化斑塊。 36mg％ 評價： 容易飼養(yǎng)和節(jié)省藥品等優(yōu)點 ， 但是取血不便 ， 難做動態(tài)觀察 ， 所以較少采用 。 2022/6/23 45 ： 雄性小鼠飼以 1％ 膽固醇及 10％ 豬油 的高脂飼料 ， 7天后血清膽固醇即升為 343177。 評價： 飼養(yǎng)方便 、 抵抗力強 、 食性與人相近 。 可形成高膽固醇血癥 。 但兔作模型不夠理想 ， 主要表現(xiàn)為 血源性泡沫細胞增多 ， 且 病變分布 與人的病變也有差異 。 評價： 對喂飼膽固醇非常敏感 ， 在短期內(nèi)便能出現(xiàn)明顯的病變 。 2022/6/23 43 3. 兔： 選用 2kg左右體重 ， 每天膽固醇 ， 4個月后形成主動脈粥樣硬化斑塊；劑量增至 ， 3個月 出現(xiàn)斑塊；增至 ， 可縮為 2個月 。 血清膽固醇較正常時升高 ～ 。 ： 選用 ～ ， 3～ 6歲的恒河猴飼喂高脂飼料 (50％ 麥粉 、 8％ 玉米粉 、 8％ 麥麩 、 1％ 膽固醇 、 8％ 蛋黃 、 8％ 豬油 、 17％ 白糖及適量的小蘇打和食鹽 ） 。 2022/6/23 42 ? 造模方法 : ： 用 1％ ～ 2％ 高脂食物飼喂 6個月以上即可形成動脈粥樣硬化病變 。 2022/6/23 40 第四節(jié) 心血管疾病動物模型 高脂飼料誘發(fā)高血脂及動脈粥樣硬化癥模型 非喂養(yǎng)法誘發(fā)高血脂及動脈粥樣硬化癥模型 2022/6/23 41 高脂飼料誘發(fā)高血脂及動脈粥樣硬化癥模型 造模機制： 1. 動物飼料中加入過量的膽固醇和脂肪，飼養(yǎng)一定時間后，其主動脈及冠狀動脈處逐漸形成粥樣硬化斑塊，并出現(xiàn)高血脂癥。 4. 可連續(xù)傳代，試驗周期短，條件易于控制。 2. 接種成活率近 100%。 2. 腹水瘤移植： 腫瘤細胞皮下接種 —— 710d處死荷瘤動物 —— 取腹水 —— 含葡萄糖平衡鹽水稀釋至適當濃度 —— 腹腔注射（腹水瘤）或皮下注射（實體瘤）。 2. 方法和種系應(yīng)對所用致瘤物敏感 。 3. 黃曲霉素誘發(fā) 大鼠肝癌 ： 在大鼠飼料中加入黃曲霉素 ， 含 ， 喂養(yǎng) 6個月 ， 誘發(fā)率達 80％ 。 2. 亞胺基偶氮甲苯 (OAAT)誘發(fā) 小鼠肝癌 ： 用 l％ OAAT苯溶液涂于動物兩肩胛間皮膚上 ， 隔日 1次 ，每次 2—3滴 、 一般涂 100次 。 此模型誘發(fā)率約 40%。 2022/6/23 36 ? 舉例： 1. 二乙基亞硝胺 (DEN)誘發(fā) 小鼠肺癌 ： 采用小鼠皮下注射 1％ DEN水溶液 ， 每周一次 ， (每次劑量為 56mg/kg體重 ， 總劑量為 868mg)。 異位誘發(fā)腫瘤具有易于觀察和取材的優(yōu)點。 2022/6/23 35 ? 誘發(fā)性腫瘤模型： 1. 方法： 1) 原位誘發(fā)： 指將致癌物直接與動物靶組織或靶器官接觸而誘發(fā)該組織或器官發(fā)生腫瘤，接觸方法可通過涂抹、灌注、喂養(yǎng)或埋置等 。 2. 誘發(fā)性腫瘤（ induced tumor）動物模型： 是使用致癌因素在實驗條件下誘發(fā)動物發(fā)生腫瘤的動物模型。 裸大鼠同樣能接受人類正常組織和腫瘤異種移植，因其體型較大，可提供相對較多的血樣及瘤組織，也易于進行外科手術(shù)，在腫瘤研究上更方便。 ?裸小鼠的應(yīng)用： 腫瘤學(xué)、微生物學(xué)、免疫學(xué)、寄生蟲學(xué)、毒理學(xué)等基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)的研究中 2022/6/23 32 2022/6/23 33 ? 裸大鼠（ rnu） 基因符號為 rnu，純合子裸大鼠（ rnu/rnu）具有與裸小鼠基本相似的特征，無胸腺，缺乏功能性 T淋巴細胞， B細胞功能基本正常， NK細胞活力增強，抵抗力差，易患呼吸道疾病。 2022/6/23 31 裸小鼠 (nu) ?帶有純合裸基因（ nu/nu）的小鼠具有的主要特征：全身 無毛 ，呈 裸體 外表， 無胸腺 ，缺乏成熟 T細胞的輔助、抑制及殺傷功能， B細胞功能基本正常。帶有裸基因的小鼠品系包括： NIHnu、 BALB/cnu、 C3Hnu和 C57BL/6nu等。導(dǎo)致這種異常狀態(tài)的 裸基因（ nu） 是一個隱性突變基因，位于 11號常染色體上。 2022/6/23 28 第二節(jié) 免疫缺陷動物 2022/6/23 29 ? 免疫缺陷動物 是指由于先天性遺傳突變或用人工方法造成一種或多種免疫系統(tǒng)組成成分缺陷的動物。擁擠、飲食改變、過度光照、噪音、屏障系統(tǒng)的破壞等，任何一項被忽視都可能給模型動物帶來嚴重影響。 動物因素對動物模型復(fù)制的影響 品種、品系、年齡體重、性別、生理狀態(tài)等 2022/6/23 26 ? 實驗技術(shù)因素對動物模型的影響 實驗季節(jié)、晝夜過程、麻醉深度、手術(shù)技巧、實驗給藥、對照組的影響等。 按中藥理論分類，人類疾病動物模型包括解表藥動物模型，清熱藥、瀉下藥、祛風濕藥、利水滲濕、溫里藥、止血藥、止咳藥、化痰藥、平喘藥、安神藥、平肝息風藥、補益藥、理氣藥、活血化瘀藥等動物模型。整體動物模型是常用的疾病模型之 一，也是研究人類疾病的常用手段。