【正文】 黃酮苷及花色素類 PPC色譜 1．硅膠薄層色譜 — 極性較小的黃酮類化合物（黃酮苷元） 2．聚酰胺薄層色譜 — 可用于黃酮苷及游離黃酮的分離 鑒別，其色譜行為可參考聚酰胺柱色譜。 查耳酮 二氫黃酮 黃酮醇 黃酮 二氫黃酮醇 異黃酮 （ 4）與介質(zhì)的關(guān)系：吸附力 水（中） 甲醇、乙醇（濃度 由低到高） 堿性溶劑 （氫鍵吸附） 洗脫規(guī)律：與吸附規(guī)律正好相反，即吸附能力越強(qiáng)，越難洗脫 聚酰胺 “雙重色譜”原理 正相色譜 反相色譜 聚酰胺：極性固定相（極性酰胺基團(tuán)） 非極性固定相（非極性脂肪鏈） 洗脫劑：有機(jī)溶劑（氯仿 甲醇，極性小） 含水溶劑（甲醇 水，極性大） 先洗脫：游離黃酮（苷元，極性小） 苷（極性大）（柱色譜分離） Rf值： 苷元 苷 苷元 苷（ TLC色譜鑒別） ***上述規(guī)律也適用于黃酮類化合物在聚酰胺薄層上的行為。 （ 2）酚羥基數(shù)目相同的情況下，酚羥基所處的位置有利于形成分子內(nèi)氫鍵，吸附能力減弱。 2．聚酰胺色譜 吸附規(guī)律：與黃酮類化合物酚羥基的數(shù)目、位置及介質(zhì)有關(guān)。 7， 4′OH 7或 4′OH 其他位 OH 5OH NaHCO3 + Na2CO3 + + NaOH + + + + 應(yīng)用： pH梯度法分離 OO H+： γ 吡喃酮環(huán) 1氧原子 微弱堿性（孤對(duì)電子，接受質(zhì)子） 僅溶于強(qiáng)的、濃酸 +水 （濃硫酸） 烊 鹽（呈色） 應(yīng)用 初步鑒別黃酮母核類型：黃酮、黃酮醇 —— 黃 ~橙色，并有熒光 二氫黃酮 —— 橙紅（冷）、紫紅（熱） 查耳酮 —— 橙紅 ~洋紅 異黃酮（二氫） —— 黃色 橙酮 —— 紅 ~洋紅 五．顯色反應(yīng) 1．還原顯色反應(yīng) 反應(yīng)類型 鑒別特征 鑒別意義 備注 鹽酸 鎂粉 黃酮、二氫黃酮、 紅 ~紫紅 黃酮類特征性 假陽(yáng)性 反應(yīng) 黃酮醇、二氫黃酮醇 紅 ~紫紅 鑒別反應(yīng) （花色素） （最常用） 查耳酮、橙酮、 （ ） 兒茶素類、異黃酮 （ ） 四氫硼鈉 二氫黃酮、二氫黃酮醇 紅 ~紫紅 二氫黃酮類特有 還原反應(yīng) 其它黃酮類 （ ） 鈉汞齊反應(yīng) 黃酮、二氫黃酮 紅 異黃酮、二氫異黃酮 紅 黃酮醇類 黃 ~淡紅色 二氫黃酮醇類 棕黃色 反應(yīng)類型 鑒別特征及鑒別意義 備 注 鋯鹽 枸櫞酸 鋯鹽 枸櫞酸 3OH或 3， 5 二 OH 黃色 黃色不褪 PPC (ZrOCl2) 5OH 黃色褪去 示 氨性氯化鍶 (SrCl2) 鄰二酚羥基 綠、棕乃至黑色沉淀 三氯化鐵 (FeCl3) 酚羥基 紫、藍(lán)、綠 三氯化鋁 3OH， 4C=O 黃色 （ AlCl3） 5OH， 4C=O 鮮黃色熒光 PPC\TLC 鄰二酚羥基 （ 4‘ 或 7， 4’ 黃酮醇，天藍(lán)色熒光） 3. 硼酸顯色反應(yīng) 硼酸 5 羥基， 4 羰基黃酮 黃色，綠色熒光（草酸液） （ H3BO3） 6′ 羥基， 4 羰基查耳酮 黃色，無(wú)熒光（枸櫞酸） 4. 堿性試劑反應(yīng) 反應(yīng)類型 鑒別特征及鑒別意義 備 注 氫氧化鈉溶液 黃酮 — 黃 ~ 橙色 查耳酮、橙酮 — 紅 ~ 紫紅 二氫黃酮 — 黃 ~橙色（冷） 深紅 ~ 紫紅 （較長(zhǎng)時(shí)間或加熱） 母核類型鑒別 稀氫氧化鈉 鄰三酚羥基黃酮類 暗綠 ~藍(lán)綠色纖維狀 鄰三酚羥基 氨蒸氣或碳酸鈉溶液 顏色變化 TLC、 PPC 五氯化銻 (SdCl5)： 查耳酮特征性顯色反應(yīng) (紅或紫紅色沉淀 ) 黃酮、二氫黃酮、黃酮醇類呈橙色。 b、 5OH酸性最弱（處于羰基鄰位，形成分子內(nèi)氫鍵）。 羥基甲基化（ OCH3） , 水溶度降低。但水溶性與結(jié)構(gòu)的平面性、取代基團(tuán)的種類和數(shù)目等有一定關(guān)系。 顏色：多為黃色 交叉共軛體系（電子轉(zhuǎn)移、重排，共軛增強(qiáng)，產(chǎn)生顏色的基礎(chǔ)） 助色團(tuán)（給系統(tǒng)提供電子，使顏色加深，尤其 7， 4′位，輔助作用） 黃酮（灰黃 ～ 黃色） 二氫黃酮 黃酮醇（灰黃 ～ 黃色） 二氫黃酮醇 查耳酮（黃 ～橙 黃色） 二氫查耳酮 二氫異黃酮 黃烷醇類 異黃酮（無(wú)或微黃色） 花色素類（顏色隨 pH而改變 紅色（ pH 7） 紫色（ pH= ） 藍(lán)色（ pH） OOOOOO4 39。6 39。4 39。OO HOO HO HOHOHOg lc紅花苷 查耳酮 結(jié)構(gòu)和分類 OO HOO HO HOHOg lc梨根苷 二氫查耳酮 OO H3OO HOHO HO HHHO H （ +） 兒茶素 OO HO H34OO HOHO HO HO HO HO H 無(wú)色飛燕草素 結(jié)構(gòu)和分類 黃烷 3，4二醇 黃烷 3醇 34OOC H2567 2 39。6 39。3 39。 5 39。4 39。 2 ． 黃酮的生物活性 第一節(jié) 結(jié)構(gòu)和分類 分類依據(jù)： 3位羥基取代與否 三碳鏈?zhǔn)欠駱?gòu)成環(huán) 三碳鏈的氧化程度 B環(huán)連接位置 ( 3位 ) 氧化型