高效液相色譜法bppt課件-文庫吧資料
2025-05-13 12:08本頁面
【正文】 ； 洗脫劑則根據(jù)試樣的性質(zhì) ， 有針對性地選擇極性較強(qiáng)的溶劑如醚 、 酯 、 酮 、 醇和酸等； 反相色譜中： 以水為流動相的主體 ， 以加入不同配比的有機(jī)溶劑作調(diào)節(jié)劑 。 硬質(zhì)凝膠 （ 無機(jī)凝膠 ） 是具有一定孔徑范圍的多孔性凝膠 ， 如多孔硅膠 、 多孔玻璃珠等 凝膠化學(xué)惰性 、 穩(wěn)定性及機(jī)械強(qiáng)度均好 ， 耐高溫 ， 使用壽命長 ， 但裝柱時易碎 ， 不易裝緊 ， 柱效較低 。 半硬質(zhì)凝膠 （ 有機(jī)凝膠 ） 種類： 如苯乙烯二乙烯苯交聯(lián)共聚物凝膠 特點(diǎn)： 能耐較高壓力 ， 適用于有機(jī)溶劑作流動相 ，有一定可壓縮性 ， 可填得緊密 ， 柱效較高 。 （ 二 ） 固定相－－凝膠 凝膠是含有大量液體 （ 一般為水 ） 的柔軟而富于彈性的物質(zhì) ， 是一種經(jīng)過交聯(lián)而具有立體網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)的多聚體 。 七、 空間排阻色譜法 （ 一 ） 分離原理 凝膠內(nèi)具有一定大小的孔穴 小分子可完全滲透入內(nèi)，最后洗出色譜柱 中等體積的分子部分滲透 體積大的分子不能滲透到孔穴中去而被排阻，較早地被淋洗出來 固定相為化學(xué)惰性多孔物質(zhì) —— 凝膠 ,類似于分子篩，但孔徑比分子篩大。 對 離子型化合物的 分析 ， 離子色譜法是目前唯一能獲得快速 、 靈敏 、 準(zhǔn)確和多組分效果的方法 ， 檢測手段已擴(kuò)展到電導(dǎo)檢測器之外的其它類型的檢測器 ， 如電化學(xué)檢測器 ， 紫外光度檢測器 。 離子對形成機(jī)理 把和被測物 離子 A電荷相反的離子 B（ 對離子或反離子 ） 加入到流動相中 ，使待測 離子 A與反離子 B形成 中性離子對AB， 該 AB離子對 的性質(zhì)與 A離子 或 B離子的性質(zhì)不同 ， 即間接改變了待測離子的保留特性 。利用不同 待測離子對固定相親和力的差別 來實(shí)現(xiàn)分離? 適用無機(jī)離子混合物的分離，亦可用于有機(jī)物的分離，例如氨基酸、核酸、蛋白質(zhì)等生物大分子。 適用于分離中等極性化合物 ， 如脂溶性維生素 、 甾族 、 芳香醇 、 芳香胺 、 脂 、 有機(jī)氯農(nóng)藥 反相鍵合相色譜法 ? 流動相極性大于固定相極性 ， 多以水或無機(jī)鹽緩沖液為主體 ， 再加入一種能與水相混溶的有機(jī)溶劑 （ 如甲醇 、 乙睛 、 四氫呋喃等 ） 為調(diào)節(jié) 。 常用非極性溶劑如烷烴類溶劑 ， 樣品組分的保留值可用加入適當(dāng)?shù)挠袡C(jī)溶劑 （ 調(diào)節(jié)劑 ） 的辦法調(diào)節(jié)洗脫強(qiáng)度 。 例： 十八烷基硅烷鍵合相（簡稱 ODS或 C18）： 是最常用的非極性鍵合相。具有相當(dāng)?shù)哪蜔嵝院突瘜W(xué)穩(wěn)定性 ， 是目前應(yīng)用最為廣泛的鍵合相 。 在這類固定相中 ， 有機(jī)基團(tuán)直接鍵合在硅膠表面上 。 由于這類鍵合固定相的有機(jī)表面是一些單體 ，具有良好的傳質(zhì)特性 ,但這些酯化過的硅膠填料易水解且受熱不穩(wěn)定 ， 因此僅 適用于不含水或醇的流動相 （ 2） 硅氮型 （ ≡ SiN ） 鍵合相 將硅膠表面的羥基先轉(zhuǎn)化成鹵素（氯化），再與各種有機(jī)胺反應(yīng)，可以得到各種不同極性基因的鍵合相。 ）和苯基等 （ 2） 極性基團(tuán) 如氨丙基 ， 氰乙基 、 醚和醇等 。 (二 )流動相 要求流動相對固定相的溶解度盡可能小 ，因此固定液和流動相的性質(zhì)往往處于 兩個極端 ? 正相色譜 ——固定液極性 流動相極性 極性小的組分先出柱 ， 極性大的組分后出柱 適于分離極性組分 ? 反相色譜 ——固定液極性 流動相極性 極性大的組分先出柱 ， 極性小的組分后出柱 適于分離非極性組分 二、化學(xué)鍵合相色譜法 （一）原理 ? 化學(xué)鍵合相：利用化學(xué)反應(yīng)，通過共價鍵將有機(jī)基團(tuán)鍵合在載體（硅膠）表面，形成均
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