發(fā)光免疫技術(shù)ppt課件-文庫(kù)吧資料
2025-05-12 18:04本頁(yè)面
【正文】 + 帶丫啶酯標(biāo)記物抗體 沖洗后 夾心法 （ 1） 加入 H2O2 （ pH10） （ 2） 加入堿 （ pH10） 直接化學(xué)發(fā)光的機(jī)理 磁 微粒 模式圖 Y 特點(diǎn) – 抗原和抗體結(jié) 合與未 結(jié)合部分 的 易 分離 磁微粒 技術(shù) 化學(xué)發(fā)光酶免疫分析 （ chemiluminescence enzyme immunoassay， CLEIA）是用參與催化某一化學(xué)發(fā)光反應(yīng)的酶如辣根過(guò)氧化物酶（ HRP） 或堿性磷酸酶 (ALP)來(lái)標(biāo)記抗原或抗體，在與待測(cè)標(biāo)本中相應(yīng)的抗原 (抗體 )發(fā)生免疫反應(yīng)后，形成固相包被抗體 待測(cè)抗原 酶標(biāo)記抗體復(fù)合物，經(jīng)洗滌后，加入底物 (發(fā)光劑 )，酶催化和分解底物發(fā)光，由光量子閱讀系統(tǒng)接收，光電倍增管將光信號(hào)轉(zhuǎn)變?yōu)殡娦盘?hào)并加以放大，再把它們傳送至計(jì)算機(jī)數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)，計(jì)算出測(cè)定物的濃度。 1．魯米諾及其衍生物 2． AMPPD 1．魯米諾 魯米諾發(fā)光原理 魯米諾增強(qiáng)發(fā)光反應(yīng)原理 2． AMPPD 〔 3(2‘螺旋金剛烷 )4甲氧基 4(3“磷酰氧基 )苯 1,2二氧雜環(huán)丁烷 〕〕 1. 碳二亞胺（ EDC）縮合法 二、發(fā)光劑的標(biāo)記技術(shù) 2. 過(guò)碘酸鈉氧化法 3．重氮鹽偶聯(lián)法 4. N羥基琥珀酰亞胺活化法 1．發(fā)光劑的選擇 2．被標(biāo)記蛋白質(zhì)的性質(zhì) 3．標(biāo)記方法的選擇 4．原料比 5．標(biāo)記率 6．溫度 7．純化與保存 影響標(biāo)記的因素 第三節(jié) 化學(xué)發(fā)光免疫分析的類型 用吖啶酯直接標(biāo)記抗體 (抗原 )，與待測(cè)標(biāo)本中相應(yīng)的抗原 (抗體 )發(fā)生免疫反應(yīng)后，形成固相包被抗體 待測(cè)抗原 吖啶酯標(biāo)記抗體復(fù)合物，這時(shí)只需加入氧化劑（ H2O2）和NaOH使成堿性環(huán)境，吖啶酯在不需要催化劑的情況下分解、發(fā)光 。 2．三聯(lián)吡啶釕 三聯(lián)吡啶釕 [RU(bpy)3]
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