高效液相色譜儀ppt課件-文庫吧資料
2025-05-11 07:32本頁面
【正文】 液準確 ? 輸液均勻準確，并且脈動減小 ? 保留時間及色譜峰面積的重現(xiàn)性提高 – 提高檢測的性能 ? 防止氣泡引起的尖峰 ? 基線穩(wěn)定，信噪比增加 ? 溶劑的紫外吸收本底降低 – 保護色譜柱 ? 減少死體積 ? 防止填料的氧化 6. 流動相的脫氣 常用的脫氣方法 ? 氦氣脫氣法：利用液體中氦氣的溶解度 比空氣低，連續(xù)吹氦脫氣，效果較好，但成本高。有機相濾膜一般用于過濾有機溶劑，過濾水溶液時流速低或濾不動。 ? 對 儀器 ：溶劑和樣品中的細小顆粒會增加進樣閥的堵塞和磨損，同時也會增加泵頭內的藍寶石活塞桿和活塞的磨損。 溶劑和樣品過濾非常重要，它會對色譜柱、 儀器起到作用，消除由于污染對分析結果的影響。除去溶解在流動相 中的微量氣體既有利于檢測，還可以防止流動相中的微量 氧與樣品發(fā)生作用。 ? 流動相沸點不要太低，否則容易產(chǎn)生氣泡，導致實驗無法 正常進行。 ? 流動相的物化性質要與使用的檢測器相適應。 流動相具有一定惰性，與樣品不產(chǎn)生化學反應 ( 特殊情況除外，如配位色譜等 ) 流動相的黏度要盡量小，以便降低柱壓，延長色譜柱 使用的壽命 避免流動相與固定相發(fā)生作用而使柱效下降或損壞柱子。 也可在低極性溶劑中，逐漸增加其中的極性溶劑， 使保留時間縮短。 在選擇溶劑時， 溶劑的極性 是選擇的重要依據(jù)。 常用溶劑 ： 正己烷、四氫呋喃、乙酸乙酯、乙醇、 甲 醇、異丙醇、乙腈、水。組分在兩種類型分離柱上的出峰順序相反。 ? 親水性固定液常采用疏水性流動相，即流動相的極性小于固定相的極性，稱為正相液液色譜法，極性柱也稱正相柱。 四、液相色譜的流動相 1. 流動相特性 ? 液相色譜的流動相又稱為：淋洗液，洗脫劑。 特點 ：通用型檢測器，對各物質有幾乎相同的響應。在檢測器中，光被散射的程度取決于溶質顆粒的大小與數(shù)量。 工作原理 :通過檢測光散射程度而測定溶質濃度的檢測器 。 缺點 ：只適合于能產(chǎn)生熒光的物質的檢測。 許多藥物和生命活性物質 (多環(huán)芳烴，維生素 B、黃曲霉素、卟啉類化合物、農藥、藥物、氨基酸、甾類化合物等 )具有天然熒光，能直接檢測。 ℃ （需配柱溫箱使用） ； 靈敏度低 (106g)； 不能用于梯度洗脫。 截止波長 原理 ：監(jiān)測參比池和測量池中溶液的 折射率之差 來 測量試樣濃度的檢測器。 溶 劑 UV截止波長（ nm） 乙 腈 190 水 190 環(huán) 己 烷 195 己 烷 200 甲 醇 210 乙 醇 210 乙 醚 220 二氯甲烷 220 氯 仿 240 四氯化碳 265 四氫呋喃 280（ 220） 甲 苯 285 在使用紫外檢測器時，檢測波長與所用溶劑的截止波長接近（或低于截止波長）時，容易產(chǎn)生噪音干擾，從而影響檢測結果。 光電二極管檢測器（ PDA） 缺點 ：只能檢測有紫外吸收的物質。 雙波長紫外檢測器 2487 特點 ：選擇性檢測器， 靈敏度較高（ 109g）， 噪音低。 它具有波長固定，波長可變和光電二極管陣列三種類型。 (4) 液相色譜 檢測器 分類 按檢測原理： 光學檢測器（如 紫外、熒光、示差折光、蒸發(fā)光散射 ） 熱學檢測器 (如吸附熱） 電化學學檢測器（如庫倫、安培） 電學檢測器（電導、介電常數(shù)） 按測量性質： 通用型檢測器（如示差折光、蒸發(fā)光散射檢測器） 專屬型檢測器（如紫外、熒光檢測器） 按檢測方式： 濃度型檢測器 質量型檢測器 著重介紹四種檢測器：紫外檢測器（光電二極管陣列檢測器）、 示差折光檢測器、熒光檢測器、蒸發(fā)光散射檢測器 工作原理 ：基于朗伯 比爾定律。 作用不同 ：預柱則只能起到過濾顆粒物作用，防止顆粒物堵塞色譜柱篩
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