【正文】 別，這是 個(gè)性 ； ? 絕大多數(shù)復(fù)制是以 復(fù)制叉 的 形式 進(jìn)行的 。 在 DNA復(fù)制時(shí)，合成方向與復(fù)制叉移動(dòng)的方向一致并連續(xù)合成的鏈為 前導(dǎo)鏈 ；合成方向與復(fù)制叉移動(dòng)的方向相反，形成許多不連續(xù)的片段，最后再連成一條完整的 DNA鏈為 滯后鏈 。每個(gè) DNA復(fù)制的獨(dú)立單元被稱為復(fù)制子（ replicon），主要包括復(fù)制起始位點(diǎn)（Origine of replication）和終止位點(diǎn) 復(fù)制叉 復(fù)制叉 復(fù)制方向和速度： 單 起點(diǎn)、 雙 向等速 多 起點(diǎn)、 雙 向等速 雙鏈解開、復(fù)制起始 大約 20個(gè) DnaA蛋白在 ATP的作用下與 oriC處的4個(gè) 9bp保守序列相結(jié)合 在 HU蛋白和 ATP的共同作用下 ,Dna復(fù)制起始復(fù)合物使 3個(gè) 13bp直接 重復(fù)序列變性 ,形成開鏈 解鏈酶六體分別與單鏈 DNA相結(jié)合 (需 DnaC幫助 ),進(jìn)一步解開 DNA雙鏈 RNA引物的合成 DnaB蛋白活化引物合成酶，引發(fā) RNA引物的合成。 ori(或 o） 、富含 A、 T的區(qū)段。 單鏈結(jié)合蛋白 (SSBPsinglestrand binding protein)： 穩(wěn)定已被解開的 DNA單鏈，阻止復(fù)性和保護(hù)單鏈不被核酸酶降解。 rep蛋白就是解螺旋酶，還有解螺旋酶 I、 II、 III。同復(fù)制有關(guān)。主要集中在活性轉(zhuǎn)錄區(qū)，同轉(zhuǎn)錄有關(guān)。 修復(fù)紫外光引起的DNA損傷 DNA 復(fù)制的主要 聚合酶，還具有3’ 5‘ 外切酶的校對(duì)功能，提高DNA復(fù)制的保真性 原核生物中的 DNA聚合酶 (大腸桿菌） α β γ δ ε 定位 細(xì)胞核 細(xì)胞核 線粒體 細(xì)胞核 細(xì)胞核 3‘ 5’ 外切 + + + 酶活性 功能 引物 合成 修復(fù) 作用 線粒體 DNA 的復(fù)制 核 DNA 的復(fù)制 ？ 真核生物中的 DNA聚合酶 DNA連接酶（ 1967年發(fā)現(xiàn)）： 若雙鏈 DNA中一條鏈有切口，一端是 3’ OH， 另一端是 5‘ 磷酸基，連接酶可催化這兩端形成磷酸二酯鍵，而使切口連接。 3 39。 3 39。 5 39。實(shí)質(zhì)是以 DNA為模板的 RNA聚合酶 。 （一） DNA的半保留復(fù)制（ semiconservative replication） Semiconservative Conservative Dispersive 實(shí)驗(yàn)證據(jù) （ 1958 Meselson 和 Stahl ）： Matthew Messelson Franklin Stahl “Heavy” DNA “Hybrid” DNA “l(fā)ight” DNA “Hybrid” DNA DNA半保留復(fù)制的生物學(xué)意義： DNA的半保留復(fù)制表明 DNA在代謝上的穩(wěn)定性，保證親代的遺傳信息穩(wěn)定地傳遞給后代。是一種比雙螺旋更高層次的空間構(gòu)象。兩股鏈之間在空間上形成一條大溝和一條小溝，這是蛋白質(zhì)識(shí)別 DNA的堿基序列，與其發(fā)生相互作用的基礎(chǔ)。堿基互補(bǔ)配對(duì)總是出現(xiàn)于腺嘌呤與胸腺嘧啶之間 (A=T)，形成兩個(gè)氫鍵；或者出現(xiàn)于鳥嘌呤與胞嘧啶之間 (G=C)，形成三個(gè)氫鍵。 ? (3) 堿基位于雙螺旋的 內(nèi)側(cè) ，兩股鏈中的嘌呤和嘧啶堿基以其疏水的、近于平面的環(huán)形結(jié)構(gòu)彼此密切相近，平面與雙螺旋的長(zhǎng)軸相垂直。 ? (1) 在 DNA分子中，兩股 DNA鏈圍繞一假想的共同軸心形成一右手螺旋結(jié)構(gòu)，雙螺旋的螺距為 ，直徑為 。 繞 DNA雙螺旋表面上出現(xiàn)的螺旋槽（溝），寬的溝稱為大溝，窄溝稱為小溝。 ? DNA和 RNA都含有鳥嘌呤 (G)、腺嘌呤 (A)和胞嘧啶 (C)；胸腺嘧啶 (T)一般而言只存在于 DNA中，不存在于 RNA中；而尿嘧啶 (U)只存在于 RNA中，不存在于 DNA中。 二、 DNA的結(jié)構(gòu) 1） 概念 指 4種脫氧核苷酸的連接及其排列順序， DNA序列是這一概念的簡(jiǎn)稱。 如： rRNA、 tRNA 一般是不編碼蛋白質(zhì)的序列，在調(diào)控基因表達(dá)中起重要作用 ■ 高度重復(fù)序列 ：拷貝數(shù)達(dá)到幾百個(gè)到幾百萬(wàn)個(gè)。如：蛋清蛋白、血紅蛋白等 功能：主要是編碼蛋白質(zhì)。 ● 真核基因組具有端粒結(jié)構(gòu) . ● 含有大量 重復(fù)序列 ■ 不重復(fù)序列 /單一序列：在基因組中有一個(gè)或幾個(gè)拷貝。 ● 存在大量的順式作用元件 。 染色體的結(jié)構(gòu)模型 ? 貝克等 (Bak, A. L., 1977)：染色體 四級(jí)結(jié)構(gòu)模型 理論能夠在一定程度上解釋染色質(zhì)狀態(tài)轉(zhuǎn)化的過程 ? 1. DNA+組蛋白 ?核小體 +連接絲 ? 2. 核小體 ?螺線體 (solenoid) ? 3. 螺線體 ?超螺線體 (supersolenoid) ? 4. 超螺線體 ?染色體 DNA+組蛋白 ? 核小體 +連接絲 核小體 +連接絲 ? 螺線體 (solenoid) 螺線體 ? 超螺線體 (supersolenoid) 超螺線體 ? 染色體 （四）核小體 (nucleosome) 定義：用于包裝染色質(zhì)的結(jié)構(gòu)單位，是由 DNA鏈纏繞一個(gè)組蛋白核構(gòu)成的。 ? C值 一般隨著生物進(jìn)化而增加，高等生物的 C值一般大于 低等生物。 2)C值反?，F(xiàn)象 (C值矛盾 Cvalue paradox) C值 是一種生物的單倍體基因組 DNA的總量。 生理?xiàng)l件下為 8595℃ 影響因素： G+C含量， pH值，離子強(qiáng)度，尿素，甲跣胺等 ■ 復(fù)性（ Renaturation) 熱變性的 DNA緩慢冷卻，單鏈恢復(fù)成雙鏈。 ■ 增色效應(yīng) (Hyperchromatic effect) 在變性過程中， 260nm紫外線吸收值先緩慢上升，當(dāng)達(dá)到某一溫度時(shí)驟然上升，稱為增色效應(yīng)。 非組蛋白的組織專一性和種屬專一性。這些組蛋白修飾的 意義 ：一是改變?nèi)旧w的結(jié)構(gòu)，直接影響轉(zhuǎn)錄活性；二是核小體表面發(fā)生改變，使其他調(diào)控蛋白易于和染色質(zhì)相互接觸，從而間接影響轉(zhuǎn)錄活性。 H H4修飾作用較普遍，H2B有乙?；饔?、 H1有磷酸化作用。 組蛋白 ■ 肽鏈氨基酸分布的不對(duì)稱性 堿性氨基酸集中分布在