【正文】 此時，GTP水解并釋放GDPEFTu復(fù)合物。 第一步，與新進來的氨基酰tRNA相結(jié)合。EFTs和EFG， 有氨基酰tRNA， 肽鏈延伸的基本要求是 eIF6促使多個蛋白因子與40S小亞基解體，以此幫助大小亞基結(jié)合形成80核糖體，形成翻譯起始復(fù)合物。 eIF4G5’的帽子結(jié)構(gòu)相結(jié)合，形成eIF4F復(fù)合物。 eIF4E與mRNA模板相結(jié)合，協(xié)助核糖體掃描模板序列，定位AUG。 eIF4A 是最早與核糖體40S小亞基結(jié)合的促進因子，蛋白質(zhì)合成反應(yīng)的正常進行。 eIF2B促進MettRNAMet與核糖體40S小亞基結(jié)合。功能 表279 上述六組分復(fù)合物再與50S大亞基結(jié)合，水解GTP生成并釋放GDP和Pi。–1和IF3及模板mRNA所組成的復(fù)合物立即與GTPIF2及fMettRNAfMet相結(jié)合。 由30S核糖體小亞基與起始因子IF核糖體小亞基 模板mRNA fMettRNAfMet 起始因子 GTP 50S真核生物中只有一個RF，能識別3個終止子。僅能促進RF1和RF2的功能。識別識別原核中有RF13。factor（IF）延伸因子Elongationformation. ③PeptideiningofProcessing. 肽鏈延伸分為三步 ①PostmRNA. FoldinginterminationbyispolypeptideofRelease.stage. TerminationinarePeptideinitiatingtosubunitsmalltopolypeptideforthemRNAInitiation.thenottheplacereactionAcidsof 主要分為五步 肽鏈的延伸——核糖體沿mRNA5’端向3’端移動，導(dǎo)致從N端向C端的多肽合成。 在大腸桿菌中合成一個100個氨基酸的多肽只需5分鐘。細菌細胞中的2萬個核糖體，10萬個蛋白質(zhì)因子和20萬個tRNAs此外，有20種以上的AAtRNA及合成酶、10多種起始因子、延伸因子及終止因子，30多種tRNA及各種rRNA、mRNA和100種以上翻譯后加工酶參與蛋白質(zhì)合成和加工過程。acid. 雖然mRNA在所有細胞內(nèi)執(zhí)行著相同的功能，即通過三聯(lián)子密碼翻譯生成蛋白質(zhì)，其生物合成的具體過程和成熟mRNA的結(jié)構(gòu)在原核和真核生物細胞內(nèi)是不同的。acidDNAmessenger 七.它從mRNA的5’末端向3’末端閱讀密碼子，至終止子時合成一條完整的多肽鏈。在大腸桿菌內(nèi)，Mg2+濃度在103mol/L以下時，70S解離為亞基，濃度達102mol/L時則形成穩(wěn)定的70S顆粒。翻譯的起始階段需要游離的亞基，隨后才結(jié)合成70S/80S顆粒，繼續(xù)翻譯進程。A位、P位、轉(zhuǎn)肽酶中心等主要在大亞基上。tRNA、肽基小亞基上擁有mRNA結(jié)合位點，負責(zé)對序列特異的識別過程，如起始位點的識別和密碼子與反密碼子的相互作用。 rRNA 核糖體包括至少5個活性中心，即mRNA結(jié)合部位、結(jié)合或接受AA真核生物細胞核糖體大亞基含有49種蛋白質(zhì)，小亞基有33種蛋白質(zhì)。核糖體是一個致密的核糖核蛋白顆粒，可以解離為兩個亞基，每個亞基都含有一個相對分子質(zhì)量較大的rRNA和許多不同的蛋白質(zhì)分子。 原核生物核糖體由約2/3的RNA及1/3的蛋白質(zhì)組成。一個細菌細胞內(nèi)約有20000個核糖體，而真核細胞內(nèi)可達106個，在未成熟的蟾蜍卵細胞內(nèi)則高達1012。它是由幾十種蛋白質(zhì)和幾種核糖體RNA（ribosomalenzyme.onactiveaproductsincorrectbindingissecondaminoacylAMP.activationandtheacidthebindingthefilter 有兩道關(guān)口: The不同的tRNA有不同堿基組成和空間結(jié)構(gòu)，容易被tRNA合成酶所識別，困難的是這些酶如何識別結(jié)構(gòu)上非常相似的氨基酸。tRNA合成酶是否能使氨基酸與對應(yīng)的tRNA相結(jié)合。+E+AMPtRNA→AA3’末端腺苷殘基上，與其2’或3’羥基結(jié)合。是一類催化氨基酸與tRNA結(jié)合的特異性酶，其反應(yīng)式如下： 它實際上包括兩步反應(yīng)： 第一步是氨基酸活化生成酶氨基酰腺苷酸復(fù)合物。 五．AA （3）校正tRNA 校正tRNA分為無義突變及錯義突變校正。 （2）同工tRNA 代表同一種氨基酸的tRNA稱為同工tRNA，同工tRNA既要有不同的反密碼子以識別該氨基酸的各種同義密碼，又要有某種結(jié)構(gòu)上的共同性，能被AA 4．tRNA的種類 （1）起始tRNA和延伸tRNA 能特異地識別mRNA模板上起始密碼子的tRNA叫起始tRNA，其他tRNA統(tǒng)稱為延伸tRNA。 3．tRNA的功能 轉(zhuǎn)錄過程是信息從一種核酸分子（DNA）轉(zhuǎn)移至另一種結(jié)構(gòu)上極為相似的核酸分子（RNA）的過程，信息轉(zhuǎn)移靠的是堿基配對。受體臂和TφC臂的桿狀區(qū)域構(gòu)成了第一個雙螺旋，D臂和反密碼子臂的桿狀區(qū)域形成了第二個雙螺旋。這種結(jié)構(gòu)是靠氫鍵來維持的，tRNA的三級結(jié)構(gòu)與AA這對于維持反密碼子環(huán)的穩(wěn)定性及密碼子、反密碼子之間的配對是很重要的。tRNA的稀有堿基含量非常豐富，約有70余種。 最常見的tRNA分子有76個堿基，104。反密碼子臂是根據(jù)位于套索中央的三聯(lián)反密碼子命名的。arm）主要由鏈兩端序列堿基配對形成的桿狀結(jié)構(gòu)和3’端末配對的34個堿基所組成，其3’端的最后3個堿基序列永遠是CCA，最后一個堿基的3’或2’自由羥基（—OH）可以被氨?；RNA合成酶。代表相同氨基酸的tRNA稱為同工tRNA。它不但為將每個三聯(lián)子密碼翻譯成氨基酸提供了接合體，還為準確無誤地將所需氨基酸運送到核糖體上提供了載體。根據(jù)上述規(guī)則，至少需要32種不同的tRNA才能翻譯61個密碼子。如果數(shù)個密碼子同時編碼一個氨基酸，凡是第一、二位堿基不相同的密碼子都對應(yīng)于各自的tRNA。當(dāng)Inosine（I）作為反密碼子第一位時，能識別三個密碼子。反密碼子第一位是A或C時，只能識別一個密碼子。anticodon中的相應(yīng)堿基形成WatsonCrick堿基配對。hypothesis ①hypothesis），解釋了反密碼子中某些稀有成分如I以及許多有2個以上同源密碼子的配對問題。 三．密碼子和反密碼子的相互作用 蛋白質(zhì)生物合成過程中，tRNA的反密碼子通過堿基的反向配對與mRNA的密碼子相互作用。由一種以上密碼子編碼同一個氨基酸的現(xiàn)象稱為簡并（degeneracy），對應(yīng)于同一氨基酸的密碼子稱為同義密碼子（synonymous 當(dāng)體系中帶有多聚核苷酸模板時，從大腸桿菌中提取的核糖體經(jīng)常與特異性氨基酰tRNA相結(jié)合。Synthetase）。RNA，tRNA）上。 （3）氨基酸的“活化”與核糖體結(jié)合技術(shù)。Nirenberg等及Ochoa等又用各種隨機的多聚物作模板合成多肽。AGU…3’由第二種讀碼方式產(chǎn)生的密碼子UAG是終止密碼，不編碼任何氨基酸，因此，只產(chǎn)生GUA（Val）或AGU（Ser）。AGUUAG…3’ 或5’…AGUUAGGUA…3’或5’…UAGGUACUU…3’分別產(chǎn)生UUC（Phe）、UCU（Ser）或CUU（Leu）. 多聚三核苷酸為模板時也可能只合成2種多肽：5’…GUACUU5’…CUUUCUUCUUUC…3’或UUC如以多聚（UUC）為模板，可能有3種起讀方式： 5’…UUCGUG…3’,不管讀碼從U開始還是從G開始，都只能有UGU（Cys）及GUG（Val）兩種密碼子。GUGGUG以多聚二核苷酸作模板可合成由2個氨基酸組成的多肽，以poly（C）及poly（A）做模板分別得到多聚脯氨酸和多聚賴氨酸。在含有tRNA、核糖體、AAtRNA合成酶及其它蛋白質(zhì)因子的細胞抽提物中加入mRNA或人工合成的均聚物作為模板以及ATP、GTP、氨基酸等成分時又能合成新的肽鏈，新生肽鏈的氨基酸順序由外加的模板來決定。 實驗3: 以均聚物為模板指導(dǎo)多肽的合成。 實驗1: 用吖啶類試劑（誘導(dǎo)核苷酸插入或丟失）處理T4噬菌體rII位點上的兩個基因，使之發(fā)生移碼突變（frameshift），就生成完全不同的、沒有功能的蛋白質(zhì)。 （2）Francis 如果注射后經(jīng)數(shù)小時（或數(shù)天）收獲肝臟，所有細胞成份中都帶有放射性標記的蛋白質(zhì)。Zameik等人證實細胞中蛋白質(zhì)合成的場所。而假定以3個核苷酸代表一個氨基酸，則可以有43=64種密碼，滿足了編碼20種氨基酸的需要。 mRNA中只有4種核苷酸，而蛋白質(zhì)中有20種氨基酸，若以一種核苷酸代表一種氨基酸，只能代表4種(41=4)。遺傳密碼——三聯(lián)子 mRNA上每3個核苷酸翻譯成蛋白質(zhì)多肽鏈上的一個氨基酸，這3個核苷酸就稱為一個密碼，也叫三聯(lián)子密碼。所謂翻譯是指將mRNA鏈上的核苷酸從一個特定的起始位點開始，按每3個核苷酸代表一個氨基酸的原則，依次合成一條多肽鏈的過程。翻譯是指以新生的mRNA為模板，把核苷酸三聯(lián)子遺傳密碼翻譯成氨基酸序列、合成蛋白質(zhì)多肽鏈的過程，是基因表達的最終目的。copies. 基因表達包括轉(zhuǎn)錄（transcription）和翻譯（translation）兩個階段。giveduplicatedacidstrandedareplication（復(fù)制）inperpetuatedinformationstrand，是指那條根據(jù)堿基互補原則指導(dǎo)mRNA生物合成的DNA鏈。非編碼鏈（anticodingstrand）又稱senseDNA序列是遺傳信息的貯存者，它通過自主復(fù)制得到永存，并通過轉(zhuǎn)錄生成mRNA，翻譯生成蛋白質(zhì)的過程控制所有生命現(xiàn)象。第三講Length）＝Coli中基因密度每毫米DNA帶有2400個基因！一個人細胞中所帶有的DNA約有2m/。中基因密度明顯低于原核和病毒。EucaryoticColiColi Eucaryotic850倍細菌本身長度。=doublestranded Contour4639221viral E.100DNA4200RNA Qβ9000small HIVareDNA 整個染色體DNA幾乎全部由功能基因與調(diào)控序列所組成； 七.NaCl和5mol/L尿素才能與DNA解離。用2mol/L b.這是一類能用低鹽（group (3)幾類常見的非組蛋白 （high非組蛋白的組織專一性和種屬專一性。非組蛋白的量大約是組蛋白的60%～70%，但它的種類卻很多，約在20100種之間，其中常見的有1520種。 ⑵非組蛋白的一般特性 染色體上除了存在大約與DNA等量的組蛋白以外，還存在大量的非組蛋白。包括甲基化、乙基化、磷酸化及ADP核糖基化等。堿性氨基酸集中分布在N端的半條鏈上。 無組織特異性。H3的保守性也很大，鯉魚與小牛胸腺的H3只差一個氨基酸，小牛胸腺與豌豆H3只差4個氨基酸。牛、豬、大鼠的H4氨基酸序列完全相同。這些組蛋白都含有大量的賴氨酸和精氨酸，其中HH4富含精氨酸，H1富含賴氨酸；H2A、H2B介于兩者之間。通常可以用2mol/L 3．染色體中的蛋白質(zhì) 染色體上的蛋白質(zhì)包括組蛋白和非組蛋白。數(shù)十萬個Alu重復(fù)序列散布于整個人類基因組中，達到總序列的1－3％。所準確復(fù)制，它們一般在DNA復(fù)制完成以后由telomarase合成后加到染色體末端。 染色體末端的線性重復(fù)序列不能被DNAbp左右不精確重復(fù)序列所組成。stabilizethateukaryoticendsatarebp、方向相同的高度重復(fù)序列所組成。堿基對。在酵母中，centromere的功能單位長約130 Centromere：是細胞有絲分裂期間紡錘體蛋白質(zhì)與染色體的結(jié)合位點（attachment由于堿基的組成不同，在CsCl密度梯度離心中易與其他DNA分開，形成含量較大的主峰及高度重復(fù)序列小峰，后者又稱衛(wèi)星區(qū)帶（峰）。 ⑶高度重復(fù)序列——衛(wèi)星DNA 非洲爪蟾的18S、中間隔著不轉(zhuǎn)錄的間隔區(qū)，這些單位在DNA鏈上串聯(lián)重復(fù)約5000次。各種rRNA、tRNA ⑵中度重復(fù)序列不重復(fù)序列長約750－2000dp，相當(dāng)于一個結(jié)構(gòu)基因的長度。 2．染色體中的核酸組成 ⑴不重復(fù)序列 在核小體中DNA盤繞組蛋白八聚體核心，從而使分子收縮成1/7，200bpDNA的長度約為68nm，卻被壓縮在10nm的核小體中。八聚體在中間，DNA分子盤繞在外，而H1則在核小體的外面。染色質(zhì)的電子顯微鏡圖顯示出由核小體組成的念珠狀結(jié)構(gòu)，可以看到由一條細絲連接著的一連串直徑為10nm的球狀體。 1．染色質(zhì)和核小體 六、 Mutations：organismanyproperty(表現(xiàn)型)：(指某個特定生物體細胞內(nèi)的全部遺傳物質(zhì))。givenofgenetic(基因型)：many.usuallyEukaryoticwheresinglehavebacteria“chromosomes”,structurespackagedarecellinlargestare染色體結(jié)構(gòu) DNAinreassociationfortimeconcentrationproductisasspecieseachcharacteristicishaploidinoftotal 四.他們發(fā)現(xiàn)被感染的細菌中帶有70%的噬菌體DNA，但只帶有20%的噬菌體蛋白質(zhì)。它的頭、尾外部都有由蛋白質(zhì)組成的外殼，頭內(nèi)主要是DNA。 美國冷泉港卡內(nèi)基遺傳學(xué)實驗室科學(xué)家Hershey和他的學(xué)生Chase在1952年從事噬菌體侵染細菌的實驗。他們推測，死細菌中的某一成分棗轉(zhuǎn)化源（transforming當(dāng)他們將經(jīng)燒煮殺死的S型細菌和活的R型細菌混合再