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植物生物學(xué)實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)-生命科學(xué)學(xué)院本科基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)教學(xué)中心-文庫吧資料

2025-04-13 03:38本頁面
  

【正文】 有些植物細(xì)胞壁切向面成片狀加厚,細(xì)胞壁具彈性,不妨礙植物生長,是植物幼嫩器官的機(jī)械組織。運(yùn)輸營養(yǎng)依靠壁上篩域(篩孔成群分布形成篩域)的聯(lián)系輸導(dǎo),一般輸導(dǎo)能力較差。4.篩胞:是裸子植物和蕨類植物韌皮部內(nèi)輸導(dǎo)養(yǎng)料的組織。篩管上下輸導(dǎo)營養(yǎng)是依靠細(xì)胞間原生質(zhì)索通過篩孔相聯(lián)系和運(yùn)輸。每個(gè)篩管分子旁有1—多個(gè)伴胞。篩管是由長形管狀生活細(xì)胞組成,細(xì)胞壁纖維素加厚,當(dāng)篩管成熟時(shí)由細(xì)胞核消失的許多篩管分子縱行相連而成。3.篩管及伴胞:是被子植物韌皮部內(nèi)輸導(dǎo)同化產(chǎn)物的輸導(dǎo)組織。細(xì)胞壁木質(zhì)化增厚,并留有具緣紋孔,相互之間輸導(dǎo)水分由具緣紋孔聯(lián)系,所以輸導(dǎo)能力不如導(dǎo)管強(qiáng)。實(shí)驗(yàn)觀察:用松莖三切面石蠟切片和松莖木質(zhì)部浸介材料的觀察,來了解管胞三切面的細(xì)胞特征。浸解材料用少許水封片觀察。根據(jù)導(dǎo)管發(fā)育和側(cè)壁增厚花紋不同分為環(huán)紋、螺紋、梯紋、網(wǎng)紋和孔紋導(dǎo)管。每一個(gè)導(dǎo)管是由許多導(dǎo)管分子組成,每個(gè)導(dǎo)管分子為一個(gè)細(xì)胞,其細(xì)胞的橫壁溶解穿孔,上下連接形成貫通的管道。實(shí)驗(yàn)五 植物的組織:輸導(dǎo)組織、機(jī)械組織、分泌組織實(shí)驗(yàn)內(nèi)容和方法:一、輸導(dǎo)組織是植物體內(nèi)運(yùn)輸水分、無機(jī)鹽和各種營養(yǎng)物質(zhì)的組織。2.畫2-3個(gè)薄壁細(xì)胞詳圖。木栓層內(nèi)側(cè)有1—2層細(xì)胞扁平,細(xì)胞質(zhì)較濃,細(xì)胞核較明顯,這是木栓形成層,木栓形成層內(nèi)側(cè)是生活的薄壁細(xì)胞為栓內(nèi)層。莖最外圍幾層木栓層細(xì)胞排列緊密無胞間隙,呈放射狀。2.皮孔:先在氣孔下方位置的木栓形成層,由于額外產(chǎn)生大量的補(bǔ)充細(xì)胞,局部膨大,破裂而形成皮孔,流通空氣。(示范)3.天竹葵葉上表皮,方法同上,可觀察到多細(xì)胞表皮毛和多細(xì)胞的腺毛。2.玉米葉(單子葉植物)表皮,方法同上。表皮毛形狀因植物種類不同而多種多樣。2.氣孔:正面觀由兩個(gè)半月形保衛(wèi)細(xì)胞凹面相對形成,兩個(gè)保衛(wèi)細(xì)胞之間空隙為氣孔,保衛(wèi)細(xì)胞和氣孔統(tǒng)稱為氣孔器,保衛(wèi)細(xì)胞內(nèi)含有葉綠體。(一)初生保護(hù)組織:1.表皮:細(xì)胞特點(diǎn):細(xì)胞排列緊密無胞間隙,相互嵌合,液泡較大,不含葉綠體的生活細(xì)胞。實(shí)驗(yàn)觀察:取芹菜葉柄,做徒手橫切面,水封片或稀I-K I液染色封片觀察,掌握基本組織的共同結(jié)構(gòu)特點(diǎn)。吸收組織:根毛細(xì)胞是具有吸收水分和養(yǎng)料功能的吸收組織。貯藏組織:主要在種子、果實(shí)和塊根、塊莖內(nèi)大量存在。它們共同特點(diǎn),細(xì)胞壁薄,有胞間隙,液泡大,體積比分生組織細(xì)胞大,具有潛在的分裂能力的生活細(xì)胞。最外方幾層排列規(guī)則的方形細(xì)胞,這些細(xì)胞由內(nèi)層向外層原生質(zhì)體逐漸消失,細(xì)胞壁逐漸栓質(zhì)化,最后變成死細(xì)胞,稱木栓細(xì)胞;在木栓層內(nèi)有1—2層扁平狀、體積較小、核較明顯、細(xì)胞質(zhì)較濃的細(xì)胞是木栓形成層。1.形成層:觀察椴樹莖橫切面石蠟切片,在次生木質(zhì)部和次生韌皮部之間,有23層(形成層帶)排列緊密,細(xì)胞核較大,原生質(zhì)較濃的扁平細(xì)胞即為形成層的細(xì)胞。側(cè)生分生組織包括形成層和木栓形成層,其細(xì)胞特點(diǎn)在橫切面上看細(xì)胞為扁平狀,細(xì)胞核相當(dāng)大,液泡化較明顯。實(shí)驗(yàn)觀察蠶豆根尖、黃楊莖尖縱切面石蠟切片。原分生組織和初生分生組織都位于器官頂端,統(tǒng)稱為頂端分生組織。在原分生組織和初生分生組織之間無明顯界限,細(xì)胞逐漸分化。這是一群由胚胎保留下來的細(xì)胞。具有細(xì)胞壁薄、細(xì)胞核大、細(xì)胞質(zhì)濃、液泡不明顯、細(xì)胞排列緊密等特點(diǎn)。同時(shí)明確各類組織形態(tài)結(jié)構(gòu)特征的不同生理分工的結(jié)果,即建立細(xì)胞結(jié)構(gòu)特點(diǎn)和生理功能相適應(yīng)的概念。四、作 業(yè)將實(shí)驗(yàn)所做細(xì)胞內(nèi)貯藏物質(zhì)和細(xì)胞壁化學(xué)成分鑒定列下表總結(jié):材料名稱鑒定物質(zhì)化學(xué)試劑反 應(yīng)實(shí)驗(yàn)四 植物的組織:分生組織,基本組織,保護(hù)組織 實(shí)驗(yàn)?zāi)康模褐参镉捎陂L期適應(yīng)環(huán)境,在植物個(gè)體發(fā)育過程中,細(xì)胞生長分化的結(jié)果形成很多細(xì)胞形態(tài)結(jié)構(gòu)基本相似,發(fā)生來源相同,并行使相同生理功能,又相互聯(lián)系的細(xì)胞群稱為植物的組織。具緣紋孔:觀察松莖三切面石蠟切片。三、紋孔和胞間連絲的觀察:紋孔:在植物生長過程中細(xì)胞壁并不均勻增厚,而有許多不加厚部分,這些不加厚部分在相鄰兩個(gè)細(xì)胞間形成一對凹穴稱為紋孔對。木質(zhì)素的化學(xué)鑒定:取丁香莖,去掉樹皮,徒手橫切面,選取最薄的材料置載玻片上,先加一滴間苯三酚,然后再加一滴25%HCL,封片觀察木質(zhì)化的細(xì)胞壁被染成玫瑰紅色。栓質(zhì)的化學(xué)鑒定:丁香莖或楊樹莖,徒手橫切面,材料置于載玻片之上,用蘇丹Ⅲ液染15-30分鐘,用水沖去染料,再用水封片觀察莖最外面幾層細(xì)胞的細(xì)胞壁被染成桔紅色。角質(zhì)的化學(xué)鑒定:取橡皮樹葉做徒手切片,置于載玻片上,加蘇丹Ⅲ液染色15-30分鐘,然后用水洗去染料,再用水封片觀察,葉最外邊表皮細(xì)胞的角質(zhì)膜被染成桔紅色。增加了細(xì)胞壁的不透水性。(示范)4.細(xì)胞壁性質(zhì)變化的觀察鑒定:有些植物細(xì)胞在生長過程中細(xì)胞壁內(nèi)由于滲入角質(zhì)、栓質(zhì)(均為脂肪物質(zhì))和木質(zhì)素(苯基丙烷聚合物)物質(zhì),使細(xì)胞壁發(fā)生角質(zhì)化、栓質(zhì)化、木質(zhì)化的變化過程。3.初生壁和次生壁纖維的鑒定:取脫脂棉少許置載玻片上,加一滴碘氯化鋅液,染色30分鐘,再封片觀察,纖維素被染成藍(lán)色。次生壁是有些植物細(xì)胞停止生長以后,在初生壁內(nèi)側(cè)繼續(xù)積累壁物質(zhì)形成。用水沖去染料封片觀察,可看到相鄰兩個(gè)細(xì)胞壁中間有一條紅線,這就是中層。1.中層:主要成分為果膠質(zhì),具粘性和彈性。二、細(xì)胞壁的結(jié)構(gòu)和成分鑒定:細(xì)胞壁為植物細(xì)胞所特有的結(jié)構(gòu),包圍在原生質(zhì)體外方,由原生質(zhì)體分泌產(chǎn)物形成。脂肪:多為油滴狀態(tài)分布在某些植物種子子葉或胚乳細(xì)胞質(zhì)中。取浸泡過的玉米種子做徒手切片,滴一滴IKI液封片觀察。取蓖麻種子胚乳石蠟制片觀察,可看到近于球形染成紅色顆粒即為糊粉粒,它的外面包被一層膜,內(nèi)充滿有無定形膠質(zhì)包埋著擬晶體和無定數(shù)的球晶體。淀粉粒+IKI溶液→藍(lán)色反應(yīng)。另外取燕麥種子壓碎后用蒸餾水(以下蒸餾水略為水)封片。1.淀粉:植物細(xì)胞中貯藏淀粉是以淀粉粒形式存在,分布在細(xì)胞質(zhì)中,不同植物淀粉粒形態(tài)大小都不相同。實(shí)驗(yàn)三 植物細(xì)胞內(nèi)貯藏物質(zhì)和細(xì)胞壁結(jié)構(gòu)成分的觀察鑒定實(shí)驗(yàn)?zāi)康模毫私饧?xì)胞內(nèi)貯藏物質(zhì)形態(tài)特點(diǎn)和化學(xué)鑒定方法,了解細(xì)胞壁的基本結(jié)構(gòu)特點(diǎn),并用化學(xué)方法鑒定細(xì)胞壁的不同成分。如實(shí)驗(yàn)材料柔軟、細(xì)?。ㄈ缬兹~、幼根)難以用手指夾住切時(shí),可用輔助材料,如向日葵莖髓、蘿卜根、馬鈴薯塊莖切成切片前,先將要切的新鮮材料浸入水中,將刀片醮水增加刀片光滑,再切材料,切片時(shí)選取浸入水中材料,夾在左手拇指和食指之間,使材料保持豎直,切面要平坦,再用右手拇指和食指持刀片,刀刃要鋒利,切時(shí)刀口向內(nèi)平行置于材料平面,手腕穩(wěn)定不動(dòng),而用胳膊滑動(dòng),由刀尾向刀頭移動(dòng)切下材料厚薄均勻,切忌切斜。(2)單晶、復(fù)晶體:秋海棠葉柄橫切,蒸餾水封片觀察(3)鐘乳體:橡皮樹葉橫切,蒸餾水封片觀察三、作 業(yè)1.植物細(xì)胞三種質(zhì)體各有何形態(tài)結(jié)構(gòu)特點(diǎn)和生理功能?三者相互關(guān)系如何?2.如何區(qū)別花青素和有色體?3.繪紫鴨趾草葉表皮細(xì)胞圖,示白色體和氣孔保衛(wèi)細(xì)胞內(nèi)葉綠體。2.晶體:液泡內(nèi)含有各種鹽類,其中草酸鈣和碳酸鈣晶體常見。二、液泡的觀察:1.花青素:是溶于液泡中,無一定形態(tài)結(jié)構(gòu)的液態(tài)色素,其顏色和細(xì)胞內(nèi)液泡的酸堿度有關(guān)。一般存在于植物的花、果實(shí)、根等器官的細(xì)胞內(nèi),呈現(xiàn)紅、桔紅、黃色。葉表皮氣孔的保衛(wèi)細(xì)胞(兩個(gè)半月形凹面相對)內(nèi)綠色小顆粒即為葉綠體。實(shí)驗(yàn)材料是紫鴨趾草葉,用鑷子撕取鴨趾草葉近中脈下表皮一小塊,用蒸餾水封片觀察。植物器官葉子和幼莖中分布有葉綠體。實(shí)驗(yàn)內(nèi)容和方法:一、質(zhì)體的觀察:質(zhì)體是植物細(xì)胞特有的細(xì)胞器,也是在光學(xué)顯微鏡下所能觀察到的細(xì)胞器。③材料各部分置于同一個(gè)平面上。按要求備好的實(shí)驗(yàn)材料切片應(yīng)具備以下條件:①創(chuàng)造最好的光學(xué)環(huán)境條件。水量不足,留有空氣,水量多余,蓋玻片浮動(dòng),水分溢出。用解剖針、鑷子移至載玻片水滴中,左手拇指和食指沿窄面夾住載玻片,右手用鑷子輕輕夾起蓋玻片,以其一邊緩緩蓋下,注意勿急促過猛產(chǎn)生氣泡。附二、封片方法:首先備好清潔干燥的載玻片和蓋玻片,用凈水沖洗再用干凈紗布擦拭,擦拭蓋玻片須十分注意,否則易打碎,將紗布疊兩層,蓋玻片夾其中間,右手拇指和食指輕輕夾住,左手輔助,小心的旋轉(zhuǎn)移動(dòng)擦凈。4.植物學(xué)繪圖常分詳圖和輪廓圖二種,一般結(jié)構(gòu)比較簡單的如表皮細(xì)胞構(gòu)造繪詳圖。3.繪植物圖要求各部分只用線條和點(diǎn)表示,絕不允許用涂抹方法表示。2.掌握所繪圖中各部分比例,力求真實(shí)反映觀察到的材料。左側(cè)畫圖,圖右側(cè)平行引線注明結(jié)構(gòu)名稱,圖的下邊注明所用植物材料的名稱和取材部位。因此,繪圖必須把實(shí)驗(yàn)材料觀察清楚,選出典型部位后再畫。思考題:1.使用顯微鏡怎樣對光,應(yīng)特別注意哪些方面?為什么?2.使用高倍鏡為什么必須用細(xì)調(diào)節(jié)器調(diào)焦距?3.聚光器有何用處?怎樣使用?附一、植物繪圖方法研究植物的內(nèi)部結(jié)構(gòu),常用繪圖方法,正確記載顯微鏡下看到的實(shí)況,可幫助我們學(xué)習(xí)和記憶。確定目鏡測微尺的格值后,去掉臺(tái)式測微尺,把需觀察的樣品制片,置載物臺(tái)上,即可用目鏡測微尺測量樣品實(shí)際的長度,如被測細(xì)胞直徑為目鏡測微尺2格,該細(xì)胞則為10μm。然后將目鏡測微尺放人目鏡圓筒內(nèi)的鐵圈上,觀察時(shí)可見標(biāo)尺的刻度,由于目鏡測微尺的格值(每格所代表的長度)隨物鏡放大倍數(shù)而改變,因此,使用不同放大倍數(shù)物鏡時(shí),必須用臺(tái)式測微尺與目鏡測微尺配合使用,才能確定目鏡測微尺的格值。用于計(jì)算數(shù)目和測量面積的為網(wǎng)格標(biāo)尺,由縱橫交錯(cuò)的網(wǎng)格組成。1.臺(tái)式測微尺 一種特制的載玻片,中央有一具刻度的標(biāo)尺,長1 mm 共分為100個(gè)小格, mm ,即10μm .2.目鏡測微尺 放在顯微鏡目鏡內(nèi)的一種標(biāo)尺。如若看不清結(jié)構(gòu),可將制片取下,從一側(cè)滴一滴稀碘液,從另一側(cè)用吸水紙將水吸去,再進(jìn)行觀察。2.觀察:將做好的片子放在鏡臺(tái)上,材料對準(zhǔn)鏡臺(tái)孔,選用低倍鏡觀察洋蔥鱗表皮的排列與形態(tài)。7. 歸還顯微鏡之前,做到鏡頭、鏡臂、聚光鏡、反光鏡退回原來的位置。在低倍鏡下不用聚光器,使用高倍鏡時(shí)必須熟練地配合使用聚光器。觀察完,取片前一定將鏡頭換到低倍鏡后再抽片,以防磨損鏡頭。5.低倍鏡觀察后,需要再用高倍鏡(40X)觀察時(shí),先將所要觀察材料的部位對準(zhǔn)鏡場中央。4.對焦(調(diào)焦):將制好的切片,置鏡臺(tái)上,使材料對準(zhǔn)鏡臺(tái)孔中央位置,用壓片夾固定住切片。第二步:輕輕撥動(dòng)虹彩光圈撥桿打開光圈,一邊雙眼對準(zhǔn)接目鏡觀察,一邊轉(zhuǎn)動(dòng)反光鏡,使其朝向光源,調(diào)節(jié)反光鏡角度,直至視野最為明亮呈乳白色為止。如鏡頭特別污濁,則需要用二甲苯清潔鏡頭,這時(shí)用擦鏡紙蘸二甲苯少許來擦拭鏡頭,但為了防止溶解鏡頭貼膠,用二甲苯一定要少。2.為了保持顯微鏡各部件的正常功能,要注意清潔,避免潮濕和灰塵。取鏡要右手緊握鏡臂,左手托穩(wěn)鏡座,鏡體保持垂直平衡不得震動(dòng),嚴(yán)防目鏡,反光鏡(均為插入式安裝)甩落地面和粗調(diào)節(jié)器的脫口等損傷。顯微鏡的使用包括對光和調(diào)焦兩個(gè)方面。(4)使用電源的顯微鏡無反光鏡。(3)虹彩光圈:裝在聚光器之下,由一片壓一片的鐵片制成。也是由一組透鏡組成。因?yàn)榫酃忡R的鏡口率影響物鏡的分辨力。一般情況常用平面鏡,在光線較暗的條件下可用凹面鏡取光。 反光鏡接受外來光線并反射至聚光鏡。分辨力與波長和鏡囗率()有關(guān)。也就是判別兩個(gè)物體點(diǎn)之間最短距離的本領(lǐng)。物鏡倍數(shù)愈大,焦點(diǎn)深度愈淺。③焦點(diǎn)深度:指在視野垂直范圍內(nèi)所能清晰觀察到的物體界限。物鏡的放大倍數(shù)愈大,其工作距離愈小。即前透鏡越小,鏡筒越長其放大倍數(shù)越大;反之,前透鏡越大,鏡筒越短,其放大倍數(shù)越小。倍數(shù)在4X以下,100X以上用的不多。①物鏡的放大:物鏡的放大倍數(shù)刻在鏡頭上,從10X(倍)到100X。主要功能為聚集來自標(biāo)本的光線,使物體做第一次造象。常用為10X。(光學(xué)成象原理圖略)目鏡的放大:目鏡的放大倍數(shù)通??淘谀跨R上,以5X、8X、10X等數(shù)字表示。在光闌面上可以安裝目鏡測微尺和用眼睫毛或嬰兒發(fā)絲制成目鏡指針,便于指示鏡場中觀察材料的位置。上面一塊與眼球接觸的叫接目透鏡;下面一塊靠近視野的叫會(huì)聚透鏡(或叫視野透鏡)。2.光學(xué)系統(tǒng)部分:顯微鏡的光學(xué)系統(tǒng)包括目鏡、物鏡和照明裝置三個(gè)部分。(9)鏡筒是連接目鏡和物鏡的不透光金屬園筒,鏡筒下端具固定的螺絲。(8)棱鏡室 固定在鏡臂前方,鏡筒與轉(zhuǎn)換器之間。(7)物鏡轉(zhuǎn)換器(物鏡轉(zhuǎn)換盤) 位于鏡筒下端,其上安裝物鏡。旋轉(zhuǎn)粗調(diào)節(jié)器可使鏡筒上下升降,調(diào)節(jié)焦距。(5)鏡臂 直立于鏡座后側(cè),是顯微鏡的脊梁,所有機(jī)械裝置都直接或間接地附在其上。中央具通過光線的鏡臺(tái)孔,上具固定標(biāo)本的彈簧夾子和二個(gè)螺絲可移動(dòng)載物臺(tái)位置。(4)載物臺(tái)(鏡臺(tái))載物臺(tái)供移動(dòng)鏡檢材料之用。它上面固定著聚光器、鏡臂、載物臺(tái)、照明裝置等。具一定形狀,如馬蹄形、橢圓形、三角形等。機(jī)械裝置部分:(1)鏡座 為顯微鏡的底座。我們實(shí)驗(yàn)課用的是光學(xué)顯微鏡中最常用的復(fù)式顯微鏡。植物實(shí)驗(yàn)課首先必須掌握顯微鏡的原理和使用方法。三、 通過觀察植物細(xì)胞,基本掌握顯微鏡的使用方法。(四)其他:石棉網(wǎng)、三角鐵架、電爐、毛筆、鉛筆、紗布、擦鏡紙、濾紙、標(biāo)簽、橡皮筋、透明膠帶、毛巾、洗衣粉、火柴、瓶刷等。(二)常用玻璃器皿:培養(yǎng)皿、滴瓶及滴管(少量為棕色)、燒杯、樹膠瓶、標(biāo)本瓶、酒精燈、量筒、玻棒、載玻片、蓋玻片、表面皿??刹捎靡吧蛟耘嘀参?,還可以適當(dāng)?shù)脑跍厥一蜿柵_(tái)上培養(yǎng)一些植物,以保證供應(yīng)新鮮實(shí)驗(yàn)材料。有些葉、花、花序也可壓制成臘葉標(biāo)本,裝訂在臺(tái)紙上,外面再用塑料薄膜套好加以保護(hù)。(二)風(fēng)干標(biāo)本風(fēng)干標(biāo)本供形態(tài)分析用。為防止材料變脆,可加入少量甘油。一般采用防腐保存法。(一)防腐液浸制標(biāo)本浸制標(biāo)本供形態(tài)解剖觀察用。注意:升汞有劇毒,不要弄到手上,消毒后注意洗手。用于擦拭顯微鏡鏡頭上的油跡和污垢等(注意:瓶口必須塞緊,以免揮發(fā))。2.硝酸一氯化鉀離析液配方:硝酸5 ml與1 g 氯化鉀,加熱5min,即可將木材離析。離析液種類很多,現(xiàn)介紹最常用的兩種1.鉻酸一硝酸離析液配方:10% 鉻酸液+10% 硝酸液,等量混合而成。2.對二氯代苯飽和水溶液 將對二氯代苯加入蒸餾水中攪拌至不再溶解為止,即成飽和水溶液。(九)預(yù)處理液用于根尖壓片的前處理,能使細(xì)胞有絲分裂染色體
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