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植物生物學(xué)實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)-生命科學(xué)學(xué)院本科基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)教學(xué)中心(更新版)

  

【正文】 的環(huán)紋和螺紋導(dǎo)管組成的原生木質(zhì)部。根的吸收能力最強(qiáng)的部位是伸長(zhǎng)區(qū)與根毛區(qū)。四、作 業(yè)1.畫(huà)木質(zhì)部1—2個(gè)導(dǎo)管橫切面圖,浸解材料中1—2個(gè)導(dǎo)管、管胞的立體圖;2.畫(huà)韌皮部1—2個(gè)篩管與伴胞的橫、縱切面圖;3.比較三種機(jī)械組織的細(xì)胞特點(diǎn)和生理功能。分泌組織分泌樹(shù)脂、揮發(fā)油、橡膠、乳汁等物質(zhì)。葉柄橫切面外圍棱角部位表皮細(xì)胞內(nèi)側(cè)見(jiàn)到成堆的灰白色細(xì)胞群,再在高倍鏡下詳細(xì)觀察,可見(jiàn)到細(xì)胞角隅纖維素加厚較明亮,細(xì)胞腔較暗,而且可以見(jiàn)到相鄰細(xì)胞之間有中膠層。篩管上下輸導(dǎo)營(yíng)養(yǎng)是依靠細(xì)胞間原生質(zhì)索通過(guò)篩孔相聯(lián)系和運(yùn)輸。細(xì)胞壁木質(zhì)化增厚,并留有具緣紋孔,相互之間輸導(dǎo)水分由具緣紋孔聯(lián)系,所以輸導(dǎo)能力不如導(dǎo)管強(qiáng)。每一個(gè)導(dǎo)管是由許多導(dǎo)管分子組成,每個(gè)導(dǎo)管分子為一個(gè)細(xì)胞,其細(xì)胞的橫壁溶解穿孔,上下連接形成貫通的管道。莖最外圍幾層木栓層細(xì)胞排列緊密無(wú)胞間隙,呈放射狀。表皮毛形狀因植物種類(lèi)不同而多種多樣。吸收組織:根毛細(xì)胞是具有吸收水分和養(yǎng)料功能的吸收組織。1.形成層:觀察椴樹(shù)莖橫切面石蠟切片,在次生木質(zhì)部和次生韌皮部之間,有23層(形成層帶)排列緊密,細(xì)胞核較大,原生質(zhì)較濃的扁平細(xì)胞即為形成層的細(xì)胞。在原分生組織和初生分生組織之間無(wú)明顯界限,細(xì)胞逐漸分化。四、作 業(yè)將實(shí)驗(yàn)所做細(xì)胞內(nèi)貯藏物質(zhì)和細(xì)胞壁化學(xué)成分鑒定列下表總結(jié):材料名稱(chēng)鑒定物質(zhì)化學(xué)試劑反 應(yīng)實(shí)驗(yàn)四 植物的組織:分生組織,基本組織,保護(hù)組織 實(shí)驗(yàn)?zāi)康模褐参镉捎陂L(zhǎng)期適應(yīng)環(huán)境,在植物個(gè)體發(fā)育過(guò)程中,細(xì)胞生長(zhǎng)分化的結(jié)果形成很多細(xì)胞形態(tài)結(jié)構(gòu)基本相似,發(fā)生來(lái)源相同,并行使相同生理功能,又相互聯(lián)系的細(xì)胞群稱(chēng)為植物的組織。栓質(zhì)的化學(xué)鑒定:丁香莖或楊樹(shù)莖,徒手橫切面,材料置于載玻片之上,用蘇丹Ⅲ液染15-30分鐘,用水沖去染料,再用水封片觀察莖最外面幾層細(xì)胞的細(xì)胞壁被染成桔紅色。3.初生壁和次生壁纖維的鑒定:取脫脂棉少許置載玻片上,加一滴碘氯化鋅液,染色30分鐘,再封片觀察,纖維素被染成藍(lán)色。二、細(xì)胞壁的結(jié)構(gòu)和成分鑒定:細(xì)胞壁為植物細(xì)胞所特有的結(jié)構(gòu),包圍在原生質(zhì)體外方,由原生質(zhì)體分泌產(chǎn)物形成。淀粉粒+IKI溶液→藍(lán)色反應(yīng)。如實(shí)驗(yàn)材料柔軟、細(xì)?。ㄈ缬兹~、幼根)難以用手指夾住切時(shí),可用輔助材料,如向日葵莖髓、蘿卜根、馬鈴薯塊莖切成二、液泡的觀察:1.花青素:是溶于液泡中,無(wú)一定形態(tài)結(jié)構(gòu)的液態(tài)色素,其顏色和細(xì)胞內(nèi)液泡的酸堿度有關(guān)。植物器官葉子和幼莖中分布有葉綠體。水量不足,留有空氣,水量多余,蓋玻片浮動(dòng),水分溢出。3.繪植物圖要求各部分只用線條和點(diǎn)表示,絕不允許用涂抹方法表示。思考題:1.使用顯微鏡怎樣對(duì)光,應(yīng)特別注意哪些方面?為什么?2.使用高倍鏡為什么必須用細(xì)調(diào)節(jié)器調(diào)焦距?3.聚光器有何用處?怎樣使用?附一、植物繪圖方法研究植物的內(nèi)部結(jié)構(gòu),常用繪圖方法,正確記載顯微鏡下看到的實(shí)況,可幫助我們學(xué)習(xí)和記憶。1.臺(tái)式測(cè)微尺 一種特制的載玻片,中央有一具刻度的標(biāo)尺,長(zhǎng)1 mm 共分為100個(gè)小格, mm ,即10μm .2.目鏡測(cè)微尺 放在顯微鏡目鏡內(nèi)的一種標(biāo)尺。在低倍鏡下不用聚光器,使用高倍鏡時(shí)必須熟練地配合使用聚光器。第二步:輕輕撥動(dòng)虹彩光圈撥桿打開(kāi)光圈,一邊雙眼對(duì)準(zhǔn)接目鏡觀察,一邊轉(zhuǎn)動(dòng)反光鏡,使其朝向光源,調(diào)節(jié)反光鏡角度,直至視野最為明亮呈乳白色為止。顯微鏡的使用包括對(duì)光和調(diào)焦兩個(gè)方面。因?yàn)榫酃忡R的鏡口率影響物鏡的分辨力。也就是判別兩個(gè)物體點(diǎn)之間最短距離的本領(lǐng)。即前透鏡越小,鏡筒越長(zhǎng)其放大倍數(shù)越大;反之,前透鏡越大,鏡筒越短,其放大倍數(shù)越小。常用為10X。2.光學(xué)系統(tǒng)部分:顯微鏡的光學(xué)系統(tǒng)包括目鏡、物鏡和照明裝置三個(gè)部分。旋轉(zhuǎn)粗調(diào)節(jié)器可使鏡筒上下升降,調(diào)節(jié)焦距。它上面固定著聚光器、鏡臂、載物臺(tái)、照明裝置等。植物實(shí)驗(yàn)課首先必須掌握顯微鏡的原理和使用方法??刹捎靡吧蛟耘嘀参铮€可以適當(dāng)?shù)脑跍厥一蜿?yáng)臺(tái)上培養(yǎng)一些植物,以保證供應(yīng)新鮮實(shí)驗(yàn)材料。一般采用防腐保存法。2.硝酸一氯化鉀離析液配方:硝酸5 ml與1 g 氯化鉀,加熱5min,即可將木材離析。各種材料最合適的時(shí)間有差別,一般來(lái)說(shuō),大染色體材料水解時(shí)間可較長(zhǎng),小染色體材料宜短。配制時(shí)絕不可加熱,否則膠變成深褐色,影響觀察,同時(shí)樹(shù)膠受熱易酸化,可在膠內(nèi)加入少量大理石(碳酸鈣)以中和之。(六)粘貼劑1.明膠粘貼劑配方:明膠(Gelatine)1g;石炭酸(苯酚)2g;蒸餾水100 ml ;甘油 15 ml。有極快的滲透力,根尖材料固定15—20min即可,花藥則需1h左右,此液固定最多不超過(guò)24h,固定后用95%酒精沖洗至不含冰醋酸為止;如果材料不馬上用,需轉(zhuǎn)入70%酒精中保存??砂聪铝泄酵扑?表1—2)。它是很強(qiáng)的細(xì)胞核染料,而且可以分化出不同顏色。配方:間苯三酚5 g;95%酒精100 ml (注意此溶液呈黃褐色即失效)11.橘紅G(Orange G)酒精溶液 為酸性染料,染細(xì)胞質(zhì),常作二重或三重染色用。6.曙紅Y(伊紅,Eosin Y)酒精溶液 常與蘇木精對(duì)染,能使細(xì)胞質(zhì)染成淺紅色,起襯染作用。原液B:取原液A 10 ml加入到90 ml 5%石炭酸水溶液中。為了節(jié)約最好不越級(jí)使用。洗滌方法:,刷洗,清水沖凈晾干;,清水沖凈,蒸餾水蕩滌,晾干。對(duì)于經(jīng)自己努力解決不了的問(wèn)題,應(yīng)請(qǐng)指導(dǎo)教師幫助。室內(nèi)禁止吸煙,不準(zhǔn)隨地吐痰和亂扔紙屑、雜物。二、實(shí)驗(yàn)室規(guī)則實(shí)驗(yàn)室規(guī)則是維護(hù)正常教學(xué)秩序和培養(yǎng)學(xué)生嚴(yán)謹(jǐn)學(xué)風(fēng)的重要保證,師生都必須嚴(yán)格遵守。使用后要擦拭整理,放回原處。5.最后離開(kāi)實(shí)驗(yàn)室的學(xué)生要負(fù)責(zé)檢查水、電、門(mén)、窗等是否關(guān)嚴(yán)。5.按時(shí)完成實(shí)驗(yàn)作業(yè)。(四)鉻酸洗滌液配法重鉻酸鉀(K 2Cr2O 2)20g,濃硫酸(H2S04,工業(yè)用,比重1.84)或廢硫酸100 ml,清水100 m1。配方:蘇丹Ⅲ或蘇丹Ⅳ;95%酒精10 m1;過(guò)濾后再加入10 ml甘油3.1%醋酸洋紅(Aceto carmine) 酸性染料,適用于壓碎涂抹制片,能使染色體染成深紅色,細(xì)胞質(zhì)成淺紅色。染色液:取C液10—20 m1,加45%冰醋酸80~90 ml, g,配成10%~20%濃度的石炭酸品紅液,放置兩周后使用,效果顯著(若立即用,則著色能力差)。7.釕紅(Ruthenium red)染液 釕紅是細(xì)胞胞間層專(zhuān)性染料,其配后不易保存,應(yīng)現(xiàn)用現(xiàn)配。配方:(1)番紅水溶液 番紅1 g;蒸餾水100 ml(2)番紅酒精溶液 番紅1 g;50%(或95%)酒精100 ml(3)苯胺番紅酒精染色液甲液 番紅5 g , 95%酒精50 ml; 乙液 苯胺20 ml, 蒸餾水450 m1.將甲、乙二溶液混合后充分搖均勻,過(guò)濾后使用。(2)加入蒸餾水,塞緊瓶口,置冰箱中可長(zhǎng)期保存。在植物形態(tài)解剖研究上應(yīng)用極廣,此固定液最大優(yōu)點(diǎn)是兼有保存劑作用,但對(duì)染色體的觀察效果較差。為了避免材料收縮,應(yīng)采取逐步從純酒精過(guò)渡到二甲苯中。用玻璃棒(清潔的)充分?jǐn)嚢璩膳菽瓲?,然后用粗濾紙或雙層紗布過(guò)濾到量筒中,經(jīng)一晝夜(或更長(zhǎng))能濾出透明蛋白液,再加入等量甘油及少量防腐劑(如樟腦等)振蕩使其完全混合后即可應(yīng)用。用時(shí)取一小部分微熱,融化。1. mol/L 8—羥基奎林水溶液 8—羥基奎林溶于1000 m1蒸餾水中。(十二)標(biāo)本消毒劑用于臘葉標(biāo)本消毒,常用0.4%升汞酒精溶液(95%酒精1 000ml+4g升汞),~2min。浸泡材料多保存在廣口瓶中,注意扭緊瓶蓋,以防止保存液揮發(fā),并即時(shí)貼好標(biāo)簽備用。(三)常用工具:解剖針、鑷子、剪刀、刀片、枝剪、手鏟、采集箱。(一)顯微鏡的結(jié)構(gòu)和性能:顯微鏡的結(jié)構(gòu)包括機(jī)械裝置部分和光學(xué)系統(tǒng)部分。形狀有圓形或方形等。通過(guò)轉(zhuǎn)動(dòng)來(lái)轉(zhuǎn)換不同倍數(shù)的物鏡。在兩塊透鏡的中間裝有一個(gè)用金屬制成的光闌,光闌邊緣即為顯微鏡最后的成像面。物鏡為消除單透鏡的色差(色相差)和球差而由幾組透鏡組成,前端透鏡叫前透鏡,后端的叫后透鏡。切記使用高倍鏡時(shí)細(xì)心配焦,防止壓片而損壞鏡頭。3.照明裝置(1)反光鏡:在聚光器的下方,是一個(gè)雙面鏡子,一面為凹面,另一面為平面,一般為插入式安裝,易脫落甩出。聚光鏡靠螺旋裝置(調(diào)節(jié)器)使其上下移動(dòng)。將顯微鏡放置離桌邊10公分處,鏡臂對(duì)準(zhǔn)胸前。使用粗調(diào)節(jié)器將載物臺(tái)徐徐向上(低于9mm工作距離)此時(shí)從左側(cè)觀看鏡頭切勿接近切片,接著雙眼觀目鏡,轉(zhuǎn)動(dòng)粗調(diào)節(jié)器,緩緩提升或下降載物臺(tái),直至觀察到清晰物象為止。三、觀察植物生活細(xì)胞的基本構(gòu)造1.方法:洋蔥用解剖刀切開(kāi),取一片新鮮的鱗片葉,在上表皮(凹面)用刀片輕輕劃23mm的小方塊,然后用鑷子輕輕將小方塊表皮撕下,迅速放入事先滴好蒸餾水的載玻片上,再用鑷子挾起蓋玻片,先使蓋玻片的一側(cè)與載玻片接觸,再將另一側(cè)慢慢放下,這樣可以趕走空氣,以防封片時(shí)封入氣泡,再用吸水紙吸去多余的水,以備觀察。3.長(zhǎng)度測(cè)量法 先把臺(tái)式測(cè)微尺置顯微鏡的載物臺(tái)上,調(diào)節(jié)焦距直到可以清晰看到標(biāo)尺的刻度。1.繪圖紙上的布局:在繪圖紙上邊寫(xiě)明本次實(shí)驗(yàn)內(nèi)容標(biāo)題。如果僅要求把器官結(jié)構(gòu)特點(diǎn)繪出來(lái),如繪結(jié)構(gòu)復(fù)雜的木本植物莖橫切面時(shí)可用線繪出輪廓圖。②材料不干縮。表皮細(xì)胞核周?chē)性S多白色透明的小顆粒即為白色體。(1)針晶體:紫鴨趾草莖做徒手縱切片,蒸餾水封片觀察,可見(jiàn)到多束針狀晶體。實(shí)驗(yàn)內(nèi)容和方法:一、貯藏物質(zhì)的觀察和化學(xué)鑒定:觀察淀粉、蛋白質(zhì)、脂肪三種主要的貯藏物質(zhì)的形態(tài)結(jié)構(gòu)及分布,并用化學(xué)方法加以鑒定。蛋白質(zhì)+IKI→黃色反應(yīng)。用鑷子撕取洋蔥鱗片葉內(nèi)表皮一塊,用釕紅液染色5-10分鐘。(1)角質(zhì)化:常在表皮細(xì)胞的外壁滲入或沉積角質(zhì)形成角質(zhì)膜。封片時(shí)注意擦干凈切片外溢出的HCL,以防止腐蝕鏡頭。實(shí)驗(yàn)內(nèi)容和方法:一、分生組織分生組織是一群分裂能力很強(qiáng)的幼年細(xì)胞,分布于根尖、莖尖等正在生長(zhǎng)的部位。頂端分生組織分裂活動(dòng)的結(jié)果,使植物器官進(jìn)行伸長(zhǎng)生長(zhǎng)。二、基本組織由薄壁細(xì)胞組成,在植物體中分布很廣,具有同化、貯藏、通氣和吸收等功能,是植物體生活中所必不可少的組織,因此叫基本組織。三、保護(hù)組織保護(hù)組織分布于植物體表面,可以控制植物蒸騰,防止過(guò)度失水、機(jī)械損傷和避免其它生物侵害。表皮細(xì)胞長(zhǎng)方形,排列規(guī)則,細(xì)胞壁鋸齒狀波浪相嵌,氣孔保衛(wèi)細(xì)胞為啞鈴形,付衛(wèi)細(xì)胞近方形。四、作業(yè)1.畫(huà)根尖或莖尖外形圖,并列出幾個(gè)細(xì)胞畫(huà)出分生組織的細(xì)胞特點(diǎn)。實(shí)驗(yàn)觀察:南瓜莖、玉米莖橫切面石蠟切片和被子植物莖木質(zhì)部的浸解材料(已用番紅染色)觀察來(lái)識(shí)別各種類(lèi)型的導(dǎo)管。實(shí)驗(yàn)觀察:南瓜莖橫縱切面石蠟切片。觀察松莖切片,篩胞是上下縱行聯(lián)接的生活細(xì)胞,原生質(zhì)較濃,旁無(wú)伴胞。實(shí)驗(yàn)觀察:洋麻莖橫切面石蠟切片,可見(jiàn)排列緊密無(wú)間隙,細(xì)胞腔大小不均勻的細(xì)胞。(二)內(nèi)分泌結(jié)構(gòu):分泌物質(zhì)積累在植物體內(nèi)(細(xì)胞或細(xì)胞間隙中),如樹(shù)脂道、分泌腔、乳汁管。觀察:小麥根尖1.根冠:位于根尖最頂端,是由許多薄壁細(xì)胞構(gòu)成帽狀結(jié)構(gòu),起著保護(hù)根尖的作用。2.皮層:表皮內(nèi)數(shù)層薄壁細(xì)胞,細(xì)胞體積較大,排列疏松。(3)初生韌皮部:位于初生木質(zhì)部束之間,由一些篩管、伴胞和薄壁細(xì)胞組成,分化也是外始式。三、根的次生結(jié)構(gòu)(一)形成層的產(chǎn)生和活動(dòng):觀察:蠶豆根的形成層產(chǎn)生。周皮的產(chǎn)生:由于形成層活動(dòng)使根加粗生長(zhǎng),表皮和皮層因內(nèi)部組織的增加受到破壞并脫落,同時(shí)根的木栓形成層由中柱鞘細(xì)胞恢復(fù)分裂能力后形成。莖尖也是由頂端分生組織組成。3.中柱:大豆莖無(wú)明顯的中柱鞘,維管束為維管柱中主要部分,許多維管束呈環(huán)狀排列。將玉米莖作為單子葉植物莖的代表,觀察比較其結(jié)構(gòu)與雙子葉植物莖結(jié)構(gòu)的不同。由于莖的形成層不斷分裂活動(dòng)產(chǎn)生次生結(jié)構(gòu)。莖的木栓形成層由表皮或外皮層的細(xì)胞恢復(fù)分裂能力產(chǎn)生。葉上表皮一般無(wú)氣孔,下表皮具較多的氣孔,或葉下表皮氣孔較上表皮多,表皮上還有表皮毛分布。觀察角質(zhì)層、復(fù)表皮、氣孔窩、氣孔、柵欄組織、海綿組織、維管束的特化程度。保衛(wèi)細(xì)胞啞鈴形,外側(cè)各有一個(gè)副衛(wèi)細(xì)胞。實(shí)驗(yàn)九 植物的繁殖實(shí)驗(yàn)?zāi)康模毫私庵参锘ǖ男螒B(tài)結(jié)構(gòu)和花序;觀察花藥和花粉粒的結(jié)構(gòu);觀察胚珠和胚囊的結(jié)構(gòu);觀察雙子葉植物和單子葉植物胚及胚乳的發(fā)育;了解種子的基本構(gòu)造、果實(shí)的結(jié)構(gòu)和類(lèi)型。如白菜、油菜、洋槐。⑥頭狀花序:也叫籃狀花序。各類(lèi)花序觀察邊桌上的標(biāo)本。4.絨氈層:位于中層內(nèi)方,為花粉囊壁最內(nèi)一層細(xì)胞,體積較大,長(zhǎng)軸與中層垂直,細(xì)胞質(zhì)濃含有豐富營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),發(fā)育早期為單核,后變?yōu)殡p核或多核。花粉內(nèi)部細(xì)胞核進(jìn)行一次有絲分裂產(chǎn)生兩個(gè)細(xì)胞,較大的一個(gè)為營(yíng)養(yǎng)細(xì)胞,小的是生殖細(xì)胞。如豆科植物。由于胚珠各部分生長(zhǎng)速度不均勻形成了不同類(lèi)型的胚珠:1.直生胚珠:胚珠形成過(guò)程中各部分生長(zhǎng)速度均勻,所以珠孔、合點(diǎn)、珠柄三者基本在一條直線上,這樣的胚珠稱(chēng)為直生胚珠。珠心表皮下近珠孔端一個(gè)細(xì)胞長(zhǎng)大稱(chēng)為孢原細(xì)胞。實(shí)驗(yàn)觀察百合、錦雞兒等子房橫切面石蠟切片。原胚進(jìn)一步分裂分化,中央分裂較慢兩側(cè)分裂快形成了兩個(gè)子葉,中央凹陷部分形成胚芽,下部形成胚軸、胚根,胚分化完成。近珠孔端的一個(gè)叫基細(xì)胞,遠(yuǎn)離珠孔端的一個(gè)叫頂細(xì)胞。(一)真果和假果:由子房形成的果實(shí)叫真果,如桃、杏。1.漿果:由1個(gè)或多個(gè)心皮形成的果實(shí),外果皮很薄,中果皮、內(nèi)果皮肉質(zhì)化。如梨、蘋(píng)果。有果皮不開(kāi)裂的如花生,也有分節(jié)狀稱(chēng)節(jié)莢如苜蓿。4.蒴果:2—多個(gè)心皮雌蕊形成果實(shí),子房一室或多室,每一室內(nèi)1—多粒種子。閉果:果實(shí)成熟后,果皮不開(kāi)裂。5.分果:2—多個(gè)心皮雌蕊。菌類(lèi)包括細(xì)菌門(mén)、粘菌門(mén)、真菌門(mén),細(xì)菌門(mén)在微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中觀察,本課主要內(nèi)容是粘菌門(mén)和真菌門(mén)。無(wú)性生殖可產(chǎn)生各種無(wú)性孢子,如芽孢子、孢囊孢子、分生孢子、游動(dòng)孢子,有性生殖可產(chǎn)生性孢子,如卵孢子、接合孢子、子囊孢子、擔(dān)孢子。營(yíng)養(yǎng)菌絲在培養(yǎng)基物上反復(fù)分枝密布,并發(fā)生一些弧形的匍匐菌絲。3.子囊菌亞門(mén)Asycotina菌絲有分隔,生活史中單核菌絲占優(yōu)勢(shì),無(wú)性生殖產(chǎn)生芽孢子、分生孢子,有性生殖產(chǎn)生雙核菌絲,由單核菌絲和雙核菌組成子囊果,一次性接合只產(chǎn)生一個(gè)子囊果,子囊果可分為閉囊殼、子囊殼、子囊盤(pán),由子囊果內(nèi)的子實(shí)層產(chǎn)生子
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