【正文】 縮短。各種材料最合適的時間有差別，一般來說，大染色體材料水解時間可較長，小染色體材料宜短。(八)解離液常用于根尖等細胞的涂片，它能使細胞壁中層(果膠質(zhì))溶解，而使細胞分開。3．乳酸甘油 此封藏劑適用于整體封藏，如藻、蕨原葉體及其他小材料封藏都可適用。2．甘油膠 優(yōu)質(zhì)白明膠1g，溶于6 ml蒸餾水中(40～50℃)，加7 ml甘油后，滴人2—3滴石炭酸防腐，過濾，可長期貯存。配制時絕不可加熱，否則膠變成深褐色，影響觀察，同時樹膠受熱易酸化，可在膠內(nèi)加入少量大理石(碳酸鈣)以中和之。將樹膠溶人二甲苯即配成。不用時需放低溫干燥處(如冰箱中)保存，可長期使用。2．蛋清甘油 將雞蛋一端打開一個小孔，只讓蛋白慢慢流人燒杯內(nèi)。(六)粘貼劑1．明膠粘貼劑配方：明膠(Gelatine)1g；石炭酸(苯酚)2g；蒸餾水100 ml ；甘油 15 ml。由于氯仿能破壞染色，因此染色后不宜用氯仿作透明劑。即無水酒精→1/2無水酒精+1/2二甲苯→二甲苯。常用的透明劑有以下兩種：1．二甲苯(Xylol) 是目前應(yīng)用最廣的透明劑，它作用迅速，能與酒精混合，溶解石蠟，又可與封藏用的樹膠混合，但使用時必須脫凈水分，否則發(fā)生乳狀混濁。有極快的滲透力，根尖材料固定15—20min即可，花藥則需1h左右，此液固定最多不超過24h，固定后用95％酒精沖洗至不含冰醋酸為止；如果材料不馬上用，需轉(zhuǎn)入70％酒精中保存。．A好。配方：福爾馬林(38％甲醛)5 ml： 冰醋酸5ml：70％酒精90 ml幼嫩材料用50％酒精代替70％酒精，可防止材料收縮；還可加入5 ml甘油(丙三醇)以防蒸發(fā)和材料變硬。適用于一般根、莖、葉、花藥、子房組織切片?？砂聪铝泄酵扑?表1—2)。(三)各級酒精(脫水劑)配制由于無水酒精價格較高，故常用95％的酒精配制。切片需先經(jīng)甲液媒染，并充分水洗后才能以乙液染色，染色后經(jīng)水稍洗再用另一瓶甲液分色至適度。配方：甲液(媒染劑)，硫酸鐵銨（鐵礬）２～４g， 蒸餾水100 ml.　　　　　 必須保持新鮮，最好臨用之前配制 乙液(染色劑)，蘇木精 g，95％酒精 10 ml，蒸餾水 100 ml.配制步驟：(1)將蘇木精溶于酒精中，瓶口用雙層紗布包扎，使其充分氧化(通常在室內(nèi)放置兩個月后方可使用)。它是很強的細胞核染料，而且可以分化出不同顏色。配方：(1)固綠酒精液 固綠1 g； 95％酒精100 ml(2)苯胺固綠酒精液 固綠 1 g, 95％酒精40 ml,苯胺10 ml配后充分搖勻，過濾后使用。13．固綠(Fast green) 又名快綠溶液。并能與固綠、苯胺蘭等作雙重染色，與橘紅G、結(jié)晶紫作三重染色。配方：間苯三酚5 g；95％酒精100 ml (注意此溶液呈黃褐色即失效)11．橘紅G(Orange G)酒精溶液 為酸性染料，染細胞質(zhì)，常作二重或三重染色用。還多用于與真曙紅作雙重染色，對于高等植物多用于與番紅作雙重染色。配方：釕紅5—10 mg； 蒸餾水25—50ml8．龍膽紫(Gentian violet) 為酸性染料，適用于細菌涂抹制片。 95％酒清100 ml .(也常用于95％酒精脫水時，加入少量曙紅溶液，其目的是在包埋、切片、展片、鏡檢時便于識別材料)。6．曙紅Y(伊紅，Eosin Y)酒精溶液 常與蘇木精對染，能使細胞質(zhì)染成淺紅色，起襯染作用。5. 中性紅(Neutral red)溶液 用于染細胞中的液泡，可鑒定細胞死活。適用范圍：適用于植物組織壓片法和涂片法，染色體著色深，保存性好，使用2—3年不變質(zhì)。(原液A和原液C可長期保存，原液B限兩周內(nèi)使用)。原液B：取原液A 10 ml加入到90 ml 5％石炭酸水溶液中。配制步驟： 先配成三種原液，再配成染色液。配方：洋紅1 g； 45％醋酸100 m1煮沸2h左右，并隨時注意補充加入蒸餾水到原含量，然后冷卻過濾，加入4％鐵明礬溶液1～2滴(不能多加，否則會發(fā)生沉淀)，放人棕色瓶中備用。2．蘇丹Ⅲ(Sudan?、?或 Ⅳ) 能使木栓化、角質(zhì)化的細胞壁及脂肪、揮發(fā)油、樹脂等染成紅色或橙紅色。為了節(jié)約最好不越級使用。二、常用實驗藥劑配制(一)藥品的規(guī)格(表1—1)(二)染色液1．碘一碘化鉀(I—KI)(Iodine potassium iodide)溶液能將淀粉染成藍紫色，蛋白質(zhì)染成黃色，也是植物組織化學測定的重要試劑。先將重鉻酸鉀溶于溫水，冷卻后徐徐加入濃硫酸以不使其發(fā)熱。(三)舊玻片、封膠玻片清洗在洗衣粉水中煮沸15min除去樹膠和臟物，或浸入廢二甲苯中脫膠，分開載、蓋玻片，清水沖凈，清水沖凈，蒸餾水蕩滌，置于95％酒精的玻缸中浸泡加蓋備用。洗滌方法：，刷洗，清水沖凈晾干；，清水沖凈，蒸餾水蕩滌，晾干。 目 錄緒 論植物生物學實驗室一般操作和常用藥品基礎(chǔ)實驗實驗一、顯微鏡的構(gòu)造和使用方法,植物生活細胞的基本結(jié)構(gòu)實驗二、植物細胞內(nèi)質(zhì)體和液泡的觀察實驗三、植物細胞內(nèi)儲藏物質(zhì)和細胞壁結(jié)構(gòu)成分的觀察鑒定實驗四、植物的組織：分生組織、基本組織、保護組織實驗五、植物的組織：輸導(dǎo)組織、機械組織、分泌組織實驗六、植物的根： 初生結(jié)構(gòu)和次生結(jié)構(gòu)實驗七、植物的莖： 初生結(jié)構(gòu)和次生結(jié)構(gòu)實驗八、植物的葉： 中生葉、旱生葉和水生葉實驗九、植物的繁殖： 雄蕊、雌蕊、胚和胚乳的發(fā)育實驗十、菌類和地衣植物： 鞭毛菌、接合菌、子囊菌、擔子菌、地衣實驗十一、苔蘚植物： 苔綱和蘚綱實驗十二、蕨類植物： 松葉蕨、石松、木賊、真蕨實驗十三、裸子植物： 蘇鐵、銀杏、松柏、買麻藤實驗十四、被子植物：（木蘭亞綱、金縷梅亞綱、石竹亞綱）實驗十五、被子植物：（五椏果亞綱、薔薇亞綱）實驗十六、被子植物：（薔薇亞綱）實驗十七、被子植物：（菊亞綱）實驗十八、被子植物：（鴨跖草亞綱、百合亞綱）綜合實驗實驗一 植物形態(tài)解剖基本技能的綜合訓練徒手切片法、石蠟制片法實驗二、湖泊藻類植物觀察實驗三、種子植物系統(tǒng)分類研究法附錄I 中國珍惜瀕危植物名錄（部分）附錄II 內(nèi)蒙古珍惜瀕危植物名錄學生自選設(shè)計實驗?zāi)夸浄N子植物分類教學實習主要參考文獻植物生物學實驗室一般操作和常用藥品 一、玻璃器皿的清潔(一)器皿的清洗新器皿必須洗滌才能使用。要求實驗報告書寫整齊、清潔、簡明扼要。學生除了在實驗室學習外，還應(yīng)以整個校園或公園、植物園中的植物作為學習的目標，理論聯(lián)系實際進行學習。對于經(jīng)自己努力解決不了的問題，應(yīng)請指導(dǎo)教師幫助。3．實驗時，學生應(yīng)根據(jù)實驗教材獨立操作，仔細觀察，隨時作好記錄。三、實驗課進行方式及對學生要求1．實驗前必須預(yù)習每次實驗課內(nèi)容，寫出簡單的實驗提綱(要進行檢查)，并把個人準備好的實驗必備物品帶到實驗室。各實驗小組輪流打掃實驗室衛(wèi)生。室內(nèi)禁止吸煙，不準隨地吐痰和亂扔紙屑、雜物。4．保持實驗室安靜、整潔。3．愛護儀器、標本及其他公共設(shè)施，節(jié)約藥品和水電。2．按號使用顯微鏡和解剖鏡，使用前要檢查，如果發(fā)現(xiàn)損壞或發(fā)生故障，要及時報告指導(dǎo)教師，不可自行修理或拆卸顯微鏡的任何部件。二、實驗室規(guī)則實驗室規(guī)則是維護正常教學秩序和培養(yǎng)學生嚴謹學風的重要保證，師生都必須嚴格遵守。0 植物生物學實驗指導(dǎo)內(nèi)蒙古大學生命科學學院生物系植物教研室緒 論一、實驗課教學的目的與意義“植物生物學實驗”是高等院校生物科學專業(yè)、生物技術(shù)專業(yè)和生態(tài)學專業(yè)開設(shè)的一門重要的理論聯(lián)系實際的課程。通過本門課程的學習，要求學生掌握植物生物學實驗的基本理論和基本知識，以及研究植物的一些基本方法和基本技能，并運用這些方法和技能去研究植物個體發(fā)育中植物器官的形態(tài)建成與結(jié)構(gòu)；學習植物系統(tǒng)發(fā)育過程中植物界各大類群植物主要的形態(tài)特征、代表植物的生活史，以及它們在植物界的系統(tǒng)位置及演化規(guī)律，側(cè)重學習被子植物分類學的基本原理和方法，與人類關(guān)系密切的重點科、屬、種的主要特征，認識一些常見植物；鞏固和加深“植物生物學”課程所學理論，從而達到提高學生科學素質(zhì)，培養(yǎng)學生動手能力、嚴肅認真的科學態(tài)度與實事求是的工作作風，為今后進一步應(yīng)用植物生物學知識和技能，解決生產(chǎn)和科學研究中有關(guān)問題打下扎實的基礎(chǔ)。1．學生應(yīng)提前5—10min進入實驗室，做好實驗前的準備工作。使用后要擦拭整理，放回原處。損壞物品時應(yīng)主動向教師報告并及時登記。實驗時不得隨意走動和談笑。嚴格按規(guī)定使用酸、堿等藥品每次實驗后。5．最后離開實驗室的學生要負責檢查水、電、門、窗等是否關(guān)嚴。2，必須仔細聽取教師對實驗課要求、操作中的重點、難點和應(yīng)注意問題的講解。遇到問題，應(yīng)積極思考，分析原因，排除障礙。4．積極開展第二課堂的教學活動。5．按時完成實驗作業(yè)。四、學生常用實驗用品：繪圖鉛筆兩支(2H3H)、實驗報告紙、橡皮、直尺、鑷子、刀片等。使用過的器皿應(yīng)在未干前洗滌，如不能及時清洗，應(yīng)浸在水中。(二)玻片清洗新蓋玻片和載玻片分別放在鹽酸酒精(70％～95％工業(yè)酒精100 ml，加濃鹽酸2 ml)中浸4h，流水沖凈，蒸餾水蕩滌、晾干，置于95％酒精的玻璃缸中加蓋備用。(四)鉻酸洗滌液配法重鉻酸鉀(K 2Cr2O 2)20g，濃硫酸(H2S04，工業(yè)用，比重1．84)或廢硫酸100 ml，清水100 m1。此液呈紅色，盛人玻璃缸中，加蓋以防氧化變質(zhì)，反復(fù)使用直至變成藍黑色為止。表１－１藥品的規(guī)格試劑規(guī)格代號級別標簽顏色比價實驗試劑四級黃６０化學純?nèi)壦{７０分析試劑二級紅８０保證試劑一級綠１００注：制片使用的藥品以化學純適宜，必要時使用分析試劑，有的還可用實驗試劑。配方：碘化鉀3g； 蒸餾水100ml； 碘1g 先將碘化鉀溶于蒸餾水中，待全溶解后再加碘，振蕩溶解，將此液保存在棕色玻璃瓶內(nèi)。配方：蘇丹Ⅲ或蘇丹Ⅳ；95％酒精10 m1；過濾后再加入10 ml甘油3．1％醋酸洋紅(Aceto carmine) 酸性染料，適用于壓碎涂抹制片，能使染色體染成深紅色，細胞質(zhì)成淺紅色。4．卡寶染色液(Carbol fuchsine) 即石炭酸一品紅染色液(核染色劑)。原液A：3 g堿性品紅溶于100 ml 70％酒精中。原液C：．取原液B 55 ml，加入6 ml 冰醋酸和6 ml 福爾馬林(38％的甲醛)。染色液：取C液10—20 m1，加45％冰醋酸80～90 ml， g，配成10％～20％濃度的石炭酸品紅液，放置兩周后使用，效果顯著(若立即用，則著色能力差)。山梨醇為助滲劑，兼有穩(wěn)定染色液的作用，假如沒有山梨醇也能染色，但效果較差。配方： g； 蒸餾水100 ml. 使用時再稀釋10倍左右。配方： g。7．釕紅(Ruthenium　red)染液 釕紅是細胞胞間層專性染料，其配后不易保存，應(yīng)現(xiàn)用現(xiàn)配。配方：龍膽紫1 g ； 蒸餾水100 ml9．苯胺蘭(Aniline blue)溶液 為酸性染料，對纖維素細胞壁、非染色質(zhì)的結(jié)構(gòu)、鞭毛等，尤其是染絲狀藻類效果好。配方：苯胺蘭1g； 35％或95％酒精100 ml100．間苯三酚(Phloroglucin)溶液 用于測定木質(zhì)素。配方：橘紅G 1 g； 95％酒精100 ml12. 番紅(Safranin O) 番紅為堿性染料，適用于染木質(zhì)化、角質(zhì)化、栓質(zhì)化的細胞壁，對細胞核中染色質(zhì)、染色體和花粉外壁等都可染成鮮艷的紅色。配方：(1)番紅水溶液 番紅1 g；蒸餾水100 ml(2)番紅酒精溶液 番紅1 g；50％(或95％)酒精100 ml(3)苯胺番紅酒精染色液甲液 番紅5 g , 95％酒精50 ml； 乙液 苯胺20 ml, 蒸餾水450 m1.將甲、乙二溶液混合后充分搖均勻，過濾后使用。為酸性染料，能將細胞質(zhì)，纖維素細胞壁染成鮮艷綠色，著色很快，故要很好的掌握著色時間。14．蘇木精(Hematoxylin)染液 蘇木精是植物組織制片中應(yīng)用最廣的染料。配方很多，現(xiàn)僅舉海氏(Heidenhain’s)蘇木精染色液，又稱鐵礬蘇木精染色液。(2)加入蒸餾水，塞緊瓶口，置冰箱中可長期保存。鐵礬蘇木精染液為染細胞核內(nèi)染色質(zhì)最好的染色劑，但要注意甲液與乙液在任何情況下決不能混合。配制方法很簡便，即用95％的酒精加上一定量的蒸餾水即可。原濃度(95%)酒精—配制濃度=所需加水量表１－２不同濃度酒精配制所需配制酒精濃度／％原有酒精濃度／％原有酒精濃度減去所配制濃度＝應(yīng)加蒸餾水量／ml 配置時應(yīng)加酒精及水量30959530=6530ml 酒精+65ml水50959550=4550ml 酒精+45ml水75959575=2075ml 酒精+20ml水85959585=1085ml 酒精+10ml水（四）固定液配制1． F．A．A固定液 又稱標準固定液、萬能固定液。在植物形態(tài)解剖研究上應(yīng)用極廣，此固定液最大優(yōu)點是兼有保存劑作用，但對染色體的觀察效果較差。2． F．P．A固定液 配制時用正丙酸代替冰醋酸，三種成分的比例同上液。3. 卡諾氏固定液(Carnoy’s Fluid) 適用于一般植物組織和細胞的固定，常用于根尖，花藥壓片及子房石蠟切片等。配方：無水酒精3份：冰醋酸1份(五)透明劑材料在脫盡水分后還需經(jīng)過與石蠟、樹膠相混合的溶劑來處理，這種溶劑能使材料清凈透明，增加組織折光系數(shù)。為了避免材料收縮，應(yīng)采取逐步從純酒精過渡到二甲苯中。2．氯仿(Chloroform)．它比二甲苯揮發(fā)快，滲透力較弱，對材料收縮也較小，也能與酒精混合又能溶解石蠟，故