【正文】 rm)．它比二甲苯揮發(fā)快，滲透力較弱，對材料收縮也較小，也能與酒精混合又能溶解石蠟，故常用在石蠟制片中浸蠟前透明。2． F．P．A固定液 配制時用正丙酸代替冰醋酸，三種成分的比例同上液。鐵礬蘇木精染液為染細(xì)胞核內(nèi)染色質(zhì)最好的染色劑，但要注意甲液與乙液在任何情況下決不能混合。為酸性染料，能將細(xì)胞質(zhì)，纖維素細(xì)胞壁染成鮮艷綠色，著色很快，故要很好的掌握著色時間。配方：龍膽紫1 g ； 蒸餾水100 ml9．苯胺蘭(Aniline blue)溶液 為酸性染料，對纖維素細(xì)胞壁、非染色質(zhì)的結(jié)構(gòu)、鞭毛等，尤其是染絲狀藻類效果好。山梨醇為助滲劑，兼有穩(wěn)定染色液的作用，假如沒有山梨醇也能染色，但效果較差。4．卡寶染色液(Carbol fuchsine) 即石炭酸一品紅染色液(核染色劑)。此液呈紅色，盛人玻璃缸中，加蓋以防氧化變質(zhì)，反復(fù)使用直至變成藍(lán)黑色為止。四、學(xué)生常用實(shí)驗(yàn)用品：繪圖鉛筆兩支(2H3H)、實(shí)驗(yàn)報告紙、橡皮、直尺、鑷子、刀片等。2，必須仔細(xì)聽取教師對實(shí)驗(yàn)課要求、操作中的重點(diǎn)、難點(diǎn)和應(yīng)注意問題的講解。損壞物品時應(yīng)主動向教師報告并及時登記。0 植物生物學(xué)實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)內(nèi)蒙古大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院生物系植物教研室緒 論一、實(shí)驗(yàn)課教學(xué)的目的與意義“植物生物學(xué)實(shí)驗(yàn)”是高等院校生物科學(xué)專業(yè)、生物技術(shù)專業(yè)和生態(tài)學(xué)專業(yè)開設(shè)的一門重要的理論聯(lián)系實(shí)際的課程。4．保持實(shí)驗(yàn)室安靜、整潔。3．實(shí)驗(yàn)時，學(xué)生應(yīng)根據(jù)實(shí)驗(yàn)教材獨(dú)立操作，仔細(xì)觀察，隨時作好記錄。 目 錄緒 論植物生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室一般操作和常用藥品基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)一、顯微鏡的構(gòu)造和使用方法,植物生活細(xì)胞的基本結(jié)構(gòu)實(shí)驗(yàn)二、植物細(xì)胞內(nèi)質(zhì)體和液泡的觀察實(shí)驗(yàn)三、植物細(xì)胞內(nèi)儲藏物質(zhì)和細(xì)胞壁結(jié)構(gòu)成分的觀察鑒定實(shí)驗(yàn)四、植物的組織：分生組織、基本組織、保護(hù)組織實(shí)驗(yàn)五、植物的組織：輸導(dǎo)組織、機(jī)械組織、分泌組織實(shí)驗(yàn)六、植物的根： 初生結(jié)構(gòu)和次生結(jié)構(gòu)實(shí)驗(yàn)七、植物的莖： 初生結(jié)構(gòu)和次生結(jié)構(gòu)實(shí)驗(yàn)八、植物的葉： 中生葉、旱生葉和水生葉實(shí)驗(yàn)九、植物的繁殖： 雄蕊、雌蕊、胚和胚乳的發(fā)育實(shí)驗(yàn)十、菌類和地衣植物： 鞭毛菌、接合菌、子囊菌、擔(dān)子菌、地衣實(shí)驗(yàn)十一、苔蘚植物： 苔綱和蘚綱實(shí)驗(yàn)十二、蕨類植物： 松葉蕨、石松、木賊、真蕨實(shí)驗(yàn)十三、裸子植物： 蘇鐵、銀杏、松柏、買麻藤實(shí)驗(yàn)十四、被子植物：（木蘭亞綱、金縷梅亞綱、石竹亞綱）實(shí)驗(yàn)十五、被子植物：（五椏果亞綱、薔薇亞綱）實(shí)驗(yàn)十六、被子植物：（薔薇亞綱）實(shí)驗(yàn)十七、被子植物：（菊亞綱）實(shí)驗(yàn)十八、被子植物：（鴨跖草亞綱、百合亞綱）綜合實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)一 植物形態(tài)解剖基本技能的綜合訓(xùn)練徒手切片法、石蠟制片法實(shí)驗(yàn)二、湖泊藻類植物觀察實(shí)驗(yàn)三、種子植物系統(tǒng)分類研究法附錄I 中國珍惜瀕危植物名錄（部分）附錄II 內(nèi)蒙古珍惜瀕危植物名錄學(xué)生自選設(shè)計實(shí)驗(yàn)?zāi)夸浄N子植物分類教學(xué)實(shí)習(xí)主要參考文獻(xiàn)植物生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室一般操作和常用藥品 一、玻璃器皿的清潔(一)器皿的清洗新器皿必須洗滌才能使用。二、常用實(shí)驗(yàn)藥劑配制(一)藥品的規(guī)格(表1—1)(二)染色液1．碘一碘化鉀(I—KI)(Iodine potassium iodide)溶液能將淀粉染成藍(lán)紫色，蛋白質(zhì)染成黃色，也是植物組織化學(xué)測定的重要試劑。配制步驟： 先配成三種原液，再配成染色液。5. 中性紅(Neutral red)溶液 用于染細(xì)胞中的液泡，可鑒定細(xì)胞死活。還多用于與真曙紅作雙重染色，對于高等植物多用于與番紅作雙重染色。配方：(1)固綠酒精液 固綠1 g； 95％酒精100 ml(2)苯胺固綠酒精液 固綠 1 g, 95％酒精40 ml,苯胺10 ml配后充分搖勻，過濾后使用。(三)各級酒精(脫水劑)配制由于無水酒精價格較高，故常用95％的酒精配制。．A好。由于氯仿能破壞染色，因此染色后不宜用氯仿作透明劑。將樹膠溶人二甲苯即配成。(八)解離液常用于根尖等細(xì)胞的涂片，它能使細(xì)胞壁中層(果膠質(zhì))溶解，而使細(xì)胞分開。離析液種類很多，現(xiàn)介紹最常用的兩種1．鉻酸一硝酸離析液配方：10％ 鉻酸液+10% 硝酸液，等量混合而成。(一)防腐液浸制標(biāo)本浸制標(biāo)本供形態(tài)解剖觀察用。有些葉、花、花序也可壓制成臘葉標(biāo)本，裝訂在臺紙上，外面再用塑料薄膜套好加以保護(hù)。三、 通過觀察植物細(xì)胞，基本掌握顯微鏡的使用方法。具一定形狀，如馬蹄形、橢圓形、三角形等。（5）鏡臂 直立于鏡座后側(cè)，是顯微鏡的脊梁，所有機(jī)械裝置都直接或間接地附在其上。（9）鏡筒是連接目鏡和物鏡的不透光金屬園筒，鏡筒下端具固定的螺絲。（光學(xué)成象原理圖略）目鏡的放大：目鏡的放大倍數(shù)通常刻在目鏡上，以5X、8X、10X等數(shù)字表示。倍數(shù)在4X以下，100X以上用的不多。物鏡倍數(shù)愈大，焦點(diǎn)深度愈淺。一般情況常用平面鏡，在光線較暗的條件下可用凹面鏡取光。（4）使用電源的顯微鏡無反光鏡。如鏡頭特別污濁，則需要用二甲苯清潔鏡頭，這時用擦鏡紙蘸二甲苯少許來擦拭鏡頭，但為了防止溶解鏡頭貼膠，用二甲苯一定要少。觀察完，取片前一定將鏡頭換到低倍鏡后再抽片，以防磨損鏡頭。如若看不清結(jié)構(gòu)，可將制片取下，從一側(cè)滴一滴稀碘液，從另一側(cè)用吸水紙將水吸去，再進(jìn)行觀察。確定目鏡測微尺的格值后，去掉臺式測微尺，把需觀察的樣品制片，置載物臺上，即可用目鏡測微尺測量樣品實(shí)際的長度，如被測細(xì)胞直徑為目鏡測微尺2格，該細(xì)胞則為10μm。2．掌握所繪圖中各部分比例，力求真實(shí)反映觀察到的材料。用解剖針、鑷子移至載玻片水滴中，左手拇指和食指沿窄面夾住載玻片，右手用鑷子輕輕夾起蓋玻片，以其一邊緩緩蓋下，注意勿急促過猛產(chǎn)生氣泡。實(shí)驗(yàn)內(nèi)容和方法：一、質(zhì)體的觀察：質(zhì)體是植物細(xì)胞特有的細(xì)胞器，也是在光學(xué)顯微鏡下所能觀察到的細(xì)胞器。一般存在于植物的花、果實(shí)、根等器官的細(xì)胞內(nèi)，呈現(xiàn)紅、桔紅、黃色。切片前，先將要切的新鮮材料浸入水中，將刀片醮水增加刀片光滑，再切材料，切片時選取浸入水中材料，夾在左手拇指和食指之間，使材料保持豎直，切面要平坦，再用右手拇指和食指持刀片，刀刃要鋒利，切時刀口向內(nèi)平行置于材料平面，手腕穩(wěn)定不動，而用胳膊滑動，由刀尾向刀頭移動切下材料厚薄均勻，切忌切斜。另外取燕麥種子壓碎后用蒸餾水（以下蒸餾水略為水）封片。脂肪：多為油滴狀態(tài)分布在某些植物種子子葉或胚乳細(xì)胞質(zhì)中。次生壁是有些植物細(xì)胞停止生長以后，在初生壁內(nèi)側(cè)繼續(xù)積累壁物質(zhì)形成。角質(zhì)的化學(xué)鑒定：取橡皮樹葉做徒手切片，置于載玻片上，加蘇丹Ⅲ液染色15－30分鐘，然后用水洗去染料，再用水封片觀察，葉最外邊表皮細(xì)胞的角質(zhì)膜被染成桔紅色。具緣紋孔：觀察松莖三切面石蠟切片。這是一群由胚胎保留下來的細(xì)胞。側(cè)生分生組織包括形成層和木栓形成層，其細(xì)胞特點(diǎn)在橫切面上看細(xì)胞為扁平狀，細(xì)胞核相當(dāng)大，液泡化較明顯。貯藏組織：主要在種子、果實(shí)和塊根、塊莖內(nèi)大量存在。2．氣孔：正面觀由兩個半月形保衛(wèi)細(xì)胞凹面相對形成，兩個保衛(wèi)細(xì)胞之間空隙為氣孔，保衛(wèi)細(xì)胞和氣孔統(tǒng)稱為氣孔器，保衛(wèi)細(xì)胞內(nèi)含有葉綠體。2．皮孔：先在氣孔下方位置的木栓形成層，由于額外產(chǎn)生大量的補(bǔ)充細(xì)胞，局部膨大，破裂而形成皮孔，流通空氣。實(shí)驗(yàn)五 植物的組織：輸導(dǎo)組織、機(jī)械組織、分泌組織實(shí)驗(yàn)內(nèi)容和方法：一、輸導(dǎo)組織是植物體內(nèi)運(yùn)輸水分、無機(jī)鹽和各種營養(yǎng)物質(zhì)的組織。實(shí)驗(yàn)觀察：用松莖三切面石蠟切片和松莖木質(zhì)部浸介材料的觀察，來了解管胞三切面的細(xì)胞特征。每個篩管分子旁有1—多個伴胞。（一）厚角組織：常見于草本莖、葉柄、葉脈表皮細(xì)胞下部，長形生活細(xì)胞，細(xì)胞壁纖維素加厚發(fā)生在角隅處，有些植物細(xì)胞壁切向面成片狀加厚，細(xì)胞壁具彈性，不妨礙植物生長，是植物幼嫩器官的機(jī)械組織。實(shí)驗(yàn)觀察：從梨果實(shí)的果肉中，用鑷子取出堅硬的顆粒（就是石細(xì)胞群），置載玻片上用解剖刀柄壓碎，然后用稀番紅染色后封片觀察，可見到圓形或橢圓形石細(xì)胞。分枝狀乳汁管細(xì)胞內(nèi)的淀粉粒被染為藍(lán)色。根的生長主要靠分生區(qū)的細(xì)胞分裂和伸長區(qū)的細(xì)胞伸長，特別是伸長區(qū)。（1）中柱鞘：內(nèi)皮層以內(nèi)即中柱最外方排列較整齊的1—2層薄壁細(xì)胞為中柱鞘，中柱鞘細(xì)胞具有潛在分裂能力，將來可以產(chǎn)生形成層、木栓形成層和側(cè)根。（二）單子葉植物根的初生結(jié)構(gòu)：觀察：鳶尾根橫切面石蠟切片。（二）根的次生結(jié)構(gòu)：觀察：柳樹老根橫切面石蠟切片。由中柱鞘某些細(xì)胞恢復(fù)分裂能力，經(jīng)過幾次平周分裂，細(xì)胞層數(shù)增加向外方突起，再進(jìn)行平周、垂周分裂使原有突起繼續(xù)生長，形成側(cè)根的根原基，再繼續(xù)分裂、生長、分化出生長錐和根冠，突破皮層和表皮，露出母根以外，進(jìn)入土壤。大豆是雙子葉草本植物，生長期主要以初生結(jié)構(gòu)為主，后期生長也產(chǎn)生次生結(jié)構(gòu)但遠(yuǎn)不如木本植物次生結(jié)構(gòu)發(fā)達(dá)。每一個維管束內(nèi)方為初生木質(zhì)部，其分化方式為內(nèi)始式。維管束中不保留形成層。2．木本莖的次生構(gòu)造：觀察：筆桿楊莖橫切面石蠟切片。2．總結(jié)比較根和莖的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)（包括初生、次生結(jié)構(gòu)）。另外海綿組織內(nèi)含葉綠體較少，所以葉下表面綠色較淺。表皮、葉肉細(xì)胞、通氣組織、維管束特點(diǎn)。2．葉肉：不分化為柵欄組織和海綿組織，水稻葉的葉肉細(xì)胞壁常內(nèi)陷增加光合作用面積。（二）花序：有些植物的花，如桃、杏等，單獨(dú)一朵花生在莖上的叫單生花。③葇荑花序：具較長的花軸，著生許多無柄的單性花，整個花序常下垂。⑦隱頭花序：花軸頂端膨大肉質(zhì)，中央部分下陷呈囊狀，花著生在囊狀體的內(nèi)壁上，如無花果。實(shí)驗(yàn)觀察一個花粉囊，由外向內(nèi)觀察。藥隔由花藥的維管束和藥壁組織組成。當(dāng)花藥成熟，花粉粒散出傳粉時，花粉囊壁的中層、絨氈層被消耗解體，只保留表皮和細(xì)胞壁條紋狀加厚的纖維層。3．中軸胎座：多心皮在中央聯(lián)合成中軸，胚珠著生在中軸上。如扁豆。胚囊母細(xì)胞進(jìn)行減數(shù)分裂形成四個細(xì)胞（大孢子）。四、胚和胚乳的發(fā)育（一）雙子葉植物胚和胚乳的發(fā)育（示范）：1．胚的發(fā)育：被子植物進(jìn)行雙受精之后，由受精卵（合子）發(fā)育成胚，受精極核發(fā)育成胚乳?？梢韵到y(tǒng)了解胚的發(fā)育過程。胚進(jìn)一步分化，在原胚的腹面一側(cè)出現(xiàn)凹溝使胚兩側(cè)出現(xiàn)不對稱狀態(tài)，這時進(jìn)入了器官分化期。如杏。如：桃、杏。如：黃瓜、西瓜。3．角果：由二心皮組成的雌蕊發(fā)育而成的果實(shí)。如罌粟。2．穎果：由2心皮雌蕊形成，果實(shí)成熟時只含一枚種子，但果皮與種皮不分離。實(shí)驗(yàn)十 菌類（Fungi）和地衣（Lichenes）菌類是異養(yǎng)的原植體植物，無莖葉分化，生殖器官單細(xì)胞，與藻類是平行進(jìn)化的兩個分枝。1．發(fā)網(wǎng)菌屬Stemanitis在解剖鏡下觀察朽木上叢生的發(fā)網(wǎng)菌孢子囊。1．鞭毛菌亞門Mastigomycotina菌絲無分隔，屬多核體型，無性生殖產(chǎn)生頂生鞭毛的初生游動孢子和側(cè)生鞭毛的次生游動孢子，有性生殖產(chǎn)生卵孢子。（2）用鑷子挑取帶有孢子囊梗的菌絲少量裝片滴水在低倍顯微鏡下觀察。有性生殖不常見。由菌絲生出分生孢子梗，梗在頂端分枝數(shù)次呈帚狀，末級分枝成瓶狀，稱小梗，其上以陸續(xù)縊縮分割的方式產(chǎn)生一串青綠色的分生孢子?？图{孢子的部分實(shí)為復(fù)碗狀，中部是一個半球形的囊軸，下連略膨大的囊托。觀察示范標(biāo)本。釋放孢子后，可以見到孢絲交織成的孢網(wǎng)與囊軸相連。在長期適應(yīng)陸生環(huán)境過程中，菌類可產(chǎn)生大量的孢子適應(yīng)環(huán)境。3．翅果：果皮向上延伸為翅。如天仙子。果實(shí)成熟后，果皮由下而上從二縫線裂開。裂果：果實(shí)成熟時，果皮開裂。如柑桔。（三）復(fù)果（聚花果）：由整個花序形成一個果實(shí)，花軸或花萼肉質(zhì)化形成果實(shí)的食用部分，如風(fēng)梨（菠蘿）、桑椹、無花果。2．胚乳發(fā)育同雙子葉植物本次實(shí)驗(yàn)觀察水稻切片示范材料，可以觀察到由受精卵→原胚→梨形胚→成熟胚的發(fā)育過程和胚乳的發(fā)育。隨后，細(xì)胞壁開始由胚囊邊緣向中央擴(kuò)展，形成胚乳細(xì)胞。近珠孔的一個細(xì)胞叫基細(xì)胞，遠(yuǎn)離珠孔的一個叫頂細(xì)胞。近珠孔的三個細(xì)胞，中間一個為卵細(xì)胞，兩側(cè)兩個為助細(xì)胞，中央為極核（二個），合點(diǎn)端三個細(xì)胞為反足細(xì)胞。倒生胚珠的珠被與珠柄部分愈合形成珠脊。4．特立中央胎座：多心皮，一室子房。（一）胎座的類型：（示范）胚珠在子房內(nèi)著生的位置叫胎座。（二）花粉粒結(jié)構(gòu)和發(fā)育（示范）：觀察百合成熟花藥橫切面石蠟切片。2．藥室內(nèi)壁：緊靠表皮內(nèi)方，體積比表皮細(xì)胞大的方形細(xì)胞，幼年花藥為薄壁細(xì)胞，內(nèi)有大液泡，至花藥成熟時，細(xì)胞壁條紋狀木質(zhì)化不均勻加厚稱纖維層，有助于花粉囊的開裂。2．有限花序：花序中花開放時由最頂端和最中心的花先開，漸及下邊和周圍，花軸不再伸長生長。④傘形花序：花軸縮短，小花柄近等長，均生于花軸頂端，形狀如張開的傘。在花序上沒有典型的營養(yǎng)葉，只有簡單的小苞片。五、碳四植物葉的結(jié)構(gòu)取玉米葉橫切面制片觀察。觀察松樹葉橫切面永久制片。在葉片中央為主脈（最大的葉維管束），葉維管束的近軸面為木質(zhì)部，遠(yuǎn)軸面為韌皮部，葉脈越細(xì)其結(jié)構(gòu)越簡單。實(shí)驗(yàn)內(nèi)容和方法：一、葉的形態(tài)觀察邊桌上標(biāo)本。（2）形成層的射線原始細(xì)胞分裂產(chǎn)生維管射線（射線）。（三）莖的次生結(jié)構(gòu)：1．莖形成層產(chǎn)生和活動（示范）：觀察大豆莖橫切片，維管束之中保留的原形成層分化為束中形成層；維管束之間髓射線的薄壁細(xì)胞恢復(fù)分裂能力而形成束間形成層，束中形成層與束間形成層相聯(lián)接構(gòu)成莖的形成層環(huán)。髓射線：在初生維管束之間的薄壁細(xì)胞稱為髓射線，與束中形成層相應(yīng)部位的髓射線細(xì)胞將來分化為束間形成層。細(xì)胞內(nèi)不含葉綠體，細(xì)胞外壁角質(zhì)化，并有一層角質(zhì)膜，表皮毛為細(xì)長的單細(xì)胞毛或多細(xì)胞毛。實(shí)驗(yàn)七 植物的莖實(shí)驗(yàn)?zāi)康模毫私馇o尖形態(tài)結(jié)構(gòu)特點(diǎn)；觀察掌握莖的結(jié)構(gòu)。2．根形成層的射線原始細(xì)胞分裂產(chǎn)生維管射線（射線），貫穿在次生木質(zhì)部中的叫木射線，貫穿在次生韌皮部中的叫韌皮射線。內(nèi)皮層細(xì)胞壁為五面加厚，在橫切面上呈馬蹄形，它與不加厚的通道細(xì)胞相間排列，通道細(xì)胞往往位于原生木質(zhì)部的頂端。每束木質(zhì)部靠外的導(dǎo)管口徑較少，是最早分化