實(shí)驗(yàn)微波輔助提取-高效液相色譜法測定蔬果中的vc含量-文庫吧資料
2025-01-26 04:22本頁面
【正文】 用最多的檢測器； 可連續(xù)檢測參比池和樣品池中流動(dòng)相之間的折光指數(shù)差值 。 特點(diǎn) ： 靈敏度高； 線性范圍寬； 流通池小 （ 1 mm 10 mm ， 容積 8 μL） ； 對(duì)流動(dòng)相的流速和溫度變化不敏感； 波長可選 ， 易于操作； 可用于梯度洗脫 。發(fā)展趨勢是 減小填料粒度和柱徑 以提高柱效。 內(nèi)梯度 : 一臺(tái)高壓泵 , 通過比例調(diào)節(jié)閥 ,將兩種或多種不同極性的溶劑按一定的比例抽入高壓泵中混合。 ?為了獲得高柱效而使用粒度很小的固定相 （ 10μm） ， 液體的流動(dòng)相高速通過時(shí) ， 將產(chǎn)生很高的壓力 ， 因此高壓 、 高速是高效液相色譜的特點(diǎn)之一 。 此外還配有梯度淋洗、自動(dòng)進(jìn)樣和數(shù)據(jù)處理裝置。 ? 分離系統(tǒng) 。 HPLC與 GC的比較 1. 儀器結(jié)構(gòu) HPLC儀器包括： ? 高壓輸液裝置 。它除了起運(yùn)載作用外，還可與組分作用，并與固定相對(duì)組分的作用產(chǎn)生競爭，即流動(dòng)相對(duì)分離的貢獻(xiàn)很大，可通過溶劑來控制和改進(jìn)分離。 為了解決分析時(shí)間及柱效問題， 最為有效地增加柱效的唯一方法是減小填充物的粒徑（ 3~10 ?m ）！ 粒徑減小，液體流過所需壓力增大 高壓裝置 分析對(duì)象及范圍： GC分析只限于氣體和低沸點(diǎn)的穩(wěn)定化合物，這些物質(zhì)占有機(jī)物總數(shù)的 20%； HPLC可以分析高沸點(diǎn)、高分子量的穩(wěn)定或不穩(wěn)定化合物，這類物質(zhì)占有機(jī)物總數(shù)的 80%。為保證有一定的柱流速，填充的固定相顆粒直徑多在 150~200 ?m范圍內(nèi)。當(dāng)R=1.5時(shí)，分離程度可達(dá)99.7%，因此R=1.5通常用作是否分開的判據(jù)。其定義為： 利用此式，可直接從 色譜流出曲線上求出分離度 R。 （ 2） 半峰寬 (W1/2)：色譜峰高一半處的寬度 W1/2 = ? （ 3） 峰底寬 (Wb)： Wb=4 ? W)tt(WW)tt(2)WW(21ttR 121212rr21rr21rr ????????5. 分離度 (Resolution, R) 同時(shí)反映色譜柱效能和選擇性的一個(gè)綜合指標(biāo)。 色譜流出曲線的意義： ? 色譜峰數(shù) =樣品中單組份的最少個(gè)數(shù)； ? 色譜保留值 —— 定性依據(jù)； ? 色譜峰高或面積 —— 定量依據(jù)； ? 色譜保留值或區(qū)域?qū)挾?—— 色譜柱分離效能評(píng)價(jià)指標(biāo)； ? 色譜峰間距 —— 固定相或流動(dòng)相選擇是否合適的依據(jù)。R2 / V180。R2 / t180。RMMRtttttk ???3. 色譜流出曲線 （色譜圖） 混合組分的分離過程及檢測器對(duì)各組份在不同階段的響應(yīng) 關(guān)于色譜圖的幾個(gè)基本 術(shù)語 基線 無試樣通過檢測器時(shí) ，檢測到的信號(hào)即為基線 。 容量因子越大 ， 保留時(shí)間越長； VM為流動(dòng)相體積 ， 即柱內(nèi)固定相顆粒間的空隙體積； VS為固定相體積 ， 對(duì)不同類型色譜柱 ， VS的含義不同； 氣 液色譜柱： VS為固定液體積； 氣 固色譜柱： VS為吸附劑表面容量； ?KVVccVVMVVMMMkmSmsmmSSSSmS ?????分配比與保留時(shí)間的關(guān)系 保留因子 (retention factor)： u
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