電泳技術和常用電泳儀(ppt-48)-文庫吧資料
2025-01-24 19:09本頁面
【正文】 第三節(jié) 常用電泳設備的基本結構及技術指標 二 、 電泳儀的主要技術指標 1． 輸出電壓 8． 連續(xù)工作時間 2． 輸出電流 9． 保護措施 3． 輸出功率 10． 顯示方式 4． 電壓穩(wěn)定度 11． 定時方式 5． 電流穩(wěn)定度 12． 電源電壓 6． 功率穩(wěn)定度 13． 電源頻率 7． 輸出組數 14． 功耗 第四節(jié) 毛細管電泳的基本結構和分離模式 一 、 毛細管電泳的相關概念 1. 電場強度 （ Electric Field Strength） 2. 電泳淌度 ( Electrophoretic Mobility) 3. 遷移時間 （ Migration Time） 4. 電泳速度 ( Electrophoretic Velocity) 5. 電滲流 （ Electroosmotic Flow， EOF） 6. 焦耳熱 （ Joule Heating） 第四節(jié) 毛細管電泳的基本結構和分離模式 二、毛細管電泳的基本工作原理 溶液中的帶電粒子以高壓電場為驅動力，沿毛細管通道，以不同速度向與其所帶電荷相反的電極方向遷移，并依據樣品中各組分之間淌度和分配行為上的差異 而實現(xiàn)分離。 第二節(jié) 常用電泳技術和電泳方法 膠性 PH9 中電 加解 入質 了溶 雙液 PH3 加上電場后建立穩(wěn)定PH梯度 蛋白質溶液加入，建立電場 染色后，蛋白質因 PI值不同，沿 PH梯度分離開 第一向 等電聚焦 PI逐漸降低 等電聚焦膠放在 SDS－聚丙烯酰胺凝膠上 第二向 SDS－聚丙烯酰胺凝膠電泳 分子量逐漸降低 PI 逐漸降低 0607 雙向凝膠電泳示意圖 第二節(jié) 常用電泳技術和電泳方法 (七 ） 免 (疫 )(役 )電泳 免疫電泳是瓊脂平板電泳和雙相免疫擴散兩種方法的結合 。 第二向采用了十二烷基硫酸鈉一聚丙烯酰胺凝膠電泳 （ SDSPAGE） 就是按蛋白質分子量的大小使其在垂直方向進行分離 。 前導電解質的遷移率高于任何樣品組分 ， 后者則低于任何樣品組分 ， 被分離的組分按其不同的遷移率夾在中間 ， 在強電場的作用下 ， 各被分離組分在前導電解質與尾隨電解 質之間的空隙中移動 ， 實現(xiàn)分離 。⑦ 適用于中、大分子量（如蛋白質、肽類、同工酶等）生物組分的分離分析。④ 分辨率高 。 將等電點不同的蛋白質混合物加入有 pH值梯度的凝膠介質中，在電場內經過一段時間后，各組分將分別聚焦在各自等電點相應的 pH值位置上，最后，樣品的各組分在各自的等電點聚焦成一條清晰而穩(wěn)定的窄帶。 它具有機械強度好、彈性大、 透明、化學穩(wěn)定性高、無電滲 作用、設備簡單、樣品量小 (1～ 100μg ） 、分辨率高等優(yōu)點。普通的凝膠電泳在板上進行，以凝膠作為介質。因此特別 適合于病理情況下 微量異常蛋白的檢測。 第二節(jié) 常用電泳技術和電泳方法 （二）醋酸纖維素薄膜電泳 電泳時經過膜的預處理、加樣、電泳、染色、脫色與透明即可得到滿意的分離效果。 0602 平臥式電泳槽裝置示意圖 將濾紙條水平地架設在兩個裝有緩沖溶液的容器之間，樣品點于濾紙中央。 第二節(jié) 常用電泳技術
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