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電泳技術(shù)和常用電泳儀(ppt-48)(存儲(chǔ)版)

  

【正文】 溶液中的帶電粒子以高壓電場(chǎng)為驅(qū)動(dòng)力,沿毛細(xì)管通道,以不同速度向與其所帶電荷相反的電極方向遷移,并依據(jù)樣品中各組分之間淌度和分配行為上的差異 而實(shí)現(xiàn)分離。反之,親水性強(qiáng)的溶質(zhì)遷移速度就快,最終中性溶質(zhì)將依其疏水性不同而得以分離。該機(jī)工作穩(wěn)定性好、調(diào)節(jié)范圍寬,并設(shè)有完善的短路保護(hù)電路和過流保護(hù)電路,是目前國(guó)內(nèi)中、低壓電泳實(shí)驗(yàn)中應(yīng)用最廣泛的電泳儀之一。雙向電泳第一向?yàn)榈入娋劢?,第二向?yàn)樘荻?SDS電泳。 第四節(jié) 毛細(xì)管電泳的基本結(jié)構(gòu)和分離模式 (八) DNA測(cè)序系統(tǒng) 該系統(tǒng)利用凝膠毛細(xì)管的原理,將多道毛細(xì)管陣列設(shè)計(jì),用四種不同的熒光染色標(biāo)記 4種核苷酸,在模板上合成 DNA單鏈,然后在 DNA外切酶的作用下進(jìn)行堿基的連續(xù)水解和釋放,用激光識(shí)別和記錄釋放的堿基。一般用于單克隆 Ig增殖病、單克隆 Ig病、本周氏蛋白和游離輕鏈病、多組分單克隆 Ig病、重鏈病、 ? CSF寡克隆蛋白鑒 ? 別、多克隆 Ig病的 ? 診斷和鑒別診斷。 Hb電泳結(jié)果應(yīng)根據(jù)不同年齡人群進(jìn)行分析。是利用芯片分離熒光標(biāo)記的寡核苷酸,整個(gè)分離過程在 45s之內(nèi),而芯片的長(zhǎng)度僅為 。該儀器自動(dòng)化程度較差,當(dāng)電泳結(jié)束和染色脫色完成后,工作人員必須將電泳片由機(jī)器中取出。 (一)毛細(xì)管柱 (二)檢測(cè)器 (三)毛細(xì)管電泳 法的進(jìn)樣技術(shù) 0614毛細(xì)管電泳儀 第四節(jié) 毛細(xì)管電泳的基本結(jié)構(gòu)和分離模式 六、常用各種電泳儀簡(jiǎn)介 (一)穩(wěn)壓穩(wěn)流電泳儀 穩(wěn)壓穩(wěn)流電泳儀是中壓電泳儀。 第四節(jié) 毛細(xì)管電泳的基本結(jié)構(gòu)和分離模式 (三)毛細(xì)管膠束電動(dòng)色譜 (MECC) 使 MECC系統(tǒng)中存在兩個(gè)相:流動(dòng)的水相和起到固定相作用的膠束相。 第二節(jié) 常用電泳技術(shù)和電泳方法 膠性 PH9 中電 加解 入質(zhì) 了溶 雙液 PH3 加上電場(chǎng)后建立穩(wěn)定PH梯度 蛋白質(zhì)溶液加入,建立電場(chǎng) 染色后,蛋白質(zhì)因 PI值不同,沿 PH梯度分離開 第一向 等電聚焦 PI逐漸降低 等電聚焦膠放在 SDS-聚丙烯酰胺凝膠上 第二向 SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳 分子量逐漸降低 PI 逐漸降低 0607 雙向凝膠電泳示意圖 第二節(jié) 常用電泳技術(shù)和電泳方法 (七 ) 免 (疫 )(役 )電泳 免疫電泳是瓊脂平板電泳和雙相免疫擴(kuò)散兩種方法的結(jié)合 。④ 分辨率高 。因此特別 適合于病理情況下 微量異常蛋白的檢測(cè)。 (八)根據(jù)用法的類型可分為:雙向電泳、交叉 電泳、連續(xù)紙電泳、電泳-層析相結(jié)合技術(shù)等。 (二)根據(jù)有無固體支持物可分為:自由電泳和支持物電泳 第二節(jié) 常用電泳技術(shù)和電泳方法 (三)根據(jù)支持載體的位置或形狀可分成:水平電泳、垂直電泳、板狀電泳、柱狀電泳、 U型管電泳、倒 V字形電泳、毛細(xì)管電泳等??梢詫?shí)現(xiàn)電泳分離技術(shù)的儀器稱之為電泳儀( electrophoresister)。 第一節(jié) 電泳原理 一、電泳的基本原理 物質(zhì)分子在正常情況下一般不帶電,即所帶正負(fù)電荷量相 等,故不顯示帶電性。 (五)根據(jù)電源控制的不同,一般可分為以下 3類: 1. 恒壓電泳 。是最早使用的區(qū)帶電泳。電泳中常用的凝膠為葡聚糖、交聯(lián)聚丙烯酰胺和瓊脂糖。 第二節(jié) 常用電泳技術(shù)和電泳方法 ( 五 ) 等速電泳 采用兩種不同濃度的電解質(zhì)組成 ,一種為前導(dǎo)電解質(zhì) , 充滿整個(gè)毛細(xì)管柱;另一種為尾隨電解質(zhì) , 置于一端的電泳槽中 。 第四節(jié) 毛細(xì)管電泳的基本結(jié)構(gòu)和分離模式
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