生物分離工程技術(shù)第六章沉淀與膜分離技術(shù)-文庫吧資料
2025-01-22 11:53本頁面
【正文】 ， 0℃ 時 ， G=707， A= 25℃ 時 ， G=756， A= 生物分離 (工程 )技術(shù) 查表法 生物分離 (工程 )技術(shù) ② 鹽析曲線的制作 (設(shè)操作溫度為 0℃) (1)將料液分成等體積的數(shù)份； (2)計算達(dá)到 10％ 100％飽和度所需加入的硫酸銨量，并在攪拌下分別加到料液中，攪拌 1h，靜置 1h以上； (3)離心（ 3000rpm） 40min后，將沉淀溶于緩沖溶液中，測定其中總蛋白和目標(biāo)蛋白的濃度； (4)分別測上清液中總蛋白和目標(biāo)蛋白的濃度，比較沉淀前后蛋白質(zhì)是否保持物料守恒，檢驗結(jié)果的可信度； (5)以飽和度為橫坐標(biāo)，上清液中總蛋白和目標(biāo)蛋白濃度為縱坐標(biāo)作圖。 ? 在低離子強(qiáng)度溶液或純水中，蛋白質(zhì)的溶解度隨溫度升高而增大 。 常見陰離子的鹽析作用順序 ： PO43＞ SO42＞ CHCOO＞ Cl＞ N03＞ Cl04＞ I＞ SCN 陽離子的鹽析作用順序為 NH4+＞ K+＞ Na+＞ Mg2+ ? 鹽類必須 溶解度大 、受溫度影響小，而且 鹽溶液密度不高 。 （ I ＝ 189。 當(dāng)雙電層的 ξ 電位足夠大時，靜電排斥作用抵御分子間的相互吸引作用 (分子間力 )，使蛋白質(zhì)溶液處于穩(wěn)定狀態(tài)。 生物分離 (工程 )技術(shù) 沉淀分離技術(shù)的原理和方法 一、蛋白質(zhì)的表面 特性 二、 鹽析 沉淀 三 、 有機(jī)溶劑沉淀 四、 熱 沉 淀 五、 其他沉淀法 六、 思考題 生物分離 (工程 )技術(shù) 一、蛋白質(zhì)表面特性 ? 蛋白質(zhì)表面 結(jié)構(gòu)特點(diǎn) ? 蛋白質(zhì)的 膠體特性 生物分離 (工程 )技術(shù) 蛋白質(zhì)表面結(jié)構(gòu)特點(diǎn)圖 生物分離 (工程 )技術(shù) 蛋白質(zhì)的膠體特性 ? 蛋白質(zhì)的相對分子質(zhì)量 (6kD1000kD，直徑約 l30nm) ? 分子表面的水化層 緊密結(jié)合的水化層可達(dá)到 ／ g蛋白質(zhì)， 疏松結(jié)合的水化層可達(dá)到蛋白質(zhì)分子質(zhì)量的 2倍以上 ? 分子間的靜電排斥 （ 雙電層 ） ? 蛋白質(zhì)沉淀的機(jī)制（環(huán)境、沉淀劑） 生物分離 (工程 )技術(shù) 蛋白質(zhì)分子雙電層示意圖 雙電層中存在距表面由高到低 (絕對值 )的電位分布，雙電層的性質(zhì)與該電位分布密切相關(guān)。 ? 第二種做法是選擇使目標(biāo)物選擇性地沉淀出來，雜質(zhì)保留在溶液中。多步沉淀操作也可制備高純度的目標(biāo)產(chǎn)品。 沉淀法是采取適當(dāng)?shù)拇胧└淖內(nèi)芤旱睦砘瘏?shù)，控制溶液中各種成分的溶解
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