微生物的遺傳變異和育種待定-文庫(kù)吧資料
2025-01-20 00:16本頁(yè)面
【正文】 長(zhǎng)成小菌落。 營(yíng)養(yǎng)缺陷型突變株的篩選 ? (1)與篩選營(yíng)養(yǎng)缺陷型有關(guān)的三類(lèi)培養(yǎng)基 ? 基本培養(yǎng)基 (minimal midium， MM) — [] ? 完全培養(yǎng)基 (plete medium,CM) — [+] ? 補(bǔ)充培養(yǎng)基 (supplemental medium,SM) — [A] ? （ 2） 與營(yíng)養(yǎng)缺陷型突變有關(guān)的菌體 ? 野生型 (wild type) — 能在 []中生長(zhǎng) ? 營(yíng)養(yǎng)缺陷型 (auxotroph)— 能在 [+]或 [A]生長(zhǎng) ? 原養(yǎng)型 (prototroph)— 能在 []中生長(zhǎng) 抗生素法 菌絲過(guò)濾法 青霉素法 制霉菌素法 原菌株 (出發(fā)菌株 ) 誘變劑處理 淘汰野生型 檢出缺陷型 鑒定缺陷型 同一培養(yǎng)皿 夾層培養(yǎng)法 限量補(bǔ)充培養(yǎng)法 不同培養(yǎng)皿 逐個(gè)檢出法 影印接種法 生長(zhǎng)譜法 營(yíng)養(yǎng)缺陷型突變株的篩選方法 營(yíng)養(yǎng)缺陷型突變株的篩選方法 夾層培養(yǎng)法 夾層培養(yǎng)法 先在培養(yǎng)皿底部倒一薄層不含菌的基本培養(yǎng)基，待凝，添加一層混有經(jīng)誘變劑處理菌液的基本培養(yǎng)基，其上再澆一薄層不含菌的基本培養(yǎng)基，經(jīng)培養(yǎng)后，對(duì)首次出現(xiàn)的菌落用記號(hào)筆一一標(biāo)在皿底。完全培養(yǎng)基 (CM，符號(hào)為 [+])是指可滿(mǎn)足某種微生物的一切營(yíng)養(yǎng)缺陷型菌株的營(yíng)養(yǎng)需要的天然或半合成培養(yǎng)基。 誘變育種的基本環(huán)節(jié) 誘變育種的原則 突變株的篩選方法 產(chǎn)量突變株的篩選 抗藥性突變株的篩選 營(yíng)養(yǎng)缺陷型突變株的篩選 春日霉素產(chǎn)生菌的孢子懸液 ? 誘變 ? 涂布平板 ? 培養(yǎng) 2天（ 29℃ ） 培養(yǎng) 45天 (29℃ ) 生物鑒定板上含供試菌種 ? 培養(yǎng) 1718小時(shí) (29℃ ） ? 檢查抑菌圈的大小 保持合適的溫、濕度 產(chǎn)量突變株的篩選 ? 抗藥性突變株的篩選 營(yíng)養(yǎng)缺陷型菌株 ? 營(yíng)養(yǎng)缺陷型 是指通過(guò)誘變產(chǎn)生的，由于發(fā)生了喪失某酶合成能力的突變，因而只能在加有該酶合成產(chǎn)物的培養(yǎng)基中才能生長(zhǎng)的突變株。 轉(zhuǎn)座 (因 )子 IS 插入序列 (insertion sequence) Tn 轉(zhuǎn)座子 (transposon) Mu 噬菌體 (mutator phage) a b a b a b (spontaneous mutation) 由背景輻射和環(huán)境因素引起； 由微生物自身有害代謝物引起； 由 DNA復(fù)制過(guò)程中堿基配對(duì)錯(cuò)誤引起等。如：亞硝酸、羥胺、和各種烷化劑； ?間接引起置換的誘變劑 ?通過(guò)活細(xì)胞的代謝活動(dòng)摻入到 DNA分子中后引起的變化。 含鏈霉素培基 痢疾桿菌 依鏈株 長(zhǎng)期培養(yǎng) 菌落變異 在陳舊培養(yǎng)基中長(zhǎng)期培養(yǎng) 光滑型菌落 粗糙型菌落 S R 原因：失去 LPS的特異多糖 （三）突變率 ? 每一個(gè)細(xì)胞在每一世代中發(fā)生某一性狀突變的幾率； ? 自發(fā)突變幾率 ? 一般在 106~109范圍內(nèi)； ? 突變率為 109的含義 ? 抗性突變是最常見(jiàn)的突變類(lèi)型； ? 細(xì)菌產(chǎn)生抗藥性的途徑 ? 基因突變 ? 抗藥性質(zhì)粒的轉(zhuǎn)移 ? 生理適應(yīng) ? 由基因突變引起的抗藥性的原因？ 兩種觀點(diǎn)： ? 突變的性狀與引起突變的原因間呈對(duì)應(yīng)性 — 抗性突變株的產(chǎn)生是由環(huán)境因素誘發(fā)出來(lái)的，屬定向變異； ? 突變是自發(fā)產(chǎn)生的，與環(huán)境是否存在該物質(zhì)無(wú)關(guān)。 磷酸 核糖 堿基 TA堿基對(duì) CG堿基對(duì) ? 氫鍵 ?堿基堆集力 ?磷酸基上負(fù)電荷被胞內(nèi)組蛋白或正離子中和 ?堿基處于疏水環(huán)境中 DNA的雙螺旋結(jié)構(gòu)穩(wěn)定因素 （二）基因突變的類(lèi)型 ? 基因突變的類(lèi)型有哪些？ ? 哪些突變型是選擇性突變株？哪些是非選擇性突變株？為什么？ ? 舉例說(shuō)明如何篩選抗性突變株？ 突變株的表型 選擇性突變株 非選擇性突變株 營(yíng)養(yǎng)缺陷型 抗性突變型 條件致死突變型 形態(tài)突變型 抗原突變型 產(chǎn)量突變型 細(xì)菌的變異現(xiàn)象 ? 形態(tài)、結(jié)構(gòu)變異 ? 毒力變異 ? 耐藥性變異 ? 菌落變異 形態(tài)結(jié)構(gòu)變異 ? 36%食鹽 鼠疫耶氏菌 多形態(tài)性 陳舊培基物 ? 青霉素、溶菌酶 正常形態(tài)細(xì)菌 L型變異 抗體或補(bǔ)體 (部分或完全失去胞壁 ) ? 特殊結(jié)構(gòu)的變異 4243℃ 炭疽桿菌 失去形成芽胞能力 , 毒性降低 1020天 變形桿菌 %石炭酸 遷徙生長(zhǎng)（ H） 點(diǎn)狀生長(zhǎng)、單個(gè)菌落（ O） 鞭毛變異 毒力變異 β棒狀噬菌體 白喉棒狀桿菌 獲得白喉毒素 增強(qiáng) ? ? 膽汁、
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