cr技術(shù)與應(yīng)用ppt課件-文庫吧資料
2025-01-14 00:23本頁面
【正文】 產(chǎn)品 法醫(yī)學(xué)檢測 人類學(xué)研究 …… 基因組 DNA 獲取特定 DNA片段 擴(kuò)增特定DNA片段 DNA聚合酶 引物 引物 M13噬菌體 Sanger的測序技術(shù) 引物 DNA聚合酶 引物 引物 Mullis的構(gòu)思 DNA聚合酶 DNA聚合酶 特定 DNA片段 94℃ 變性 5065℃ 退火 XX℃ 延伸 94℃ 55℃ 37℃ Taq DNA聚合酶（ thermus aquaticus) 酶活性(%) 溫度 (℃) 40 50 60 70 80 90 100 100 80 60 40 20 72℃ 94℃ 55℃ PCR循環(huán) PCR的基本原理 ? PCR反應(yīng)條件 ? PCR過程 ? PCR的特點(diǎn) 標(biāo)準(zhǔn)的 PCR反應(yīng)體系 4種 dNTP混合物 各 200umol/L 引物 各 10～ 100pmol 模板 DNA ～ 2ug Taq DNA聚合酶 Mg2+ 1 2 3 4 5 22 55 72 94 時(shí)間（ min） 溫度 （ ℃ ） PCR的基本原理 ? PCR反應(yīng)條件 ? PCR過程 ? PCR的特點(diǎn) 適溫延伸 3 高溫變性 1 低溫退火 2 重復(fù) 1~3步 25~30輪 目的 DNA片段 擴(kuò)增 100萬倍以上 DNA雙螺旋 DNA單鏈 與引物復(fù)性 DNA變性 形成2條單鏈 子鏈延伸 DNA加倍 PCR的基本原理 ? PCR反應(yīng)條件 ? PCR過程 ? PCR的特點(diǎn) 1 2 3 4 5 22 55 72 94 時(shí)間（ min） 溫度 （ ℃ ） 適溫延伸 3 高溫變性 1 低溫退火 2 重復(fù) 1~3步 25~30輪 目的 DNA片段 擴(kuò)增 100萬倍以上 DNA雙螺旋 DNA單鏈 與引物復(fù)性 子鏈延伸 DNA加倍 DNA變性 形成2條單鏈 模板 DNA 95℃ PCR的基本原理 ? PCR反應(yīng)條件 ? PCR過程 ? PCR的特點(diǎn) 95℃ 50℃引物 1 引物 2 DNA引物 PCR的基本原理 ? PCR反應(yīng)條件 ? PCR過程 ? PCR的特點(diǎn) 50℃ 引物 1 引物 2 DNA引物 72℃Taq酶 Taq酶 PCR的基本原理 ? PCR反應(yīng)條件 ? PCR過程 ? PCR的特點(diǎn) 72℃ 第 1輪結(jié)束 95℃第 2輪開始 PCR的基本原理 ? PCR反應(yīng)條件 ? PCR過程 ? PCR的特點(diǎn) 95℃ 50℃
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