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【醫(yī)學(xué)課件】骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞移植治療心力衰竭的實(shí)驗(yàn)研究ppt課件-文庫(kù)吧資料

2024-10-25 06:53本頁(yè)面
  

【正文】 50mg/L,于 37℃ 、含 5%的 CO2的飽和濕度 培養(yǎng)箱內(nèi)繼續(xù)培養(yǎng) 48h。 三、材料與方法 動(dòng)物: 具有同基因背景的近交系 F344大鼠 藥品及試劑: 注射用鹽酸阿霉素、淋巴細(xì)胞分離液、胎牛血清、低糖 DMEM培養(yǎng)基、胰蛋白酶、 5溴 2′脫氧尿苷( BrdU)、小鼠抗大鼠 Brdu單克隆抗體、 SP法試劑盒、濃縮型 DAB試劑盒、小鼠抗大鼠單抗CD11b/cFITC、 CD34FITC、 CD44PE和CD90PE,以及相應(yīng)同型對(duì)照單抗小鼠 IgG1FITC、 IgG1PE、 IgG2a –PE和 IgG2a –FITC等 設(shè)備及器械: BCM1000型生物潔凈工作臺(tái)、 37℃ 恒溫 CO2培養(yǎng)箱、倒置相差顯微鏡、- 70℃ 超低溫冰箱、LXJ- Ⅱ 離心機(jī)、 RM6240型生物信號(hào)采集分析系統(tǒng)、 YP100型壓力換能器、流式細(xì)胞儀等 實(shí)驗(yàn)路線 1:細(xì)胞部分 MSCs分離純化 接種 傳代 鑒定 BrdU標(biāo)記 標(biāo)記率檢測(cè) 細(xì)胞移植 實(shí)驗(yàn)路線 2:動(dòng)物實(shí)驗(yàn) F344 大鼠 ADR注射 細(xì)胞移植組 心功測(cè)定+組化分析 細(xì)胞移植 DMEM注射 移植對(duì)照組 NS注射 F344 大鼠 正常對(duì)照組 (一)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分組及心力衰竭模型建立 ? 10只大鼠作為正常對(duì)照組( NS腹 腔注射 ) ? 36只大鼠,采用腹腔注射阿霉素( 2 mg /kg,每周一次,共六次)建立心力衰竭 模型 ? 2組:移植對(duì)照組、 細(xì) 胞移植組 (二 ) MSCs的分離及培養(yǎng): ? 1. 將 F344大鼠處,無(wú)菌條件下獲取股骨和脛骨,用
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