【正文】 tional Day for Eye Care, the China Youth Development ServiceCenter and Zhejiang Medicine, a leading listed Chinese pharmaceutical pany, jointlyannounced the kickoff of the about one month, a questionnaire piled by top eye care medical experts in China willbe distributed through multiple online partners, including , as well asthrough offline survey events held in universities, middle schools and primary schools acrossthe report will be released based on the survey statistics and analysis, and most importantly,guidelines for parents and youth on how to care for the eyes and prevent myopia — agrowing problem in China39。 在此我向你們表示最衷心的感謝 。 感謝我的室友們，從遙遠的家來到這個陌生的城市里，是你們和我共同維系著彼此之間兄弟般的感情，維系著寢室那份家的融洽。 我還要感謝在一起愉 快的度過畢業(yè)論文小組的同學們， 正是由于你們的幫助和支持，我才能克服一個一個的困難和疑惑，直至 論 文的順利完成。 感謝我的 導師陶宏征 老師，這片論文的每個實驗細節(jié)和每個數(shù)據(jù)，都離不開你的細心指導 ，感謝陶老師 在忙碌的教學工作中擠出時間來審查、修改我的論文。從課題的選擇到項目的最終完成， 陶宏征 老 師都始終給予我細心的指導和不懈 的支持。實驗結果表明：（ 1） 鹽脅迫抑制露水草的生長 ； （ 2） 隨著鹽濃度的升高光合參數(shù)、光合色素逐漸降低，即鹽脅迫抑制光合作用抑制色素合成； （ 3） 隨著處理液鹽濃度的增加， 相對 電導率 ， 丙二醛 含量逐漸增加，可知鹽濃度越高對植物傷害越大； （ 4）隨著處理液中鹽濃度的增加露水草中蛻皮激素含量也在增加，且實驗組與對照組存在顯著差異，因此逆境可以促進露水草中蛻皮激素含量的積累。實驗結果中鹽脅迫促使蛻皮激素含量增加是 正確的。 鹽脅迫對露水草的 次生代謝產(chǎn)物蛻皮激素含量的影響 討論 14 由于優(yōu)越環(huán)境會使植物徒長，消耗了植物積累的代謝，而不利于植物積累代謝產(chǎn)物。所以 鹽脅迫促進 露水草 相對電導率增加。 鹽脅迫對露水草的 相對電導率影響 電導率是指酸、堿、鹽電解質溶于水后分離出離子，使溶液具有導電的能力。 NaCl 作用下 葉綠素 被 分解 ， 葉綠體的發(fā)育受到影響，這是由于 NaCl 促進 葉綠素霉的活性 [19]。 葉綠體是葉肉細胞中對鹽脅迫最敏感的器官。 鹽脅迫對露水草的 光合 色素 影響 葉綠素 a、葉綠素 b、類胡蘿卜素 都可以吸收光能，但只有少部分處于激發(fā)狀態(tài)的葉綠素 a 將光能轉化為電能 。由于 水分利用率 是 用 光合速率和蒸騰速率之比 來表示，所以 光合速率減小導致水分利用率減小。ml1) A242 0 0 結果與分析 12 由圖 10 可知隨著鹽濃度的升高，露水草中蛻皮激素含量也在升高， 且各實驗組與對照組都存在顯著差異。** 紅河學院本科畢業(yè)論文 (設計 ) 11 圖 8. 鹽脅迫 對露水草中丙二醛含量的影響 鹽脅迫對露水草的蛻皮激素含量的影響 表 5 為不同濃度 蛻皮激素的 A242值， 隨著濃度的升高 A242值在增加，根據(jù)表 5 繪制 出圖 9 關于蛻皮激素的 標準曲線 。** 90 177。 — 50 177。L1) 丙二醛含量 (umol+** 120 177。 70 177。L1) 相對電導率 （ %） 傷害度 （ %） CK 177。L1 時它們之間的丙二醛含量變化不明顯。 表 4 鹽脅迫對露水草 中丙二醛含量 影響 (%) (平均值 177。SD， n=5) 圖 7. 鹽 脅迫 對露水草葉片中 相對電導率影 鹽脅迫對露水草中 丙二醛 含量 的影響 由表 4 可知，隨著鹽濃度的升高，丙二醛的相對增加量也在不斷升高，且鹽濃度為 120 mmolL1時實驗組與對照組存在差異顯著 。L1 時實驗組與對照組的相對電導率不存在差異顯著 ，鹽濃度為90nmol 由圖7 可知 隨著鹽濃度的增加，相對電導率也在逐漸增加，但是鹽濃度在 50nmol葉綠素 a/b，類胡蘿卜素 /總葉綠素 比值 與對照組比較時都不存在顯著差異。** 177。** 177。** 177。** 177。** 177。** 177。** 177。** 177。 177。 177。g1g1g1g1SD， n=5) 處理濃度(mmol 紅河學院本科畢業(yè)論文 (設計 ) 9 表 2 鹽脅迫對露水草的光合色素影響 (mg/gL1時影響最大，且實驗組的 葉綠素 a+葉綠素 b 占對照組的 %，對于類胡蘿卜素鹽濃度為 120 mmolL1時實驗組的與對照組比較時差異最大，且實驗組的葉綠素 b 占對照組的 37 紅河學院本科畢業(yè)論文 (設計 ) 7 圖 1. 鹽脅迫對露水草凈光合速率的影響 注： * ＜ P， ** P 圖 2. 鹽脅迫對露水草蒸騰速率的影響 圖 3. 鹽脅迫 對露水草氣孔導度的 影響結果與分析 8 圖 4. 鹽脅迫 對露水草 中 胞間二氧化 的影響 圖 對露水草水分利用率的影響 鹽脅迫對露水草的 光合色素影響 從表 2 可知 對于葉綠素 a 鹽濃度為 90 mmol 鹽濃度為 70 mmolL1 時，只有凈光合速率與對照比較時有顯著差異，鹽濃度為 90、 120 mol** 由 圖 1～ 5 可知 隨著鹽濃度的升高 凈光合速率、蒸騰速率、氣孔導度、水分利用率都在先下降后升高，而胞間二氧化碳則先升高后降低，鹽濃度為50mmol** 177。* 120 177。** 177。 90 177。 177。 70 177。 177。 50 177。 177。mol１ ） CK 177。m2m2m2SD， n=5) 處理mmols1L1在此濃度下實驗組的胞間二氧化碳占對照組的 %。L1時其凈光合速率、 蒸騰速率、氣孔導度 與對照組相比較變化更大，鹽濃度為 90mol 結果與分析 6 用 Q 法對數(shù)據(jù)刪除， 數(shù)據(jù)采用 軟件進行 方差分析 用 SD 進行多重比較，用 origin 軟件進行作圖 。ml1） 樣品液體積 （ ml） 247。g1min1 離心 15min，取上清液，上清液繼續(xù)離心，去上清液在 242nm 處測量吸光度，根據(jù)標準曲線回歸方程計算樣品液濃度。ml1，各濃度體積都配成 10ml。ml1 母液。FW1） =[（ 106A 106A 450） 提取液體積 ]247。樣品鮮重 （ 2） 丙二醛含量（ molg1 按下列公式進行計算： 丙二醛含量 （ mmolmin1離心 10min，其 上清液 即為 丙二醛 提取液。傷害度 （ %） =（ LtLck） /（ 1Lck） 100 式中， Lt 為處理葉片的相對電導度； Lck為對照葉片的相對電導度。計算：相對電導率 （ %） =（ S1S0） /（ S2S0） 100%。測完各試管加塞，用保鮮膜封好試管口，置于沸水浴 30min，徹底殺死植物組織，取出試管 用自來水冷卻至室溫，并在室溫下平衡 10min搖勻，測其終電導率 （ S2），實驗過程用去離子水做空白對照。選取生長環(huán)境一致的材料，先用自來水沖洗干凈，再用去離子水沖洗3 次，用吸水紙吸去多余的水分。FW1） =色素濃度 提取液體積 247。L1): Chla=12A647 （ 1） Chlb=A667 （ 2） Chl=Chla+Chlb （ 3） Car=()/245 （ 4） 樣品色素含量（ mg 光合色素測定： 將光合色素提取液（對照組用 N， N二甲基甲酰胺）于波長 664nm、 647nm、 480nm 下測定 OD 值。 光合色素的測定 光合色素 提取 ： 將待測葉剪 下 并稱取 鮮重剪碎放入研缽中再加入5mlN,N二甲基甲酰胺進行迅速研磨， 研磨后至于離心管中， 勻漿以 4000rm2 各項實驗指標的測定 光合 參數(shù) 的 測定 實驗前準備：選擇晴朗的天氣，測定時間 為 上午 8:3011:30；實驗前一天將儀器充滿電，檢查儀器的吸收管，調(diào)試好儀器；實驗前一天用濕毛巾擦去苗上的灰塵 ；實驗當天將要測定的實驗材料提前半小時放到光下進行充分光適應。 實驗方法 實驗材料預 處理 露水草種子浸泡 12h后 播種到大營養(yǎng)袋里，每隔 1d 澆一次水，當露水草幼苗葉長長至 7cm 時，進行移栽，移栽時挑選大小一致的幼苗，每個 小花盆 內(nèi)移栽 5 棵， 10d后進行 鹽脅迫處理，鹽脅迫選用中性鹽氯化鈉， 濃度 設置為 0、 50、70、 90、 120mmol 實驗儀器 Li6400XT 便攜式光合儀、 高速離心機 （ ） 、 恒溫水浴鍋 （ 常州國華電子有限公 ， HH4） 、紫外分光光度計 (T6 新世紀 )、 可見分光光度計 (上海菁華科技儀器有限公司 )、 電子 天平 (賽多利斯科學儀器有限公司 )、電熱恒溫鼓風干燥箱 (DHG9246A 型 )、恒溫搖床 （ 上海一恒科技有限公司 ） 、電導儀 、數(shù)顯 超聲波儀、 移液槍、 燒杯、量筒、容量瓶、玻璃棒、研缽、離心管 15ml、試管、試管架 。但未見鹽脅迫對露水草有效成分含量的相關研究 。 陳光登 等 [15]發(fā)現(xiàn) ， 在一定的鹽脅迫下，淫羊藿根、葉和箭葉淫羊藿根、莖、葉均呈現(xiàn)在低濃度范圍內(nèi)總黃酮含量增加。植物對鹽脅迫的反應涉及到生理、生化、細胞等多方面的變化，目的是在高滲透壓的外界環(huán)境中仍然保持水分平衡及正常的光合活性，對鹽脅迫產(chǎn)生耐受。黃璐琦等還提出道地藥材形成 “ 逆境效應理論 ” [14]， 作為中藥材 “ 道地性 ” 科學解釋。其中碳素 /營養(yǎng)平衡假說、生長 /分化平衡假說和資源獲得假說 [13]都認為環(huán)境脅迫條件下 ， 植株生長下降 ， 但次生代謝產(chǎn)物含量增加；而在良好環(huán)境條件下 ， 植株生長快 ， 次生代謝產(chǎn) 物含量低。 次生代謝產(chǎn)物在植物體內(nèi)的合成和積累是在植物具有相關基因的基礎上 ， 一定的環(huán)境條件誘導作用的結果 ， 生境條件變化將引起植株次生代謝產(chǎn)物含量變化。 脅迫對植物的生理及次生代謝產(chǎn)物主要有三方面效應，有增效效應，負效效應，完全抑制效應。土壤鹽堿化將會影響 土壤板結 且 肥力下降 ，另外不利于農(nóng)作物吸收養(yǎng)分，阻礙作物生長。 中國 的鹽漬化土壤主要分布在東北、華北和西北地區(qū)。當前，全球鹽堿地積前言 2 已達 108 hm2[9]。 雖然露水草是一種具有非常高開發(fā)價值的中藥材，但是通過查閱發(fā)現(xiàn)相關研究文 獻較少 ， 并且集中于對其化學成分的分析如何提高其有效成分含量的研究較少。用于風濕性關節(jié)炎，四肢麻木，腰腿痛，腎炎水腫，虛熱不退。 1976 年 在 露水草中提取出高含量 次 生代謝產(chǎn)物 — 蛻皮激素，并被認為露水草的藥用價值主要是蛻皮激素的效用 [8]。 蛻皮激素首次發(fā)現(xiàn)是在 1954 年， Butenandt A 和 Karlson P 從桑蠶蛹中分離鑒定出 α蛻皮激素，之后又分離得到生物活性更強的 β蛻皮激素。露水草性溫，味辛、微苦。 βecdysone