【正文】 再如 ， 乙酰乙酸乙酯存在下述酮 —烯醇互變異構(gòu)體： CH 3O2C CH CH 2COO C 2 H 3 CH5 CHOCOO C H 5酮式 烯醇式 酮式?jīng)]有共軛雙鍵 ， 它在 204 nm處僅有弱吸收；而烯醇式由于有共軛雙鍵 ， 因此在 245 nm處有強(qiáng)的 K吸收帶 (κ =18000 L 化合物 (Ⅰ )在 270nm處有最大吸收 ， 吸收峰位置與丙酮相同而強(qiáng)度差不多是丙酮的兩倍 。 紫外 —可見吸收光譜也可以用來作同分異構(gòu)體的判別 。 (4)在約 260nm處有具有振動精細(xì)結(jié)構(gòu)的弱吸收帶則說明有苯環(huán)存在 。 (2)在 210～ 250nm有強(qiáng)吸收 ， 表示含有共軛雙鍵 ， 如在260nm、 300nm、 330nm左右有高強(qiáng)度吸收峰 ， 則化合物含有 3～ 5個共軛 π鍵 。 (二 )結(jié)構(gòu)分析 紫外吸收光譜雖然不能對一種化合物作出準(zhǔn)確鑒定 ，但對化合物中官能團(tuán)和共軛體系的推測與確定卻是非常有效的 。若未知化合物和純已知化合物的吸收光譜非常一致 ， 則可認(rèn)為就是同一種化合物 。 為了便于比較 ， 吸收光譜常以 lgA對 λ作圖 ， 此時朗伯 —比爾定律可寫成 lgA=lgk+lg bc 第五節(jié) 紫外 可見吸收光譜的應(yīng)用 式右邊只有 k隨波長變化 。 (一 ) 化合物的鑒定 有機(jī)化合物的鑒定 ， 一般采用光譜比較法 。 ? 如果能在 ?1和 ?2處分別記錄吸光度隨時間變化的曲線，還能進(jìn)行 化學(xué)反應(yīng)動力學(xué)研究 。 ? 能獲得 導(dǎo)數(shù)光譜 。 雙波長分光光度計的優(yōu)點： ? 可以通過波長的選擇方便地校正背景吸收，消除吸收光譜重疊的干擾， 多組分混合物、混濁試樣(如生物組織液 )的定量分析。 圖 雙波長分光光度計原理圖 單色器 單色器 吸收池 接收器 λ1 λ1 λ2 λ2 3 雙波長分光光度計 由同一光源發(fā)出的光被分成兩束，分別經(jīng)過兩個單色器，得到兩束不同波長 (?1和 ?2)的單色光，利用切光器使兩束光以一定的頻率交替照射同一吸收池，然后經(jīng)過光電倍增管和電子控制系統(tǒng)，最后由顯示器顯示出兩個波長處的吸光度差值。 雙光束分光光度計一般都能自動記錄吸收光譜曲線。 光電倍增管 試樣池 單色器 圖 36 單光束分光光度計原理圖 參比池 2 雙光束分光光度計 光源 M0 ? M1 M2 M3 M4 PM R S 圖 37 雙光束分光光度計原理圖 經(jīng)單色器分光后經(jīng)反射鏡分解為強(qiáng)度相等的兩束光，一束通過參比池，一束通過樣品池。 1，單光束分光光度計 經(jīng)單色器分光后的一束平行光，輪流通過參比溶液和樣品溶液，以進(jìn)行吸光度的測定。很多型號的分光光度計裝配有微處理機(jī)，一方面可對分光光度計進(jìn)行操作控制，另一方面可進(jìn)行數(shù)據(jù)處理。 (五 ) 信號指示系統(tǒng) 它的作用是放大信號并以適當(dāng)方式指示或記錄下來。放大倍數(shù)取決于兩極間的電壓和打拿極的個數(shù)。 光電管在紫外 可見分光光度計上應(yīng)用較為廣泛。 硒光電池對光的敏感范圍為 300~800 nm，其中又以 500 ~ 600 nm最為靈敏。 (四 ) 檢測器 檢測器的功能是檢測信號、測量單色光透過溶液后光強(qiáng)度變化的一種裝置。在高精度的分析測定中 (紫外區(qū)尤其重要 )，吸收池要挑選配對。石英池適用于可見光區(qū)及紫外光區(qū)，玻璃吸收池只能用于可見光區(qū)。狹縫的大小直接影響單色光純度，但過小的狹縫又會減弱光強(qiáng)。缺點是各級光譜會重疊而產(chǎn)生干擾。 光柵 是利用光的衍射與干涉作用制成的，它可用于紫外、可見及紅外光域，而且在整個波長區(qū)具有良好的、幾乎均勻一致的分辨能力。由于玻璃可吸收紫外光，所以玻璃棱鏡只能用于 350 ~ 3200 nm的波長范圍，即只能用于可見光域內(nèi)。 棱鏡 有 玻璃 和 石英 兩種材料。單色器的性能直接影響入射光的單色性，從而也影響到測定的靈敏度、選擇性及校準(zhǔn)曲線的線性關(guān)系等。 單色器 一般由 入射狹縫、準(zhǔn)光器 (透鏡或凹面反射鏡使入射光成平行光 )、色散元件、聚焦元件和出射狹縫 等幾部分組成。氘燈的燈管內(nèi)充有氫的同位素 氘 ，它是紫外光區(qū)應(yīng)用最廣泛的一種光源，其光譜分布與氫燈類似，但光強(qiáng)度比相同功率的氫燈要大 3~5倍。 在近紫外區(qū)測定時常用氫燈和氘燈。 光電流與燈絲電壓的 n次方 (n?1)成正比。鎢燈和碘鎢燈可使用的范圍在 340 ~ 2500nm。 第三節(jié) 紫外 可見分光光度計 (一 )光源 對光源的基本要求： 是應(yīng)在儀器操作所需的光譜區(qū)域內(nèi)能夠發(fā)射連續(xù)輻射、有足夠的輻射強(qiáng)度和良好的穩(wěn)定性，而且輻射能量隨波長的變化應(yīng)盡可能小。 在定量分析中，要求絡(luò)合物與配位劑的最大吸收波長之差 (反襯度 )大約在 60 nm以上，有利于提高測定的準(zhǔn)確度。 一些常見配位體配位場強(qiáng)弱順序為： I－ ＜ Br－ ＜ Cl－ ＜ OH－ ＜Ｃ 2Ｏ 42－ ＝Ｈ 2Ｏ＜ SCN－ ＜吡啶＝ NH3 ＜乙二胺＜聯(lián)吡啶＜鄰二氮菲＜ NO2－ ＜ CN－ (三 ) 金屬離子影響下的配位體 ? → ?* 躍遷 吸收光度法所使用的顯色劑絕大多數(shù)都含有生色團(tuán)及助色團(tuán) , 其本身為有色化合物。 配位體的配位場越強(qiáng) , d軌道分裂能就越大 , 吸收峰波長就越短。當(dāng)它們的離子吸收光能后，低能態(tài)的 d電子可以分別躍遷至高能態(tài)的d軌道，這類躍遷分別稱為 d d 躍遷。 電荷遷移躍遷的摩爾吸光系數(shù)較大，是無機(jī)離子定量分析的基礎(chǔ)。 電荷遷移吸收光譜出現(xiàn)的波長位置，取決于電子給予體和電子接受體相應(yīng)電子軌道的能量差。 在配合物的中心離子和配位體中，當(dāng)一個電子由配體的軌道躍遷到與中心離子相關(guān)的軌道上時，可產(chǎn)生電荷遷移吸收光譜。 參見 P21 圖 32 33 表 35 常用紫外 —可見測定的溶劑 溶劑 使用波長范圍/nm 溶劑 使用波長范圍 /nm 水 210 甘油 230 乙醇 210 氯仿 245 甲醇 210 四氯化碳 265 異丙醇 210 乙酸甲酯 260 正丁醇 210 乙酸乙酯 260 96%硫酸 210 乙酸正丁酯 260 乙醚 220 苯 280 二氧六環(huán) 230 甲苯 285 二氯甲烷 235 吡啶 303 己烷 200 丙酮 330 環(huán)己烷 200 二硫化碳 375 二、無機(jī)化合物的吸收光譜 產(chǎn)生無機(jī)化合物紫外、可見吸收光譜的電子躍遷形式，一般分為兩大類： 電荷遷移躍遷 和 配位場躍遷 。 在選擇測定電子吸收光譜曲線的溶劑時，應(yīng)注意如下幾點： (1)盡量選用低極性溶劑； (2)能很好地溶解被測物，并且形成的溶液具有良好的光學(xué)和化學(xué)穩(wěn)定性； (3)溶劑在樣品的吸收光譜區(qū)無明顯吸收。 表 助色團(tuán)在飽和化合物中的吸收峰 助色團(tuán) 化合物 溶劑 ?max/?m ? max/() CH4,C2H6 氣態(tài) 150,165 ___ OH CH3OH 正己烷 177 200 OH