20xx年醫(yī)學(xué)專題—雙染法檢測(cè)細(xì)胞凋亡(參考版)
2024-11-17 22:20本頁面
【正文】 內(nèi)容總結(jié)（1）雙染法檢測(cè)細(xì)胞凋亡
(20111116 20:38:42)
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如果在分析的細(xì)胞群體中沒有PI+細(xì)胞，區(qū)分PI+細(xì)胞最好是參照雙陰性細(xì)胞群體， Log單位的地方。在此條件下可能會(huì)識(shí)別出兩群細(xì)胞，一是位于散點(diǎn)圖的右下方（ANN+/PI）還有就是右上方（ANN+/PI+）。將垂直的FL1 標(biāo)尺設(shè)定在緊靠Annexin V 單位的地方。一個(gè)恰當(dāng)?shù)难a(bǔ)償應(yīng)該是單陽性細(xì)胞熒光強(qiáng)度與落在左下Log 1 為邊界象限中間陰性細(xì)胞的熒光強(qiáng)度一致。 注：如果在以上調(diào)節(jié)補(bǔ)償過程中更改了PMT 的電壓，建議重復(fù)4 步驟，確保不引起過度熒光補(bǔ)償。如果這個(gè)調(diào)節(jié)沒有有效地去除FL1 的陽性信號(hào)，此時(shí)要降低FL1 PMT 的電壓。如果有顆粒出現(xiàn)在右側(cè)象限則說明有熒光滲漏；此時(shí)PI 的熒光被FL1 PMT 檢測(cè)到了。如果這個(gè)調(diào)節(jié)沒有有效地去除FL2 的陽性信號(hào)，此時(shí)要降低FL2（或FL3） PMT 的電壓。如果有顆粒出現(xiàn)在上端象限則說明有熒光滲漏；此時(shí)FL1的熒光被FL2（或FL3）PMT檢測(cè)
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