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20xx年醫(yī)學(xué)專題—雙染法檢測細胞凋亡(專業(yè)版)

2024-11-17 22:20上一頁面

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【正文】 注:在陰性群體門以外的細胞可被識為Annexin V 或Annexin V 和PI 陽性的細胞。4. 檢測PI 單染的細胞并檢查FL1FL2(或FL3)散點圖,保證在右上和右下象限內(nèi)沒有顆粒。碘化丙啶有毒,應(yīng)小心保存和使用,注意個人保護。 原理:如果有顆粒出現(xiàn)在上端象限則說明有熒光滲漏;此時FL1的熒光被FL2(或FL3)PMT檢測到了。在此條件下可能會識別出兩群細胞,一是位于散點圖的右下方(ANN+/PI)還有就是右上方(ANN+/PI+)。如果這個調(diào)節(jié)沒有有效地去除FL1 的陽性信號,此時要降低FL1 PMT 的電壓。使用流式細胞儀正確分析Annexin VEGFP/PI 雙染的細胞前要求儀器的熒光補償來去除兩種染料激發(fā)光之間的疊加。 在正常細胞中,磷脂酰絲氨酸(Phosphatidylserine, PS)位于細胞膜的內(nèi)側(cè),但在細胞凋亡的早期,PS 可從細胞膜的內(nèi)側(cè)翻轉(zhuǎn)到細胞膜的表面,暴露在細胞外環(huán)境中。5. 加入10ul PI 后輕輕混勻于28176。1. 上樣未經(jīng)染色的細胞,在線性FSSS 點圖上顯示細胞并
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