20xx年醫(yī)學(xué)專題—第五篇：流式細(xì)胞儀結(jié)果分析(參考版)
2024-11-13 18:02本頁面
【正文】 B1(CD19+CD5+):產(chǎn)生IgM型自身抗體, 參與免疫調(diào)節(jié)、與自身免疫病的發(fā)生有關(guān),第七十七頁，共七十七頁。絕對計(jì)數(shù)校準(zhǔn): 保證計(jì)數(shù)的準(zhǔn)確性。PE.PC.APC。（三）三參數(shù)直方圖。n)。細(xì)胞表面/胞漿/核特異性抗原(k224。ir243。,第七十六頁，共七十七頁。 同型對照為免疫熒光標(biāo)記中的陰性對照，可使熒光標(biāo)記單抗的信號保持其特異性。 xi224。,小 結(jié),流式細(xì)胞術(shù)（FCM）是在保持細(xì)胞及細(xì)胞器或微粒的結(jié)構(gòu)及功能不被破壞的狀態(tài)下，從分子水平上獲取多種信號實(shí)現(xiàn)對單個(gè)細(xì)胞進(jìn)行定量分析或純化分選。ozh232。 何謂熒光補(bǔ)償？何謂“液相芯片”技術(shù)？ 細(xì)胞分選的基本原理。)中的應(yīng)用,第七十四頁，共七十七頁。目前移植免疫中的FCM應(yīng)用主要包括流式細(xì)胞術(shù)的交叉配型（Flow cytometry crossmatching, FCXM）和群體反應(yīng)性抗體（Panel reactive antibody, PRA）檢測。ngy242。ngy242。shēn)免疫病相關(guān)HLA抗原分析,第七十三頁，共七十七頁。,HLAB27可出現(xiàn)(chūxi224。 li225。,CD4+Th細(xì)胞(x236。tǒng)及白血病免疫分型,對淋巴瘤和白血病進(jìn)行多色免疫分型 用于選擇(xuǎnz233。y224。 Tc(CD3+CD4CD8+T) B淋巴細(xì)胞及其亞群分析 B1(CD19+CD5+):產(chǎn)生IgM型自身抗體, 參與免疫調(diào)節(jié)、與自身免疫病的發(fā)生(fāshēng)有關(guān) B2(CD19+CD5):受外來抗原刺激, 產(chǎn)生高親和性特異性抗體 NK細(xì)胞分析 NK(CD3CD16+CD56+),一、淋巴細(xì)胞及其亞群的分析(fēnxī),第七十頁，共七十七頁。n)中的應(yīng)用,第六十九頁，共七十七頁。n)進(jìn)行標(biāo)記分析，可區(qū)別多種細(xì)胞的特性，為細(xì)胞免疫的研究增加了有效的手段和幫助。,流式細(xì)胞術(shù)目前已廣泛地被應(yīng)用于免疫學(xué)基礎(chǔ)研究和逐步進(jìn)入臨床應(yīng)用各方面，用流式細(xì)胞儀對細(xì)胞表面的抗原成分(ch233。 全程質(zhì)量控制：與待測標(biāo)本一起標(biāo)記和檢測，結(jié)果達(dá)靶值，提示本次實(shí)驗(yàn)結(jié)果可靠。,同型對照：即免疫熒光標(biāo)記中的陰性對照，選用相同源性的未標(biāo)記單抗作為對照調(diào)整和設(shè)置電壓(di224。q236。 絕對計(jì)數(shù)校準(zhǔn): 保證計(jì)數(shù)的準(zhǔn)確性。,光路與流路校正: 確保激光(jīguāng)光路與樣品流處于正交狀態(tài)，減少變異（CV）。o)濃度 固定劑,（二）免疫熒光染色(rǎns232。i)的質(zhì)控,第六十五頁，共七十七頁。ng)控制,（一）單細(xì)胞懸液制備(zh236。)法 溫度25~37℃，pH7.0~7.2,四、流式細(xì)胞免疫學(xué)技術(shù)的質(zhì)量(zh236。ngguāng)素分子的檢測，實(shí)現(xiàn)FCM對可溶性物質(zhì)的定量分析,第六十四頁，共七十七頁。,第六十三頁，共七十七頁。,微小的乳膠微球分別染成上百種不同的熒光色（固相芯片是用探針在芯片上的坐標(biāo)位置(w232。因檢測速度極快，所以又有“液相芯片”之稱 。),第六十頁，共七十七頁。,熒光染料與細(xì)胞成分的四種結(jié)合方式 結(jié)構(gòu)親和式 嵌入結(jié)合 共價(jià)鍵結(jié)合 熒光標(biāo)記(biāoj236。nb225。ngs232。ng)傳遞復(fù)合染料,第五十八頁，共七十七頁。,能量(n233。,用化學(xué)法將兩種不同激發(fā)波長的染料結(jié)合在一起，在488nm激發(fā)光照射下，通過一個(gè)(yī ɡ232。nɡ y242。ngguāng)素,得州紅,能量傳遞復(fù)合染料,藻膽蛋白類,（一）幾種常見的熒光染料,第五十六頁，共七十七頁。,激光(jīguāng),細(xì)胞(x236。)光波長與激發(fā)光波長間有較大的波長差 易與標(biāo)記單抗結(jié)合而不影響抗體的特異性,二、常用的熒光(y237。i) 機(jī)械法 酶處理法 化學(xué)試劑處理法 表面活性劑處理法 單細(xì)胞懸液的保存 深低溫保存
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