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流式細(xì)胞儀分選儀工作原理(參考版)

2025-08-08 08:45本頁面
  

【正文】 頻率和振幅的調(diào)節(jié) 液滴規(guī)則,斷點(diǎn)清晰,間隔明顯 Drop Delay檢測和維持 ? 延遲時間:影響分選純度 ? 斷點(diǎn)位置:因此液滴延遲 液流穩(wěn)定 常見因素: ? 管路中有氣泡 ? 環(huán)境溫度過高 ? 壓力泵故障 /漏氣 解決方法: ? 提前換液 /debubble ? 控制溫度 25 oC ? 查看壓力表、管路接口 分選前應(yīng)先觀察斷點(diǎn)液滴的位置,保證30min內(nèi)其位置不發(fā)生改變 分選模式 富集模式 所有帶有陽性細(xì)胞的液滴都被分選 純化模式 所有帶有陰性細(xì)胞的液滴都放棄 單細(xì)胞模式 液滴里只有一個陽性細(xì)胞的被分選。 – 門的種類很多,包括水平門、十字門、鉸鏈門、多邊形們、矩形門、橢圓型門等等 。設(shè)門( Gate) – 圈 門 是在流式圖中根據(jù)需要圈定一群細(xì)胞 ??梢允褂?VeserComp一類的自動捕獲抗體微球代替。 – 由于 目前所使用的 熒光染料發(fā)射譜較寬, 雖然他們之間各自發(fā)射峰值各不相同,彈發(fā)射譜范圍有一定的重疊,會對其他通道上的數(shù)值產(chǎn)生影響。 ※ 電壓調(diào)節(jié) ? 陰性 對照(同型對照,空白對照 ) : 以陰性群完全出現(xiàn),以正態(tài)分布為標(biāo)準(zhǔn) ,調(diào)節(jié)電壓使陰性對照的本底熒光處于比較低的水平。 – 電壓 amp。增益 – 目的:調(diào)節(jié)檢測器的信號擴(kuò)增程度,信號隨著電壓或增益的增加而增強(qiáng)。 熒光素選擇 電子系統(tǒng) ? 光電轉(zhuǎn)換 ? 數(shù)據(jù)處理 ? 光電轉(zhuǎn)換 Area/Lin 面積 High/Peak 峰高 Width 峰寬 Log (對數(shù) ) Lin (線性 ) 流式 分析 流程 熒光素 /抗體 細(xì)胞 流式數(shù)據(jù)解讀 流式圖的解讀 單參數(shù) 直方圖 : X軸表示熒光強(qiáng)度 Y軸表示頻數(shù) 雙參數(shù) 散點(diǎn)圖 : X軸與 Y軸均表示熒光
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