流式細胞儀培訓ppt課件(參考版)
2025-01-13 20:08本頁面
【正文】 也可利用細胞周期蛋白（ CYCLIN）、Ki6核增殖抗原（ PCNA）等，對細胞周期進行精確的分期： G0、 G S、 G M. G0/G1 S G2/M 流式細胞儀分選 ? 電荷式分選是當前的主流分選模式 ? 高速分選是保證結果的基本條件 ? 高純度和高活性是分選的基本要求 ? 可選的激光要多樣化（空冷、水冷、固體；不同的波長；真正的紫外） ? 提供多種分選流動室 ? 光路穩(wěn)定，紫外激光功率大 ? 流式分選和磁珠分選的差別和聯(lián)系 488 nm laser + Charged Plates Single cells sorted into test tubes FALS Sensor Fluorescence detector 電荷式細胞分選 細胞分選的主要技術指標 ? 分選速度： ≧ 25000個細胞 /秒 ? 分選純度： ﹥ 98% ? 分選后細胞存活率： 97% Before Sorting After Sorting 三、流式細胞儀檢測的一般步驟 ?設置檢測方案（ PROTOCOL) ?染色標本（同型對照，補償管，檢測抗體） ?同型對照管調(diào)電壓 ?電壓不變 ，補償管調(diào)補償 ?電壓不變，補償不變 ，上檢測管檢測后直接閱讀結果 檢測的一般步驟 電壓調(diào)節(jié)－利用同型對照：設置背景 ?電壓 volts ?增益 Gain 設定陰性和陽性信號強度的臨界點 熒光補償 Need to do when we measure signals from more than 1 fluorescence. FITC 520BP PE 575BP 4 Color Single Laser (488nm) FITC/PE/ECD/PC5 補 償 PE FITC PE+ cells FITC + cells To do colour pensation: For Pure FITC+ cells, = PE signal % FITC signal For Pure PE+ cells, = FITC signal % PE signal After pensation PE FITC PE+ cells FITC + cells GOOD pensation: Ymean of the FITC cell = the Ymean of / cells Xme
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