【正文】 對(duì) 毒物 產(chǎn) 生耐受性第八十八 頁(yè) ，共八十八 頁(yè) 。激 發(fā) 接觸： 實(shí)驗(yàn) 前將受 試動(dòng) 物背部右 側(cè) 皮膚去毛區(qū) 2cm2cm。內(nèi)容 總結(jié)第六章一般毒性作用General toxic effects。死亡仍未達(dá)一半時(shí)，可認(rèn)為耐受性較高。出現(xiàn)耐受性。提示機(jī)體對(duì)毒物產(chǎn)生耐受性。 結(jié)果評(píng)價(jià) 20天蓄積試驗(yàn)法評(píng)定標(biāo)準(zhǔn) 結(jié)果表述 蓄積毒性分級(jí)停藥后 7d，各劑量組無(wú)死亡動(dòng)物 未見蓄積性高劑量組有動(dòng)物死亡，其他組無(wú)動(dòng)物死亡 弱蓄積性低劑量組無(wú)動(dòng)物死亡，其他組有動(dòng)物死亡 中等蓄積性各劑量組有動(dòng)物死亡，并呈劑量反響關(guān)系 強(qiáng)蓄積性第八十六 頁(yè) ，共八十八 頁(yè) 。 我國(guó) 消毒劑 蓄積性評(píng)定標(biāo)準(zhǔn) 蓄積系數(shù) (K) 蓄積毒性分級(jí) ＜ 1 極強(qiáng)蓄積性 1? 強(qiáng)蓄積性 3? 中等蓄積性 5? 弱蓄積性 第八十四 頁(yè) ，共八十八 頁(yè) 。輕度蓄積性 3~明顯蓄積性＜ 1蓄積毒性分級(jí) 我國(guó) 農(nóng)藥 蓄積性評(píng)定標(biāo)準(zhǔn) 蓄積系數(shù) (K)88累積接觸總劑量 (LD50)4日接觸總劑量 (LD50)每日接觸劑量 (LD50)21~2417~2013~16接觸天數(shù) 劑量遞增法 ( )使用劑量表 根本方法： ① 求出化學(xué)物 1次染毒的 LD50(1)值； ② 測(cè)定另一組動(dòng)物 LD50(n)； 以 4天為一周期，在同一周期劑量相同，下一周期為上一周期劑量的 ，第一周期每天劑量為 LD50(1)，直至受試動(dòng)物死亡一半為止，計(jì)算總劑量即 LD50(n)； ③ 如果到 28天，死亡動(dòng)物仍未達(dá)一半，可停止試驗(yàn)，這時(shí)總劑量達(dá) (1),可認(rèn)為無(wú)蓄積性。 根本方法： ① 求出化學(xué)物 1次染毒的 LD50(1)值； ② 對(duì)另一組動(dòng)物每天給予 1/10 LD50(1)劑量直至受試動(dòng)物死亡一半為止，計(jì)算所用總劑量即 LD50(n)； ③ 如果到 50天死亡動(dòng)物仍未達(dá)一半，停止試驗(yàn)〔達(dá) 5個(gè)LD50(1)劑量〕，這時(shí)可判斷為輕度蓄積作用。根據(jù) K值的大小判斷化學(xué)物蓄積作用的強(qiáng)弱， K值越小蓄積毒性越大。 蓄積系數(shù)法 蓄積系數(shù)是指屢次染毒所產(chǎn)生的毒效應(yīng) (ED50(n)或 LD50(n))與一次染毒所產(chǎn)生相同毒效應(yīng) (ED50(1)或 LD50(1))的比值。為其他相關(guān)毒性試驗(yàn)的劑量設(shè)計(jì)提供依據(jù)。第七十七 頁(yè) ，共八十八 頁(yè) 。 又如工業(yè)化學(xué)物毒物的慢性毒性試驗(yàn)： NOAEL值越小，慢性中毒的危險(xiǎn)性越大，制定平安限值〔衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)〕應(yīng)越嚴(yán)格〔即平安系數(shù)要大〕。時(shí)，不必進(jìn)行慢性試驗(yàn)，即可進(jìn)行平安性評(píng)價(jià)。 要與正常對(duì)照組比較，作統(tǒng)計(jì)學(xué)處理分析： 效應(yīng)〔反響〕關(guān)系趨勢(shì)； 〔毒性 “ 三個(gè)重現(xiàn)〞〕； ； ； ； ； 〔有助于排除假陽(yáng)性〕第七十四 頁(yè) ，共八十八 頁(yè) 。 〔同亞慢性試驗(yàn)〕第七十三 頁(yè) ，共八十八 頁(yè) 。劑量組距一般為 24倍， ≯10 倍。 根據(jù) “3R 〞原那么，慢性毒性試驗(yàn)與致癌試驗(yàn)合并。第七十二 頁(yè) ，共八十八 頁(yè) 。 如果設(shè)計(jì)恢復(fù)期觀察：如果設(shè)計(jì)恢復(fù)期觀察： 28天亞急性毒性試驗(yàn)：衛(wèi)星觀察期天亞急性毒性試驗(yàn)：衛(wèi)星觀察期 14天；天； 90天亞慢性毒性試驗(yàn)：衛(wèi)星觀察期天亞慢性毒性試驗(yàn)：衛(wèi)星觀察期 28天；天； 觀察目的：觀察目的： ① 毒性可逆性；毒性可逆性； ② 毒性持續(xù)性；毒性持續(xù)性； ③ 毒性遲發(fā)效應(yīng)等；毒性遲發(fā)效應(yīng)等； 觀察要求：觀察要求： 至少每天觀察一次，詳細(xì)記錄中毒病癥、體征、毒至少每天觀察一次，詳細(xì)記錄中毒病癥、體征、毒 效應(yīng)性質(zhì)、毒性持續(xù)時(shí)間、死亡等情況。第七十 頁(yè) ，共八十八 頁(yè) 。 ① 一般觀察指標(biāo)〔中毒病癥〕；一般觀察指標(biāo)〔中毒病癥〕； ② 體重、食物消耗量與飲水消耗量；體重、食物消耗量與飲水消耗量； ③ 眼部觀察；眼部觀察； ④ 血液學(xué)指標(biāo)；血液學(xué)指標(biāo)； ⑤ 血液生化指標(biāo)；血液生化指標(biāo)； ⑥ 尿常規(guī)指標(biāo)；尿常規(guī)指標(biāo)； ⑦ 體溫與心電圖檢查；體溫與心電圖檢查； ⑧ 病理學(xué)檢查〔大體解剖與組織病理學(xué)檢查〕；病理學(xué)檢查〔大體解剖與組織病理學(xué)檢查〕； ⑨ 特異性指標(biāo)〔效應(yīng)標(biāo)志物〕。 應(yīng)能觀察到受試物的靶器官和敏感毒性指標(biāo)。 藥品：藥品： 大鼠可用人臨床擬用劑量的 100倍，非嚙齒類動(dòng)物可用 1 50倍的劑量進(jìn)行劑量設(shè)置； 食品：食品： 試驗(yàn)劑量應(yīng)涵蓋人體預(yù)期攝入量的 100倍，在不影響營(yíng)養(yǎng)攝食與營(yíng)養(yǎng)平衡情況下，高劑量組可按最大給予量設(shè)計(jì)。劑量組設(shè)計(jì)應(yīng)注意的問題：劑量組設(shè)計(jì)應(yīng)注意的問題： ① 以急性毒性試驗(yàn)中同一動(dòng)物品系和同一染毒途徑獲得的 LD50為依據(jù)； 如 28天經(jīng)口毒性試驗(yàn)可按 LD50的 1025%作為最高劑量，最低劑量應(yīng)是人體預(yù)期實(shí)際攝入量 3倍以上。倍。組〞。 應(yīng)盡量與人實(shí)際接觸相似的途徑；染毒頻率一般為每日應(yīng)盡量與人實(shí)際接觸相似的途徑；染毒頻率一般為每日 1次，次，連續(xù)給予〔每周可給予連續(xù)給予〔每周可給予 56次〕次〕 〔〔 1〕經(jīng)口染毒〕經(jīng)口染毒 ① 灌胃法灌胃法 大小鼠大小鼠 ② 喂飼法喂飼法 大小鼠〔受試物在飼料一般大小鼠〔受試物在飼料一般 ≯5% 〕〕 ③ 吞咽膠囊法吞咽膠囊法 犬犬 〔〔 2〕呼吸道染毒〕呼吸道染毒 每天染毒時(shí)間每天染毒時(shí)間 26小時(shí)〔小時(shí)〔 OECD：為持續(xù)：為持續(xù) 4小時(shí)染毒〕小時(shí)染毒〕 〔〔 3〕注射途徑〕注射途徑 應(yīng)注意無(wú)菌操作應(yīng)注意無(wú)菌操作 染毒期限：短期重復(fù)暴露染毒期限：短期重復(fù)暴露 28天；亞慢性暴露天；亞慢性暴露 90天天第六十七 頁(yè) ，共八十八 頁(yè) 。 〔 3〕動(dòng)物等級(jí)與飼養(yǎng)條件 清潔級(jí)及以上等級(jí)動(dòng)物，屏障環(huán)境飼養(yǎng)，飼料、飲水、墊料、氣溫、氣濕、壓力、光照等符合 GLP要求。二、研究方法〔一〕短期重復(fù)毒性和亞慢性毒性試驗(yàn)根本要求： 〔 1〕物種與品系 ① 嚙齒類動(dòng)物〔首選大鼠，品系 Wister與 SD大鼠〕 ② 非嚙齒類動(dòng)物〔犬，品系 Beagle〕 〔 2〕性別、年齡和動(dòng)物數(shù) 雌雄各半；大鼠年齡一般 ≯6 周，體重 50100克，每組動(dòng)物 ≮20 只。人，確定平安系數(shù)提供依據(jù)。短期、亞慢性和慢性毒性作用第六十四 頁(yè) ，共八十八 頁(yè) 。一、概述 重復(fù)屢次接觸化學(xué)物的毒性研究。第六十二 頁(yè) ，共八十八 頁(yè) 。天。末次致。復(fù)一次。第后去除敷貼及受試物。第六十 頁(yè) ，共八十八 頁(yè) 。 試驗(yàn)方法： ① 局部封閉涂皮法〔 Buehler Test〕〔傳統(tǒng)方法〕 ② 豚鼠最大值試驗(yàn)〔 guinea pig maximization test〕 用完全福氏佐劑，皮內(nèi)注射?！碴?yáng)性物 2,4二硝基氯苯〕 第五十九 頁(yè) ，共八十八 頁(yè) 。 受試動(dòng)物：豚鼠，每組動(dòng)物 10~20只。 在人身上有