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基礎(chǔ)分子生物學(xué)(參考版)

2025-01-09 01:58本頁面
  

【正文】 愿大家早日掌握分子生物學(xué)這把金鑰匙 ,為祖國繁榮富強(qiáng) , 為人類的文明和進(jìn)步做出新貢獻(xiàn) ! 本 章 參 考 文 獻(xiàn) J. D. Watson and F. H. C. Crick, A Structure for Deoxyribose Nucleic Acid. April 25, 1953 Nature 171, 737738. Wilkins et al., Nature 171, 738740, 1953 Watson Crick, Nature 171, 737738, 1955 Meselson Stahl, PNAS 44, 671682, 1958 Crick et al., Nature 192, 12271232, 1961 Avery et al., J. Exp. Med., 79, 197158, 1944 Hershey Chase, J. Gen. Physiol., 36, 3956, 1952 謝謝觀看 /歡迎下載 BY FAITH I MEAN A VISION OF GOOD ONE CHERISHES AND THE ENTHUSIASM THAT PUSHES ONE TO SEEK ITS FULFILLMENT REGARDLESS OF OBSTACLES. BY FAITH I BY FAITH 。 A draft sequence of the rice genome (Oryza sativa L. ssp. indica). Science, 2023, 296:7992. Yu et al., Beijing Genomics Institute/Center of Genomics and Bioinformatics, Chinese Academy of Sciences, Beijing 101300, China. 要學(xué)好分子生物學(xué) , 除了在書本上下功夫 ,理解并掌握其基本規(guī)律之外 , 一定要跟蹤和研究最新的科技文獻(xiàn) , 因?yàn)檫@些新發(fā)現(xiàn) 、 新進(jìn)展往往對(duì)于詮釋學(xué)習(xí)中碰到的疑難問題有著舉一反三 、 畫龍點(diǎn)睛的作用 。 基因組是生物體內(nèi)遺傳信息的集合,是某個(gè)特定物種細(xì)胞內(nèi)全部 DNA分子的總和。 研究三維結(jié)構(gòu)的主要方法 ? X射線衍射的晶體學(xué)(又稱蛋白質(zhì)晶體學(xué)) ? 二維和多維核磁共振法液相結(jié)構(gòu) ? 電鏡三維重組、電子衍射、中子衍射和各種頻譜學(xué)方法研究生物高分子的空間結(jié)構(gòu)。 (2)結(jié)構(gòu)運(yùn)動(dòng)變化規(guī)律的探索 。 3. RNA剪接 ? 當(dāng)真核基因轉(zhuǎn)錄成 premRNA后,除了在 5’端加帽及 3‘端加多聚 A(poly(A))之外,還要切去隔開各個(gè)相鄰編碼區(qū)的內(nèi)含子,使外顯子相連后成為成熟 mRNA。 ? 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)之所以能引起細(xì)胞功能的改變,主要是由于信號(hào)最后活化了某些蛋白質(zhì)分子,使之發(fā)生構(gòu)型變化,從而直接作用于靶位點(diǎn),打開或關(guān)閉某些基因。 基因表達(dá)實(shí)質(zhì)上就是遺傳信息的轉(zhuǎn)錄和翻譯過程。 重組 DNA操作過程示意圖 ? 可被用于大量生產(chǎn)某些在正常細(xì)胞代謝中產(chǎn)量很低的多肽; ? 可用于定向改造某些生物的基因組結(jié)構(gòu),使它們所具備的特殊經(jīng)濟(jì)價(jià)值或功能得以成百上千倍地提高; ? 可被用于進(jìn)行基礎(chǔ)研究。 b. DNA的平末端 。 通過 DNA連接酶把不同的 DNA片段連接成一個(gè)整體 。 具備自主復(fù)制能力的 DNA分子就是分子克隆的載體( vector)。 第一個(gè)核酸內(nèi)切酶 EcoRI是 Boyer實(shí)驗(yàn)室在1972年發(fā)現(xiàn)的 , 它能特異性識(shí)別 GAATTC序列 , 將雙鏈 DNA分子在這個(gè)位點(diǎn)切開并產(chǎn)生具有粘性末端的小片段 。由于插入了溴化乙錠分子 , 在紫外光照射下 , 瓊脂糖凝膠電泳中 DNA的條帶便呈現(xiàn)出橘黃色熒光 , 易于鑒定 。 在凝膠電泳中 , 加入溴化乙錠 ( ethidium bromide,EtBr) 染料對(duì)核酸分子進(jìn)行染色 , 然后放置在紫外光下觀察 , 可靈敏而快捷地檢測出凝膠介質(zhì)中 DNA的譜帶部位 , 即使每條 DNA帶中僅含有 g的微量 DNA, 也可以被清晰地檢測出來 。 核酸的凝膠電泳 一種分子被放置到電場中 , 它就會(huì)以一定的速度移向適當(dāng)?shù)碾姌O 。 基因工程技術(shù)是核酸操作技術(shù)的一部分,只不過它強(qiáng)調(diào)了外源核酸分子在另一種不同的寄主細(xì)胞中的繁衍與性狀表達(dá)。 ? DNA重組技術(shù)是核酸化學(xué)、蛋白質(zhì)化學(xué)、酶工程及微生物學(xué)、遺傳學(xué)、細(xì)胞學(xué)長期深入研究的結(jié)晶,而限制性內(nèi)切酶、 DNA連接酶及其他工具酶的發(fā)現(xiàn)與應(yīng)用則是這一技術(shù)得以建立的關(guān)鍵。 分子生物學(xué)研究的基本定理 : 中都是相同的; 同的規(guī)則 ; 子決定了它的屬性 。 ? 20世紀(jì)中下葉,我國科學(xué)家相繼實(shí)現(xiàn)了人工全合成有生物學(xué)活性的結(jié)晶牛胰島素,解出了三方二鋅豬胰島素的晶體結(jié)構(gòu),采用有機(jī)合成與酶促相結(jié)合的方法完成了酵母丙氨酸轉(zhuǎn)移核糖核酸的人工全合成。 (誰能想到!)。溶解纖維狀物質(zhì)并重復(fù)沉淀數(shù)次,可提高其純度。 導(dǎo)入 DNA的表達(dá)將使細(xì)胞產(chǎn)生一些新的特性。如果侵染細(xì)菌后讓噬菌體復(fù)制一代,那么,新生代噬菌體中 30%的DNA鏈上帶有 32P標(biāo)記,而噬菌體總蛋白中只有不到 1%仍帶有 35S標(biāo)記。 DNA也是病毒的遺傳物質(zhì) 噬菌體侵染細(xì)菌的主要過程如下: ①噬菌體尾部的末端(基片、尾絲)吸附在細(xì)菌表面; ②噬菌體通過尾軸把 DNA全部注入細(xì)菌細(xì)胞內(nèi),噬菌體的蛋白質(zhì)外殼則留在細(xì)胞外面; ③利用細(xì)菌的生命過程合成噬菌體自身的 DNA和蛋白質(zhì); ④用新合成的 DNA和蛋白質(zhì)
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