分子生物學檢查(參考版)
2024-12-30 03:46本頁面
【正文】 這種在同種生物不同個體間出現不同長度限制性片段類型，就是限制性片段多態(tài)性（ RFLP） 限制性片段長度多態(tài)性分析 人類基因組存在兩類多態(tài)性： 1 限制性內切酶酶切位點改變造成的 RFLP 2 串聯(lián)重復順序拷貝數不同造成的多態(tài)性）VNTR） RFLP可用于遺傳病的產前診斷等 謝謝觀看 /歡迎下載 BY FAITH I MEAN A VISION OF GOOD ONE CHERISHES AND THE ENTHUSIASM THAT PUSHES ONE TO SEEK ITS FULFILLMENT REGARDLESS OF OBSTACLES. BY FAITH I BY FAITH 。長度為 1525bp時，退火溫度可根據 Tm=4（ G+C）+2（ A+T） （ 3）延伸溫度與時間 72 176。在各種 dNTP濃度為 200 ?mol/L時 Mg2+為 合適 聚合酶鏈式反應（ PCR） 4 dNTP 濃度 常采用 50200 ?mol/L的 dNTP 4種 dNTP濃度要一致 5 Taq DNA聚合酶用量 在 100 ?l 總反應液中，一般所需 Taq DNA聚合酶用量為 U，通常加入 U，足以達到每分鐘延伸 10004000個核苷酸速度 聚合酶鏈式反應（ PCR） 6 循環(huán)參數 （ 1）變性溫度與時間 94 176。 PCR全過程由 DNA模板變性 、 模板與引物結合及 引物延伸 三個步驟組成 聚合酶鏈式反應（ PCR） PCR反應的原理示意圖 1 DNA模板變性 2 模板與引物結合 3 引物延伸 聚合酶鏈式反應（ PCR） PCR條件的優(yōu)化 1 模板核酸： 來源廣泛、需部分純化、去除 DNA聚合酶抑制劑 一般宜用 ng級的克隆 DNA， ?g水平的染色體 DNA或 104拷貝的待擴增模板 用于檢測目的，擴增片段長度一般不超過 500bp，以 100300bp為好 2 引物 應純化，濃度不宜過高 一般終濃度為 ?mol/L 聚合酶鏈式反應（ PCR） 3 緩沖液 目前最常用 PCR反應的緩沖液體系為 1050mmol/L TrisHCl （ ， 20176。人類指23對染色體中的所有基因 基因及其表達調控 基因表達調控： 多層次 DNA及染色體水平 轉錄水平 轉錄后水平 翻譯水平 蛋白質加工水平 三、人類基因缺陷的主要類型 突變 指突變體中 DNA結構的任何改變，致使基因作用（結構蛋白、酶等），以致個體表型改變 （一）點突變：單個核苷酸的置換 （ 1）同義突變： GAU GAC 均是天門冬氨酸 密碼子 （ 2）錯義突變：翻譯出的氨基酸改變 （ 3）無義突變：產生提前出現的終止密碼子 （ 4）延長突變：終止密碼子突變?yōu)榘被崦艽a子 人類基因缺陷的主要類型 （二）
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