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蛋白質(zhì)4生物化學(xué)復(fù)習(xí)資料(參考版)

2024-12-31 19:38本頁面
  

【正文】 胃液( pH= )的胃蛋白酶的等電點(diǎn)約為 1,遠(yuǎn)比其它蛋白質(zhì)低。 ( d)含有分支的脂肪族烴鏈。 ( b)含有一個(gè)氨基。凡分子中含有兩個(gè)以上- CO- NH-肽鍵的化合物都呈此反應(yīng) ⑵雙縮脲反應(yīng) (Biuret Reaction) 蛋白質(zhì)的分類 按形狀可分為 按分子組成分為 球狀蛋白質(zhì) 纖維狀蛋白質(zhì) 簡單蛋白質(zhì) 結(jié)合蛋白質(zhì) 一、簡單蛋白質(zhì) 簡單蛋白質(zhì)完全水解的產(chǎn)物為 ?-氨基酸,不含其它物質(zhì) 二、結(jié)合蛋白質(zhì) 結(jié)合蛋白質(zhì)=簡單蛋白質(zhì)+非蛋白質(zhì)組分(輔基) 糖蛋白( glycoprotein) 脂蛋白( lipoprotein) 色蛋白( chromoprotein) 核蛋白 (nucleoprotein) 磷蛋白 (phosphoprotein) 金屬蛋白( metalloprotein) 氨基酸的側(cè)鏈對多肽或蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)和生物學(xué)功能非常重要。 蛋白質(zhì)的 OD280與其濃度呈正比關(guān)系 , 因此可作蛋白質(zhì)定量測定 。 變性的本質(zhì) 破壞非共價(jià)鍵和二硫鍵,不改變蛋白質(zhì)的一級結(jié)構(gòu) 蛋白質(zhì)的變性 (denaturation) 蛋白質(zhì)的變性伴有的表現(xiàn) ⑴喪失生物活性 ⑵溶解度降低,粘度增大,擴(kuò)散系數(shù)變小 ⑶某些原來埋藏再蛋白質(zhì)分子內(nèi)部的疏水側(cè)鏈基團(tuán)暴露于變性蛋白質(zhì)表面,導(dǎo)致光學(xué)性質(zhì)變化 ⑷對蛋白酶降解的敏感性增大 復(fù)性 若蛋白質(zhì)變性程度較輕,去除變性因素后,蛋白質(zhì)仍可恢復(fù)或部分恢復(fù)其原有的構(gòu)象和功能,稱為復(fù)性 (renaturation) 。 pH=pI 凈電荷 =0 pHpI 凈電荷為負(fù) Pr COOH NH3+ + H+ + OH + H+ + OH Pr COO NH2 Pr COO NH3+ pHpI 凈電荷為正 電泳:在外電場的作用下,帶電顆粒,將向著與其電性相反的電極移動(dòng)。 ?一個(gè) S單位,為 1 1013秒 ?相對分子質(zhì)量越大, S值越大 ?蛋白質(zhì)的沉降系數(shù): 1~ 200S 2 凝膠過濾法 (ρ35) 葡聚糖凝膠珠 基于蛋白質(zhì)分子在 大小 和 形狀 的差異 蛋白質(zhì)電泳 —— SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳法 (ρ38) 聚丙烯酰胺凝膠:大小、形狀和電荷數(shù)量 SDS聚丙烯酰胺凝膠:大小 帶負(fù)電( SDS帶負(fù)電) 荷質(zhì)比相同(分子大,結(jié)合SDS多;分子小,結(jié)合 SDS少) 棒狀 十二烷基硫酸鈉 十二烷基硫酸鈉 用 SDSPAGE測定蛋白質(zhì)的相對分子質(zhì)量 雙向電泳 二、蛋白質(zhì)的兩性解離及等電點(diǎn) 當(dāng)?shù)鞍踪|(zhì)溶液處于某一 pH時(shí) , 蛋白質(zhì)解離成正 、 負(fù)離子的趨勢相等 , 即成為
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