蛋白質(zhì)聚焦層析(參考版)
2024-08-27 00:21本頁面
【正文】 ? 洗脫液 ， 流速為 ， 即可達(dá)到兩者的分離 ? 13分鐘時得到的是 β乳球蛋白 A， 16分鐘是 β乳球蛋白 B 洗脫曲線 L/O/G/O Thank You! 。尤其對用其他的層析方法難以分離的混合物，采用此法可得到較好的效果 昆蟲谷胱甘肽 S轉(zhuǎn)移酶 β乳球蛋白 A型和 B型的分離人血清載脂蛋白 CⅢ 亞型 的分離1 2 3 人血清載脂蛋白 CⅢ 亞型的分離 ? 華西醫(yī)科大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院方定志等利用此方法分離了人血清載脂蛋白 CⅢ 亞型 ? 他們用密度梯度超速離心法 ,從混合人血清中分離極低密度脂蛋白 ， 經(jīng)脫脂后再進(jìn)行聚焦層析分離其中的載脂蛋白 。 這時用 硫酸銨沉淀法 ， 凝膠過濾法或親和層析法 等都可以將蛋白與多緩沖液分開 。當(dāng)流出液 pH與起始緩沖液 pH相同即可上樣 ? 樣品溶在所選擇的多緩沖液中，再用同樣的多緩沖液洗脫。也可用公司配套提供的聚焦層析試劑箱測定 pI ? 一旦決定了 pl，就可選擇了 緩沖液和交換樹脂的選擇 ? 交換樹脂量的選擇是取決于樣品數(shù)量，樣品性質(zhì)和雜質(zhì)多少等，一般 20~30毫升床體積可分離 1200毫克蛋白 /pH單位 操作 ? 先將懸浮的多緩沖液交換樹脂裝柱。 pH梯度溶液的形成 ? 但是隨著淋洗的進(jìn)行， pH梯度會逐漸向下遷移，從 底部流出液 的 pH卻由 9逐漸降至 6，并最后恒定于此值，這時層析柱的 pH梯度也就消失了 蛋白質(zhì)的行為 ? 蛋白質(zhì)所帶電荷取決于它的等電點（ pI）和層析柱中的 pH值 ? 當(dāng)柱中的 pH低于蛋白質(zhì)的 pI時，蛋白質(zhì)帶 正電荷 ，且不與陰離于交換劑結(jié)合。L/O/G/O 蛋白質(zhì)聚焦層析 谷春嬌 馬力 任重 王聰 定義 ? 聚焦層析是一種操作簡單、廉價的 柱層析 技術(shù) ? 其流動相為 多緩沖 液 ，固定相為 多緩沖交換劑 ? 利用層析過程中固定相偶聯(lián)的 具有兩性解離功能的有機(jī)分子 為配基，與流動
環(huán)評公示相關(guān)推薦
鄂ICP備17016276號-1