凝膠過濾層析法測定蛋白質(zhì)分子量(參考版)
2025-05-16 07:50本頁面
【正文】 樣品 Mr 1gMr Ｖ e Ｖ ０ Vt Kav 牛血清蛋白 67， 000 雞卵清蛋白 45， 000 溶菌酶 14， 300 待測雞卵粘蛋白樣品 六、實(shí)驗(yàn)結(jié)果與分析 實(shí)驗(yàn)結(jié)果填入表中 結(jié)果分析 繪制 藍(lán)色葡聚糖 洗脫曲線 繪制 標(biāo)準(zhǔn)蛋白質(zhì) 洗脫曲線 繪制 雞卵粘蛋白 樣品 洗脫曲線 繪制 lgMrKav標(biāo)準(zhǔn)曲線 ,確定待測 樣品 雞卵粘蛋白 相對分子質(zhì)量 . 謝謝同學(xué)們 。 四、標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作 五、未知樣品蛋白質(zhì)分子量的測定 將待測 待測雞卵粘蛋白樣品 配制成 5mg/mL溶液 ,以下步驟完全按照標(biāo)準(zhǔn)曲線的條件操作。 代入公式 計(jì)算出各標(biāo)準(zhǔn)蛋白質(zhì)的Kav值。 2） 按上述方法 加入 1mL標(biāo)準(zhǔn)蛋白質(zhì)混合液，以 3mL/10min 的速度洗脫并收集洗脫液體積。 收集 藍(lán)色葡聚糖 2021洗脫峰 ，測出洗脫體積 Ve ， 得出 Vo值 。 三、 Vo 的測定 打開柱上端的塞子，待柱內(nèi)洗脫液下降至與凝膠膠面相切時(shí)，關(guān)閉出水口。 3）向柱內(nèi) 加入約 1/4柱體積的洗脫液 ，將濃漿狀的凝膠緩慢地傾入柱中，使之 自然沉降 ，凝膠沉降約 2～ 3㎝ 高度后打開出水口，待膠面上升到柱記號處時(shí)則裝柱完畢。 二、裝柱 1） 取潔凈的玻璃層析柱垂直固定在鐵架臺(tái)上。Sephadex G25～ 200 數(shù)字是吸水率 10 例如 Sephadex G75 吸水率 177。 吸水
教學(xué)課件相關(guān)推薦
鄂ICP備17016276號-1