生物化學(xué)技術(shù)補(bǔ)充1-吸收光譜分析法(參考版)
2024-08-05 15:29本頁面
【正文】 當(dāng)入射光通過時(shí)，如果顆粒直徑比入射光的波長小很多，則散射光比較均勻的分布于顆粒的四周，稱為 Rayleigh散射 ；如果顆粒直徑遠(yuǎn)遠(yuǎn)地大于入射光的波長，則散射光的分布呈明顯不勻稱為 Mie散射 抗原 — 抗體結(jié)合反應(yīng)中，遵守典型的 Heidelberger曲線 (二 )免疫透射比濁分析 原 理 試驗(yàn)中設(shè)計(jì)檢測 抗體 過量，待測樣品中的 Ig在反應(yīng)介質(zhì)中與相應(yīng)的檢測抗體發(fā)生 抗原 — 抗體 反應(yīng)，形成不溶性 復(fù)合物 ，在聚乙二醇 (PEG)的作用下，加速抗原 抗體復(fù)合物的形成并增加其穩(wěn)定性，使 反應(yīng)介質(zhì)的濁度發(fā)生改變 ，利用分光光度計(jì)測定光線被吸收的量，待測 樣本的抗原含量與吸光度成正比，光通量與抗原含量成反比 。 ① 當(dāng)熒光物質(zhì)濃度高時(shí)，分子間碰撞增加，使熒光強(qiáng)度減弱 ；另外， ② 濃度較大時(shí)，激發(fā)光被表面的熒光物質(zhì)所吸收，產(chǎn)生強(qiáng)烈的熒光，以致使后面的溶液不易受照射而不發(fā)光 大多數(shù)情況下，溫度升高，分子間碰撞次數(shù)便增加，消耗分子的內(nèi)部能量而產(chǎn)生自熄滅現(xiàn)象；溫度降低時(shí)，則熒光強(qiáng)度增大 (三 )熒光分析技術(shù)的應(yīng)用 熒光分析法靈敏度高、取樣量少，廣泛應(yīng)用于各領(lǐng)域，在生化技術(shù)領(lǐng)域主要用于糖類、胺類、甾族化合物、 DNA與 RNA、酶與輔酶、維生素等物質(zhì)的分析 測定熒光強(qiáng)度常用熒光分光光度計(jì)，它主要包括激發(fā)光源、一對單色器、比色杯和檢測器等部件 熒光物質(zhì)的激發(fā)光譜和熒光光譜 激發(fā)光譜與熒光光譜 激發(fā)光譜（吸收光譜） 熒光物質(zhì)吸收紫外光后被激發(fā)出熒光，如果將激發(fā)光的光源用單色器使其分光后，測定在每一波長的激發(fā)光照射下，物質(zhì)發(fā)射的熒光，以熒光強(qiáng)度對激發(fā)光波長作圖，得到熒光物質(zhì)的激發(fā)光譜 熒光光譜（發(fā)射光譜） 如果使激發(fā)光的波長和強(qiáng)度保持不變，而讓物質(zhì)所發(fā)生
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