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實驗——基因組抽提(參考版)

2025-07-28 05:28本頁面
  

【正文】 ? EB有毒,勿將溶液滴灑在臺面或地面上,切勿用裸露皮膚接觸 EB及含有 EB的溶液和試劑。 ? 基因組的提取過程中, DNA會發(fā)生機械斷裂產(chǎn)生大小不同的片段,應注意溫和操作,以保證得到較長的DNA。 ? 微量移液器的正確使用。 DNA存在的位置呈現(xiàn)橙黃色熒光。維持恒壓 80 V,電泳 - 1 h,直到溴酚蘭指示劑移動到凝膠底部,停止電泳。每加完一個樣品,換一個吸頭。 2. 加樣:用微量移液器取 5?L DNA Marker,小心地加到最靠邊上的加樣孔內。在室溫放置一段時間,待凝膠全部凝結后,輕輕拔出樣品梳,在凝膠板上即形成相互隔開的加樣孔。 8. 用電吹風小心吹干,用 50 μL無菌雙蒸水溶解 DNA。 7. 沉淀用 400 μL 70%的乙醇洗滌兩次。 5. 將上清轉移到新離心管中,加入等體積的苯酚 /氯仿 /異戊醇(25/24/1 v/v/v),充分混勻后, 12022 rpm離心 3 min。 3. 裂解菌體:向每管加入 200 μL裂解緩沖液,用微量移液器吸頭強烈抽吸以懸浮和裂解細菌細胞。 操作步驟 —— 細菌總 DNA的提取 1. 菌體培養(yǎng):接種大腸桿菌 K12s于
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