【正文】 。結(jié)果四：陽性對(duì)照孔由橙黃色變成紅色示支原體陽性，藥敏看結(jié)果判斷；第24 小時(shí)、48 小時(shí)觀察B1 孔、B2 孔均不變色，示無解脲、人型支原體生長或濃度極低，報(bào)告培養(yǎng)出非解脲、人型支原體或囑病人重留標(biāo)本復(fù)查。報(bào)告未培養(yǎng)出解脲支原體，培養(yǎng)出人型支原體附藥敏結(jié)果。結(jié)果一：第24 小時(shí)B1 孔由橙黃色變成紅色示解脲支原體陽性，藥敏看結(jié)果判斷；第24 小時(shí)、48 小時(shí)觀察B2 孔均不變色，示無人型支原體生長或濃度極低，報(bào)告培養(yǎng)出解脲支原體，未培養(yǎng)出人型支原體。藥敏孔A 排為高濃度，B 排為低濃度，變紅則耐藥，不變紅示敏感而不生長。培養(yǎng)基不變色為陰性。第248 小時(shí)分別觀察記錄結(jié)果。A 排第一孔加入培養(yǎng)液100μL 作為陰性對(duì)照；將標(biāo)本拭子直接放入培養(yǎng)液中充分振蕩并在瓶壁擠干拭子，若為男性尿液取離心沉淀物150μL 或陽性標(biāo)本取50μL 于培養(yǎng)液中混勻。支原體培養(yǎng)檢驗(yàn)操作程序一、接收標(biāo)本：標(biāo)本與檢驗(yàn)單查對(duì)正確，標(biāo)本質(zhì)量合格。標(biāo)本處理、檢驗(yàn)與結(jié)果報(bào)告：液性引流標(biāo)本(如腹水、尿液、CSF 等)直接離心留沉淀物，雜菌污染標(biāo)本(如大便、痰等)取樣置無菌管，加入1N NaOH1ml 作用30 分鐘，再加入1N HCl1ml 中和，3000 轉(zhuǎn)/分鐘離心5 分鐘，取沉淀物100μl 量接種羅氏培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)。培養(yǎng)第2472 小時(shí)觀察各平板上有否出現(xiàn)可疑菌落，若繼續(xù)培養(yǎng)至第5 天未見可疑菌落，則報(bào)告未培養(yǎng)出奈瑟氏菌、嗜血桿菌等苛養(yǎng)菌。培養(yǎng)第2472 小時(shí)觀察各平板上有否出現(xiàn)可疑菌落，若繼續(xù)培養(yǎng)至第5 天未見可疑菌落，則報(bào)告未培養(yǎng)出弧菌、螺桿菌等細(xì)菌。5)糞便或肛拭子等腸道標(biāo)本 以無菌接種環(huán)桃取可疑處標(biāo)本涂于血平板、布氏血平板成原始線，再分離畫線后置于C02 缸，放入35℃溫箱培養(yǎng)。4)痰液或咽拭子標(biāo)本 無菌接種環(huán)可疑處采樣涂于普通血平板、巧克力(含V、X 因子)平板原始線，再畫線分離后置C02 缸， 35℃溫箱培養(yǎng)。3)引流液 標(biāo)本3000 轉(zhuǎn)/分離心5 分鐘，取離心沉淀物，接種環(huán)取樣畫線分離接種普通血平板、巧克力(含V、X 因子)平板，置C02 缸，35℃溫箱培養(yǎng)。2)尿液標(biāo)本 取5ml 尿液,3000 轉(zhuǎn)/分離心5 分鐘，取離心沉淀物，接種環(huán)取樣涂于普通血平板、巧克力(含V、X 因子)平板成原始線，再畫線分離后置C02 缸，35℃溫箱培養(yǎng)。標(biāo)本處理、檢驗(yàn)與結(jié)果報(bào)告：1)拭子、分泌物標(biāo)本 標(biāo)本涂于普通血瓊脂平板、巧克力(含V、X 因子)平板成原始線，再以無菌接種環(huán)畫線分離后置C02 缸，35℃溫箱培養(yǎng)。培養(yǎng)第2472 小時(shí)觀察平板上有否出現(xiàn)可疑菌落，若繼續(xù)培養(yǎng)至第4 天未見可疑菌落，則報(bào)告未培養(yǎng)出真菌。培養(yǎng)第2472 小時(shí)觀察平板上有否出現(xiàn)可疑菌落，若繼續(xù)培養(yǎng)至第4 天未見可疑菌落，則報(bào)告未培養(yǎng)出真菌。培養(yǎng)第2472 小時(shí)觀察平板上有否出現(xiàn)可疑菌落，若繼續(xù)培養(yǎng)至第4 天未見可疑菌落，則報(bào)告未培養(yǎng)出真菌。培養(yǎng)第2472 小時(shí)觀察平板上有否出現(xiàn)可疑菌落，若繼續(xù)培養(yǎng)至第4 天未見可疑菌落，則報(bào)告未培養(yǎng)出真菌。培養(yǎng)第2472 小時(shí)觀察平板上有否出現(xiàn)可疑菌落，若繼續(xù)培養(yǎng)至第4 天未見可疑菌落，則報(bào)告未培養(yǎng)出真菌。培養(yǎng)第2472 小時(shí)觀察平板上有否出現(xiàn)可疑菌落，若繼續(xù)培養(yǎng)至第4 天未見可疑菌落，則報(bào)告未培養(yǎng)出真菌。真菌培養(yǎng)陰性操作程序仔細(xì)查對(duì)標(biāo)本標(biāo)簽與檢驗(yàn)單是否正確，標(biāo)本質(zhì)量是否合格，若收檢標(biāo)本與檢驗(yàn)單查對(duì)正確，標(biāo)本質(zhì)量合格則進(jìn)行接收檢驗(yàn)，否則查找原因并在有關(guān)記錄本上記錄。6)留置針頭、小導(dǎo)管等標(biāo)本 標(biāo)本置無菌管中，加入增菌液2ml，35℃溫箱培養(yǎng)48 小時(shí)觀察培養(yǎng)液有無混濁，采樣涂于普通血平板、麥康凱平板成原始線，再以無菌接種環(huán)畫線分離后置35℃溫箱培養(yǎng)。5)糞便或肛拭子等腸道標(biāo)本 以無菌接種環(huán)桃取可疑處標(biāo)本涂于普通血平板、麥康凱平板成原始線，再以無菌接種環(huán)畫線分離后置35℃溫箱培養(yǎng)。4)痰液或咽拭子標(biāo)本 無菌接種環(huán)可疑處采樣涂于普通血平板、麥康凱平板成原始線，再以無菌接種環(huán)畫線分離后置35℃溫箱培養(yǎng)。3)引流液 標(biāo)本3000 轉(zhuǎn)/分離心5 分鐘，取離心沉淀物，接種環(huán)取樣涂于普通血平板、麥康凱平板成原始線，再以無菌接種環(huán)畫線分離后置35℃溫箱培養(yǎng)。2)尿液標(biāo)本 取5ml 尿液,3000 轉(zhuǎn)/分離心5 分鐘，取離心沉淀物，接種環(huán)取樣涂于普通血平板、麥康凱平板成原始線，再以無菌接種環(huán)畫線分離后置35℃溫箱培養(yǎng)。標(biāo)本處理、檢驗(yàn)與結(jié)果報(bào)告：1)拭子、分泌物標(biāo)本 標(biāo)本涂于普通血平板、麥康凱平板成原始線，再以無菌接種環(huán)畫線分離后置35℃溫箱培養(yǎng)。如遇一個(gè)人上班，則擔(dān)負(fù)1 崗位班、2 崗位班的所有工作。6 注：崗位職責(zé)分開是相對(duì)的，同事間需要互相協(xié)作，互相幫助，共同完成當(dāng)天的工作。③ 腦脊液隱球菌涂片，應(yīng)快速離心后倒去上清液，沉淀涂片、加相應(yīng)的優(yōu)質(zhì)墨汁混勻后鏡檢。 涂片染色：① 抗酸染色嚴(yán)格按照操作規(guī)程，胸腹水、尿液、腦脊液等標(biāo)本應(yīng)在5000 轉(zhuǎn)/分高速離心10 分鐘后，取沉淀涂厚片，自然干燥后固定，按要求染色后鏡檢。 負(fù)責(zé)控感標(biāo)本的處理與報(bào)告，物體表面菌落計(jì)數(shù)標(biāo)本應(yīng)于收到標(biāo)本后2 小時(shí)內(nèi)處理，消毒液標(biāo)本應(yīng)于4 小時(shí)內(nèi)處理。碰到異常的耐藥模式，如碰到耐萬古霉素的葡萄球菌、糞腸球菌，耐泰能的大腸埃希菌、克雷伯菌屬、腸桿菌屬等報(bào)告時(shí)一定要慎重。用于鑒定或藥敏試驗(yàn)的菌落應(yīng)選取培養(yǎng)1824 小時(shí)的純菌落進(jìn)行試驗(yàn)。 負(fù)責(zé)處理上日接種標(biāo)本的菌種鑒定與藥敏試驗(yàn)，觀察血液增菌培養(yǎng)瓶，如發(fā)現(xiàn)有細(xì)菌生長，應(yīng)按三級(jí)報(bào)告制度處理。 上班后首先核查各個(gè)培養(yǎng)箱、冰箱的工作溫度是否在設(shè)定的范圍內(nèi)，并做好記錄；檢查各種培養(yǎng)基及試劑的庫存量，做好需配制的培養(yǎng)基或需領(lǐng)出的試劑的記錄工作，對(duì)需購買的試劑、平板、培養(yǎng)基、染色液等應(yīng)及時(shí)記錄并告訴室組長，以便及時(shí)計(jì)劃報(bào)主任批準(zhǔn)。 負(fù)責(zé)配制培養(yǎng)基，并做好記錄。 厭氧培養(yǎng)應(yīng)接種血平皿或厭氧平皿置于厭氧袋中培養(yǎng)，同時(shí)接種BMP 進(jìn)行普通培養(yǎng)。收到的普通血培養(yǎng)瓶(如AER)應(yīng)進(jìn)行瓶內(nèi)氣壓平衡處理，厭氧培養(yǎng)瓶直接放入培養(yǎng)箱中。標(biāo)本送到實(shí)驗(yàn)室后特殊培養(yǎng)標(biāo)本需在1 小時(shí)內(nèi)接種，普通培養(yǎng)標(biāo)本不得超過2 小時(shí)。 普通培養(yǎng)樣本的接種選擇：① 痰液、咽拭子分別接種：血平皿、麥康凱平皿；② 尿液接種：取100μl 接種血平皿、麥康凱平皿；③ 泌尿生殖道：血平板、麥康凱平板；④ 大便：SS 或中國蘭、血平板；⑤ 各種無菌體液、腦脊液、膿液等標(biāo)本：血平皿、麥康凱平皿，用增菌肉湯增菌；⑥ 衣原體、支原體培養(yǎng)+藥敏，按說明書接種支原體專用培養(yǎng)基；⑦ 真菌培養(yǎng)，各種標(biāo)本均接種沙保弱平皿和真菌斜面培養(yǎng)基；⑧ 所有標(biāo)本在接種的同時(shí)應(yīng)進(jìn)行涂片或?qū)ζ涑猎M(jìn)行革蘭或抗酸染色，并做相應(yīng)的記錄。 接收樣本：核對(duì)各樣本與化驗(yàn)單名是否一致，核查各送檢樣本是否符合要求，否則立即與病房聯(lián)系以便作出相應(yīng)的處理，如退單或重送樣本等，并做好聯(lián)系情況的記錄。 負(fù)責(zé)報(bào)告單的打印、核對(duì)、登記與錄入等工作，簽發(fā)已核對(duì)的所有報(bào)告。 從冰箱內(nèi)取出當(dāng)天所需的各種平板：5%綿羊血平皿、中國藍(lán)培養(yǎng)皿、淋病奈瑟菌培養(yǎng)皿、麥康凱平皿等。 崗位1 班(負(fù)責(zé)樣本接收、核對(duì)、接種以及上日進(jìn)行的鑒定和藥敏結(jié)果進(jìn)行分析、發(fā)報(bào)等工作)。1 崗位班、2 崗位班采用輪轉(zhuǎn)制。 本SOP 的改動(dòng)，可由任一使用本SOP 的工作人員提出，并報(bào)經(jīng)下述人員批準(zhǔn)簽字：室負(fù)責(zé)人、科主任。2. 適用范圍：本實(shí)驗(yàn)室工作人員。保存2天后標(biāo)本由室負(fù)責(zé)人酌情處理。 原始樣本在報(bào)告發(fā)出前均需置4℃保存，不得丟棄。 標(biāo)本當(dāng)天檢測可置4℃保存，如當(dāng)天不檢測應(yīng)置20℃保存。 本SOP 的改動(dòng)，可由任一使用本SOP 的工作人員提出，并報(bào)經(jīng)下述人員批準(zhǔn)簽字：室負(fù)責(zé)人、科主任。適用范圍：微生物檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室的所有臨床檢測標(biāo)本。若陰性對(duì)照出現(xiàn)凝集則需重新稀釋配制診斷菌懸液重做試驗(yàn)。結(jié)果判斷：菌體沉淀至試管底成圓點(diǎn)為陰性管，出現(xiàn)散在顆粒狀凝集為陽性管。同樣方法對(duì)倍稀釋至第四排試管， %生理鹽水作陰性對(duì)照。若陰性對(duì)照出現(xiàn)凝集則需重新稀釋配制診斷菌懸液重做試驗(yàn)。結(jié)果判斷：菌體沉淀至試管底成圓點(diǎn)為陰性管，出現(xiàn)散在顆粒狀凝集為陽性管。同樣方法對(duì)倍稀釋至第四排試管，第 %生理鹽水作陰性對(duì)照。Ⅳ度：鏡下無陰道桿菌，除少量上皮細(xì)胞外，主要的幾乎全是膿細(xì)胞和大量雜菌。Ⅱ