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正文內(nèi)容

微生物實驗室標準操作程序手冊(編輯修改稿)

2024-08-10 22:07 本頁面
 

【文章內(nèi)容簡介】 度。 當水槽內(nèi)測定溫度達到設定溫度時,加熱中斷、指示燈熄滅,溫度保持穩(wěn)定。 在每次水浴箱使用前,放入標準溫度計同時監(jiān)測實際水溫,以校正溫度。 水浴箱工作溫度波動范圍是:預設+2 ℃范圍。 每天應使用水銀溫度計水浴箱應記錄每天溫度;如溫度超出正常范 圍,該溫度應劃上紅圈,并把修正操作記錄下來。 水浴箱內(nèi)外應保持清潔,外殼忌用腐蝕性溶液擦拭。 儀器不用時,需套好防塵罩,以免溫度控制器受潮影響使用。 引用的表格:tab_temp_bath潔凈工作臺維護和保養(yǎng)程序目的:對潔凈工作臺進行適當維護,以保證凈化能力。適用范圍:本SOP 適用于實驗室使用的醫(yī)用潔凈工作臺(BC1300 型)。職責: 實驗室工作人員均應熟知并嚴格遵守本SOP,室負責人監(jiān)督落實。 本SOP 的改動,可由任一使用本SOP 的工作人員提出,并報經(jīng)下述人員批準簽字:室負責人、科主任。程序: 根據(jù)環(huán)境潔凈程度,定期將預過濾器中的濾料拆下清洗,一般間隔時間為3~6 個月。 每次使用潔凈臺后,均需對潔凈臺進行清潔。 定期(一般每半年1 次)計測工作區(qū)風速,如發(fā)現(xiàn)不符合技術參數(shù)要求,則可調(diào)大風機供電電壓。當風機組電壓調(diào)到最大時,則必須更換高效空氣過濾器。(由廠家或院儀器維修人員進行) 做好維護記錄。引用的表格: 儀器設備維護保養(yǎng)記錄表:sop_cl_1可移動紫外消毒車使用操作程序1 目的:正確使用紫外消毒車進行消毒。2 適用范圍:適用于本室使用的ZXC 型紫外線消毒車(上海躍進醫(yī)用光學器械廠生廠)。3 職責: 實驗室工作人員均應熟知并嚴格遵守本SOP,室負責人監(jiān)督落實。 本SOP 的改動,可由任一使用本SOP 的工作人員提出,并報經(jīng)下述人員批準簽字:室負責人、科主任。操作程序: 打開保護門; 用手托住燈臂往上抬至需要位置; 插上電源,打開帶燈開關; 根據(jù)需要設定時間; 使用完畢將按鈕摁到底,同時另一手托住燈臂慢慢將燈管放進燈箱內(nèi)關上保護門。 不同實驗區(qū)的紫外線消毒車勿混用。5 消毒記錄表:tab_cl_record加樣器校準標準操作程序目的:保證加樣器加樣的準確性。加樣器范圍:各種品牌、型號的固定、可調(diào)和多通道加樣器。職責:本SOP 由室負責人執(zhí)行落實。校準程序 校準環(huán)境和用具要求: 室溫:20~25℃,測定中波動范圍不大于177?!妗?電子天平:放置于無塵和震動影響的臺面上,房間盡可能有空調(diào)。稱量時為保證天平內(nèi)的濕度(相對濕度60~90%),天平內(nèi)應放置一裝有10ml 蒸餾水的小燒杯。 小燒杯:5~10ml 體積。 測定液體:溫度為20~25℃的去氣雙蒸水。 選擇校準體積:⑴ 擬校準體積;⑵加樣器標定體積的中間體積;⑶最小可調(diào)體積(不小于擬校準體積的1%)。(4)如為固定體積加樣器,則只有一種校準體積。 校準步驟: 將加樣器調(diào)至擬校準體積,選擇合適的吸頭; 調(diào)節(jié)好天平; 來回吸吹蒸餾水3 次,以使吸頭濕潤,用紗布拭干吸頭; 垂直握住加樣器,將吸頭浸入液面2~3mm 處,緩慢(1~3 秒)一致的吸取蒸餾水; 將吸頭離開液面,靠在管壁,去掉吸頭外部的液體; 將加樣器以30℃角放入稱量燒杯中,緩慢一致地將加樣器壓至第一檔,等待1~3 秒,再壓致第二檔,使吸頭里的液體完全排出; 記錄稱量值; 擦干吸頭外面; 按上述步驟稱量10 次; 取10 次稱量值的均值作為最后加樣器吸取的蒸餾水重量,按附表Ⅰ所列蒸餾水Z 因子計算體積:體積=重量/Z 因子 按校準結果調(diào)節(jié)加樣器 新購的合格的移液器出廠前經(jīng)過廠家校準,使用前無需校準。 每年移液器進行校準一次,自校或由廠家有關部門校準。 做好校準記錄。引用的表格儀器設備校準記錄表:tab_pipt_cal離心機維護保養(yǎng)操作程序目的:對離心機進行正確的維護,以保證儀器正常運轉(zhuǎn)。適用范圍:本SOP 僅適用于本室使用的離心機。職責: 實驗室工作人員均應熟知并嚴格遵守本SOP,室負責人監(jiān)督落實。 本SOP 的改動,可由任一使用本SOP 的工作人員提出,并報經(jīng)下述人員批準簽字:室負責人、科主任。操作程序: 離心室的清潔:為了避免樣本等殘留物的污染,應經(jīng)常對離心機外殼和離心室進行清潔處理。對離心室清潔,應先打開離心機蓋,撥掉電源線,用專用設備將離心機轉(zhuǎn)子旋下,再用中性去污劑(70%的異丙醇/水混合物或乙醇去污染)清潔離心室;離心室內(nèi)的橡膠密封圈經(jīng)去污劑處理后,用水沖洗,再用甘油潤滑。 轉(zhuǎn)子的清潔:轉(zhuǎn)子會被樣本殘留物污染,也可能會被某些化學試劑腐蝕,因此應對轉(zhuǎn)子每月進行清潔維護。每月用中性的清潔劑清潔轉(zhuǎn)子一次,并在儀器使用記錄本上作好記錄,以延長轉(zhuǎn)子的壽命。 離心完畢后,應及時用干的軟布拭去離心室的冷凝水。(此步僅適用于冷凍離心機) 離心結束后,使離心機蓋打開,然后關機。溫度計校準程序目的:保證溫度計的精確性。適用范圍:適用于本實驗室所使用的溫度計。職責:本SOP 由室負責人落實。程序 由設備科人員送質(zhì)檢局對溫度計進行校準。 每年進行1 次。 經(jīng)校準過的溫度計可作為微量恒溫器溫度校溫的參照。引用表格: 儀器設備校準記錄:tab_inst_cal臨床非培養(yǎng)標本的采集及處理操作程序目的:規(guī)范臨床待檢標本的正確采集、送檢和處理。適用范圍:微生物檢驗實驗室的所有臨床檢測標本。職責: 所有采集標本的人員均需按本SOP 操作,實驗室工作人員有責任向臨床醫(yī)生、護士或病人宣教。 本標準操作程序的改動,可由任一使用本SOP 的工作人員提出,并報經(jīng)下述人員批準簽字:室負責人、科主任。操作程序 本實驗室檢測標本為:血清或血漿、痰、生殖道拭子標本、尿液及腦脊液和胸腹水。 做好標本簽收,核對檢驗單與標本標簽是否清楚無誤,送檢標本是否正確、合格,給所有標本按順序編號,按如下操作規(guī)程操作。 查找抗酸菌操作:將標本置于水浴蒸箱加溫殺菌30 分鐘,取標本殘留物或沉淀物加溫涂布玻片,液性標本以3000 轉(zhuǎn)/分鐘離心5 分鐘,取標本殘留物或沉淀物加溫涂布玻片并標注編號后固定,行抗酸染色,先滴加抗酸染色第一液加溫(用酒精燈在玻片下來回加溫置染色液冒熱氣,但無氣泡產(chǎn)生為宜)染色10 分鐘,自來水沖洗凈染液,以硫酸美蘭復染2 分鐘,水洗涼干。鏡檢與報告:油鏡下查找分枝、不規(guī)則紅色桿菌,按如下標準進行結果報告。1)、鏡檢100300 個視野(時間不少于4 分鐘)未發(fā)現(xiàn)抗酸菌,繼續(xù)觀察至300 個視野仍未發(fā)現(xiàn)抗酸菌者報告抗酸菌(—);2)、鏡檢100 個視野找到抗酸菌12 條者,報告抗酸菌可疑(177。),或重涂片或重送標本檢查;3)、鏡檢100 個視野找到抗酸菌39 條者,報告抗酸桿菌陽性(+);4)、鏡檢10 個視野找到抗酸菌19 條者,報告抗酸桿菌陽性(2+);5)、鏡檢每個視野找到抗酸菌19 條者,報告抗酸桿菌陽性(3+);6)、鏡檢每個視野找到抗酸菌多于9 條者,報告抗酸桿菌陽性(4+)。 查找普通細菌操作:液性標本取離心沉淀物涂片,拭子或膿性標本直接涂布玻片并標注編號后固定。同時取大腸標準株(ATCC25922)和金黃色葡萄球菌標準株(ATCC25922)涂片,一起行革蘭氏染色,先滴加第一液染色1 分鐘,水洗,加第二液媒染1 分鐘,水洗干凈;以95%酒精脫色30 秒鐘后立即水洗,再加第四液復染30 秒鐘,水洗后涼干。油鏡下查找菌體并觀察球桿比例;觀察質(zhì)控菌是否合格。 墨汁染色查找隱球菌:液性標本離心取沉淀物涂片,膿性或拭子標本直接涂片并寫號,以無菌接種環(huán)粘取少量印度墨汁與玻片上標本混勻,壓蓋玻片,先低倍鏡下找到視野再轉(zhuǎn)離倍鏡觀察。若找到透亮,圓形強折光,有厚莢膜的菌體報告墨汁染色陽性;否則報告陰性。 白帶常規(guī)檢查:鹽水管直接將棉簽點至玻片后以高倍鏡檢有無滴蟲;涂片標注編號后固定,行革蘭氏染色,先滴加第一液染色1 分鐘,水洗,加第二液媒染1 分鐘,水洗干凈;以95%酒精脫色30 秒鐘后立即水洗,再加第四液復染30 秒鐘,水洗涼干后鏡檢查找革蘭氏陰性雙球菌、霉菌或陽性球菌、線索細胞等。陰道清潔度的按如下判斷標準報告:Ⅰ度:陰道桿菌為主,并可見大量上皮細胞。Ⅱ度:有部份陰道桿菌,但亦有部份膿細胞和雜菌,上皮細胞少見。Ⅲ度:僅見少量陰道桿菌和上皮細胞,有大量膿細胞和雜菌。Ⅳ度:鏡下無陰道桿菌,
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